This study was supported by NIH grants R21HL118661, R56HL124444, and R01HL124444 to CDK, and by NIH grants R00HL103797 and R01HL125695 to JMM.

Bütün hayvan deneyleri Duke Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmış bir protokole göre gerçekleştirilmiştir. her iki cinsten kullanılabilmesine rağmen çalışma bilimsel bir amaç için belirtildiği gibi erkek fareler, bu çalışmada kullanılmıştır. 1. Epilasyon <ol><li> 37 ° C&#39;de ayarlanmış bir kapalı ısıtma yastığı ve izofluran sürekli akışına bağlı bir roket ucu konisi bağlantı oluşan bir ameliyat öncesi hazırlama alanı kurmak anestezinin indüksiyonu öncesinde. </li><li> Anestezi indüksiyon odasında fare yerleştirin. % 3 - 1 ile 1 L / dk ve izofluran O 2 debimetre ayarlayın. Not: Anestezi, tipik olarak% 2 izofluran ile 25 g fare indüklenir. </li><li> yavaşça odasına sallanan ve bir düzeltilmesi refleksi eksikliği gözlemleyerek farenin teşvik yanıtını kontrol edin. </li><li> Açılış öncesinde izofluran temizlemek için O 2 ile odasına yıkayın. Hızla ısıtma p için fareyi hareket ettirinreklam ve roket ucu konisi yoluyla izofluran bağlayın. </li><li> % 1.5 izofluran ayarlayın. Pedal refleks (ayak tutam) tarafından uyaran yanıtını kontrol edin. </li><li> Ameliyat sırasında kurumasını önlemek için her iki göze liberal oftalmik yağ sürün. </li><li> küçük bir elektrik düzeltici kullanarak her iki arka bacaklarda saç tıraş. Cildi laserasyon yaralanmasıdır önlemek için tıraş sırasında gergin cildi tutun. </li><li> Önceden ısıtılmış epilasyon kremi uygulayın ve 1 dakika boyunca bekletin. Yavaşça nemlendirilmiş gazlı bez kullanılarak silin. </li><li> daha sonra cerrahi işlem için, izofluran kapatın ve kafes yatak aspire olmayan fare sağlamak için boş bir kağıt havlu kaplı kurtarma kafesine fareyi hareket ettirin. sternal yatma koruyabilmiştir kadar hayvan izleyin. Aksi takdirde, cerrahi masaya fareyi hareket ettirin. NOT: Epilasyon işlemi cildi tahriş ve perfüzyon ölçümleri etkileyebilir. p önce hayvanın saçlarını çıkardıktan sonra 2 gün, 1 - beklenmesi tavsiye edilirBir ameliyat öncesi perfüzyon taraması erforming veya ameliyat gerçekleştirmek. </li></ol> 2. Ön-Cerrahi Hazırlık <ol><li> Bu işlem sırasında aşağıdaki araçları kullanın; küçük düz cerrahi makas, 2 ince uçlu açılı forseps, küçük Graefe forseps, iğne sürücü forseps, 3 retraktörleri, küçük yaylı makas ve ince uçlu pamuklu çubuk. </li><li> Ameliyat başlamadan önce bir otoklav kullanarak tüm araçları sterilize edin. En fazla 5 hayvanlar için, her cerrahi işlem öncesi ve arasında sıcak boncuk sterilizatör kullanın. 5 daha büyük gruplar ameliyatlar için ek cerrahi alet paketleri sterilize edin. </li><li> kapalı ısıtma yastığı ve izofluran port oluşan steril cerrahi alanında hazırlayın. 10 Stereo diseksiyon mikroskobu altında tüm çalışmaları gerçekleştirmek. </li><li> Anestezisi ve adımları 1.5 1.1 de tarif edildiği gibi fare hazırlamak. </li><li> Fare tamamen uyuşturulmuş olup olmadığını kontrol edin ve cerrahi masaya bir yatar pozisyonda içine yerleştirin. Cerrahi bant kullanarak iki bacak sabitleyin. &lt;/ Li&gt; <li> sıcaklık kontrollü ısıtma yastığı kullanılarak, sıcaklık probu takmak ve yanlışlıkla işlem sırasında çıkardı olmayacak emin olmak için cerrahi bant kullanarak cerrahi platformunun tabanına sabitleyin. </li><li> 3 alternatif povidon-iyot ve alkol mendil kullanarak kesi sitesine temizleyin. Steril cerrahi örtü ile hayvan örtün ve kesi sitesine ortaya çıkarmak için bir delik. </li></ol> Bacak İskemi 3. İndüksiyon <ol><li> Karın doğru diz çalışan, medial uyluk merkezi boyunca bir başlangıç ​​kesi yapmak ve ince makas (Şekil 1A) ile yaklaşık 1 cm kesi uzatmak için bir neşter kullanın. </li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/54166/54166fig1.jpg" /> Şekil 1. Cerrahi Alan ve Fare Arka ayağın İskemi Cerrahisi Damar Anatomik Merkezi. (A) Dış görünümyatar pozisyonda bir fare hindlimb. Yumurtadan çizgi düzgün hindlimb iskemi işlemleri gerçekleştirmek için kesi sitesini gösterir. Proksimal fare hindlimb damarsal (B) Görünüm. Femoral arter (FA) yakın ucu, inguinal ligamanın (IL) altından çıkar. FA uzak ucu popliteal arter (PA) ve safen arter (SA) ayrılmasından yer almaktadır. FA kapalı ana teminat arterler lateral sirkumfleks femoral arter (LCFA), proksimal kaudal femoral arter (PCFA) ve yüzeysel kaudal epigastrik arter (SCEA) bulunmaktadır. femoral ven (FV) FA bitişik çalışır ve venöz şube büyük arter dalları paralel görülebilir. Yıldız (*)., AMEROID konstriktör- veya bitişik harfler yerleştirme için yakın ve uzak siteleri göstermek subakut veya akut iskemi kaynaklı olacak bağlı olarak <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54166/54166fig1large.jpg" target="_blank">, lütfen cli</a>Bu rakamın büyük halini görmek için buraya ck. <ol start="2"><li> forseps kullanarak, kesi açın ve kasık yağ dokusu (IFT) kapsayan membran maruz kalmaktadır. </li><li> delmek IFT ve karın arasındaki ayrılık içine zarından, kapalı forseps kullanma. Yavaşça altında nörovasküler demet açığa karın kaslarının gelen IFT ayırmak için forseps üzerindeki baskıyı bırakın. Önemli anatomik (Şekil 1B) olarak proksimal ve yüzeysel kaudal şube gözlemleyin. </li><li> Retractor takın ve proksimal AMEROID yılanı veya ligasyon sitesi, lateral sirkumfleks femoral arter (Şekil 1B) sadece proksimal maruz proksimal karın dokusu çekin. Lateral sirkumfleks arter proksimal ve yüzeysel kaudal arterlere yaklaşık 5 mm proksimal yatıyor. <ol><li> , Kesi distal parçası haline iki retraktörler, bir medial ve lateral birini eklemek distale uzak IFT çekmeyecerrahi alan cerrahi alanında genişletmek için. </li></ol></li><li> nörovasküler demet kaplayan en dıştaki zar kaldırmak için iki ince forseps kullanın. Yavaşça onları birbirine bağlayan zarının altında forseps ucu kayma, ven ve arter arasındaki ince forseps ucu yarısını yerleştirin. forseps kapatın ve hafifçe membran yırtın. </li><li> ven ve arter arasında kapalı forseps ucunu yerleştirin ve forseps üzerindeki baskıyı bırakarak aralarında bir boşluk oluşturun. arter ve sinir arasında bir boşluk oluşturmak için bu tekniği tekrarlayın. </li><li> Subakut ekstremite iskemi, proksimal femoral arter (Şekil 2) bir AMEROID yılanı yerleştirin. <ol><li> Proksimal AMEROID yılanı yüklemek için, nörovasküler demet onu izole etmek femoral arter altında bir forseps ucunu kaydırın. kavrama yılanının kenarına angled- forseps ikinci bir set kullanın ve femoral arter altında rehberlik. </li><li> s içine femoral arter Layyılanının lot. Popliteal arter ve safen arter (Şekil 2) içine femoral arter çatallanma hemen proksimal konumlandırma, uzak yılanının için tekrarlayın. </li></ol></li></ol><img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/54166/54166fig2.jpg" /> AMEROID konstriktör- ve ligatürler Şekil 2. Yerleştirme. Subakut hindlimb iskemi ikna etmek için femoral arter üzerine yerleştirilen iki AMEROID konstriktör- (A) örneği. Proksimal yılanı lateral sirkumfleks femoral arter (LCFA) sadece yakın yerleştirilir. Distal constrictor popliteal (PA) ve safen arterler (SA) çatallanma sadece yakın yerleştirilir. Konstriktör- arter sağlamak için yukarı bakacak yuva düzgün yılanının içinde ayarlanır ile yüklenir. Akut hindlimb iskemi ikna etmek için femoral arter bitişik harfler (B) örneği. Ligatures (sarı oklar) onlar paneli (B) konstriktör- konumunu kanadını şekilde yerleştirilir ve femoral arter iki bitişik harfler (yıldız) her set arasında transeksiyon edilir. Bar, 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/54166/54166fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="8"><li> Akut ekstremite iskemi, bağlanır ve proksimal femoral arter transect. <ol><li> femoral arter transect için, iplik 7 - yakın yılanının pozisyonuna sadece proksimal arter Ç dikiş ve düğüm (Adım 3.7). İlk 1 mm distalinde bir ikinci bitişik harfleri kravat. </li><li> İki bitişik harfler arasındaki arter transect için yaylı makas kullanın. distal arteryel transeksiyonu için, popliteal arter ve safen arter içine femoral arter çatallanma ayrı, sadece yaklaşık 1 mm yaklaşık iki bitişik harfler yerleştirerek ancak yüzeysel Caud distal olmasını sağlamak, bu adımları yineleyinal epigastrik arter (Şekil 1) </li></ol></li><li> O Vicryl sütürler - kesi kapatın kullanarak 5 kesildi. </li></ol> 4. Perfüzyon Görüntüleme <ol><li> Lazer Doppler perfüzyon kamera (LDPI) altında ayarlanmış 37 ° C ısıtma pedi için fareyi hareket ettirin ve izofluran kaynağına bir roket ucu konisi yoluyla bağlayın. herhangi bir sıcaklık izleme mevcuttur, fare, 37 ° C &#39;ye kadar ısınmaya için, 5 dakika izin verir. </li><li> kamera açın ve görüntü yakalama yazılımı başlatmak. </li><li> &#39;Tarayıcı Ayarları&#39; penceresini açmak için &#39;Yeni Tek Resim&#39; simgesini tıklayın. &#39;4 ms / piksel&#39; ile &#39;Büyük&#39; ​​ve &#39;Tarama Hızı&#39; ile &#39;Tarama Boyutu&#39; olarak ayarlayın. &#39;Tarama Alanı (adet)&#39; bölmesinde x ve y değerlerini değiştirerek tarama alanını ayarlayın. </li><li> video beslemesini görüntülemek için &#39;Video ve Distance&#39; sekmesini tıklayın ve kırmızı çizgileriyle de gösterildiği tarama alanına sığdırmak için fareyi düzenlemek. kalibre etmek &#39;Otomatik Mesafe tıklayınkonuya lazer mesafe. &#39;Konu Detayları&#39; penceresini açmak için &#39;Next&#39; tıklayın. </li><li> konu bilgi ve ilgili yorumlarınızı girin. tarama penceresine geçmek için &#39;İleri&#39; düğmesine tıklayın. </li><li> &#39;Onayla veya Scan Distance geçersiz kıl&#39; açmak iletişim için &#39;Başlat Ölçülmesine&#39; düğmesine tıklayın. Tarama mesafe onaylamak için &#39;OK&#39; tıklayın. Tarama alanının büyüklüğüne bağlı olarak 8 dakika - tarama işlemi başlayacak ve 4 aday gözlemleyin. </li><li> Tarama işlemi tamamlandıktan sonra, &#39;Farklı Kaydet&#39; penceresini gözlemleyin. Dosyayı adlandırın ve kaydedin. </li><li> izofluran kapatın ve boş bir kurtarma kafesine fareyi ve hayvan sternum yatma koruyabilmiştir kadar izler. diğer farelerin bir kafesin içine anestezi kurtarma fare koymayın. </li><li> Görüntü analiz yazılımı açın. &#39;Aç&#39; simgesine tıklayın ve gidin ve analiz için görüntü dosyasını açın. Dosya penceresinde, akı gözlemlemek,fare fotoğraf ve renkli görüntüler. </li><li> akı resmin üzerine ilgi alanları (ROI) bölgesini işaretlemek için, &#39;Show ROI&#39; simgesini tıklayın. Sonraki &#39;Ekle Poligon&#39; düğmesini tıklayın ve ROI çizmek için cerrahi olmayan uzuv imleci sürükleyin. şekli kapatmak için sağ tıklatın. Seç tekrar &#39;Poligon Ekle&#39; ve cerrahi uzuv etrafında eşleşen ROI çizin. </li><li> &#39;Görüntü ROI İstatistik Sonuçları (PU)&#39; penceresi açmak için &#39;İstatistikler&#39; simgesini tıklayın. &#39;Akı%&#39; sütununda akı yüzde farkını dikkate alınmalıdır. NOT: referans olarak görev yapacak çekilen ilk ROI. NOT: Her bir sonraki perfüzyon sintigrafisi öncesinde fare uyutmak için Bölüm 1&#39;de özetlenen adımları izleyin ve adım görüntüye 4.11 4.1 hayvan olarak. </li></ol>

<ol>
	<li>Criqui, M. H., Aboyans, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+peripheral+artery+disease.">Epidemiology of peripheral artery disease.</a> Circ. Res. 116, 1509-1526 (2015).</li><li>Thukkani, A. K., Kinlay, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+intervention+for+peripheral+artery+disease.">Endovascular intervention for peripheral artery disease.</a> Circ. Res. 116, 1599-1613 (2015).</li><li>Vartanian, S. M., Conte, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+intervention+for+peripheral+arterial+disease.">Surgical intervention for peripheral arterial disease.</a> Circ. Res. 116, 1614-1628 (2015).</li><li>Bonaca, M. P., Creager, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+treatment+and+current+management+of+peripheral+artery+disease.">Pharmacological treatment and current management of peripheral artery disease.</a> Circ. Res. 116, 1579-1598 (2015).</li><li>Conte, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Design+and+rationale+of+the+PREVENT+III+clinical+trial:+edifoligide+for+the+prevention+of+infrainguinal+vein+graft+failure.">Design and rationale of the PREVENT III clinical trial: edifoligide for the prevention of infrainguinal vein graft failure.</a> Vasc Endovascular Surg. 39, 15-23 (2005).</li><li>Pomposelli, F. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+decade+of+experience+with+dorsalis+pedis+artery+bypass:+analysis+of+outcome+in+more+than+1000+cases.">A decade of experience with dorsalis pedis artery bypass: analysis of outcome in more than 1000 cases.</a> J. Vasc. Surg. 37, 307-315 (2003).</li><li>Willigendael, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smoking+and+the+patency+of+lower+extremity+bypass+grafts:+a+meta-analysis.">Smoking and the patency of lower extremity bypass grafts: a meta-analysis.</a> J. Vasc. Surg. 42, 67-74 (2005).</li><li>Schillinger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Balloon+angioplasty+versus+implantation+of+nitinol+stents+in+the+superficial+femoral+artery.">Balloon angioplasty versus implantation of nitinol stents in the superficial femoral artery.</a> N. Engl. J. Med. 354, 1879-1888 (2006).</li><li>Marmagkiolis, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=12-month+primary+patency+rates+of+contemporary+endovascular+device+therapy+for+femoro-popliteal+occlusive+disease+in+6,024+patients:+beyond+balloon+angioplasty.">12-month primary patency rates of contemporary endovascular device therapy for femoro-popliteal occlusive disease in 6,024 patients: beyond balloon angioplasty.</a> Catheter. Cardiovasc. Interv. 84, 555-564 (2014).</li><li>Rosenfield, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trial+of+a+Paclitaxel-Coated+Balloon+for+Femoropopliteal+Artery+Disease.">Trial of a Paclitaxel-Coated Balloon for Femoropopliteal Artery Disease.</a> N. Engl. J. Med. 373, 145-153 (2015).</li><li>Tepe, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug-coated+balloon+versus+standard+percutaneous+transluminal+angioplasty+for+the+treatment+of+superficial+femoral+and+popliteal+peripheral+artery+disease:+12-month+results+from+the+IN.PACT+SFA+randomized+trial.">Drug-coated balloon versus standard percutaneous transluminal angioplasty for the treatment of superficial femoral and popliteal peripheral artery disease: 12-month results from the IN.PACT SFA randomized trial.</a> Circulation. 131, 495-502 (2015).</li><li>Couffinhal, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+angiogenesis.">Mouse model of angiogenesis.</a> Am. J. Pathol. 152, 1667-1679 (1998).</li><li>Niiyama, H., Huang, N. F., Rollins, M. D., Cooke, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+model+of+hindlimb+ischemia.">Murine model of hindlimb ischemia.</a> J Vis Exp. , (2009).</li><li>McClung, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle-specific+genetic+determinants+contribute+to+the+differential+strain-dependent+effects+of+hindlimb+ischemia+in+mice.">Skeletal muscle-specific genetic determinants contribute to the differential strain-dependent effects of hindlimb ischemia in mice.</a> Am. J. Pathol. 180, 2156-2169 (2012).</li><li>Dokun, A. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+trait+locus+(LSq-1)+on+mouse+chromosome+7+is+linked+to+the+absence+of+tissue+loss+after+surgical+hindlimb+ischemia.">A quantitative trait locus (LSq-1) on mouse chromosome 7 is linked to the absence of tissue loss after surgical hindlimb ischemia.</a> Circulation. 117, 1207-1215 (2008).</li><li>Rivard, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+impairment+of+angiogenesis.">Age-dependent impairment of angiogenesis.</a> Circulation. 99, 111-120 (1999).</li><li>Hazarika, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+angiogenesis+after+hindlimb+ischemia+in+type+2+diabetes+mellitus:+differential+regulation+of+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+1+and+soluble+vascular+endothelial+growth+factor+receptor+1.">Impaired angiogenesis after hindlimb ischemia in type 2 diabetes mellitus: differential regulation of vascular endothelial growth factor receptor 1 and soluble vascular endothelial growth factor receptor 1.</a> Circ. Res. 101, 948-956 (2007).</li><li>Couffinhal, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+collateral+vessel+development+associated+with+reduced+expression+of+vascular+endothelial+growth+factor+in+ApoE-/-+mice.">Impaired collateral vessel development associated with reduced expression of vascular endothelial growth factor in ApoE-/- mice.</a> Circulation. 99, 3188-3198 (1999).</li><li>Tang, G. L., Chang, D. S., Sarkar, R., Wang, R., Messina, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+gradual+or+acute+arterial+occlusion+on+skeletal+muscle+blood+flow,+arteriogenesis,+and+inflammation+in+rat+hindlimb+ischemia.">The effect of gradual or acute arterial occlusion on skeletal muscle blood flow, arteriogenesis, and inflammation in rat hindlimb ischemia.</a> J. Vasc. Surg. 41, 312-320 (2005).</li><li>Yang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+mechanism+regulating+blood+flow+recovery+in+acute+versus+gradual+femoral+artery+occlusion+are+distinct+in+the+mouse.">Cellular and molecular mechanism regulating blood flow recovery in acute versus gradual femoral artery occlusion are distinct in the mouse.</a> J. Vasc. Surg. 48, 1546-1558 (2008).</li><li>Litvak, J., Siderides, L. E., Vineberg, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+experimental+production+of+coronary+artery+insufficiency+and+occlusion.">The experimental production of coronary artery insufficiency and occlusion.</a> Am. Heart J. 53, 505-518 (1957).</li><li>Bredee, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+ameroid+constrictor.+Preliminary+communication.">An improved ameroid constrictor. Preliminary communication.</a> J. Surg. Res. 9, 107-112 (1969).</li><li>McClung, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subacute+limb+ischemia+induces+skeletal+muscle+injury+in+genetically+susceptible+mice+independent+of+vascular+density.">Subacute limb ischemia induces skeletal muscle injury in genetically susceptible mice independent of vascular density.</a> J. Vasc. Surg. , (2015).</li><li>Hellingman, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+surgical+procedures+for+hind+limb+ischaemia+mouse+models+result+in+differences+in+collateral+formation.">Variations in surgical procedures for hind limb ischaemia mouse models result in differences in collateral formation.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 40, 796-803 (2010).</li><li>Kochi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+the+arterial+anatomy+of+the+murine+hindlimb:+functional+role+in+the+design+and+understanding+of+ischemia+models.">Characterization of the arterial anatomy of the murine hindlimb: functional role in the design and understanding of ischemia models.</a> PloS one. 8, e84047 (2013).</li></ol>

The authors have no conflicts of interest to disclose.

Belki de bu prosedürde en zorlu aşama femoral venden femoral arter ayrılmasıdır. büyük çaplı ve arterin kıyasla femoral ven daha ince duvarları delmek karşı duyarlılığının artırılması ve cerrahi manipülasyon sırasında yırtılma. ven kesintiye olasılığı PBS ile nemlendirilmiş steril bez kullanarak nemli yara tutarak azaltılabilir. Tüm forseps, keskinleştirilmiş hizalanır ve damar ve çevre dokular hassas işleme izin vermek için aralarında serbest olmasını sağlamak için de önemli...

Periferik arter hastalığı (PAH), gelişmiş ülkelerde 1 kardiyovasküler morbidite ve mortalitenin önde gelen nedenidir. Elde edilen egzersiz veya dinlenme ağrısı ve bazen bacak amputasyon gerektiren ülser ve kangren iyileşmeyen ile ekstremite iskemi neden periferik arterlerin aterosklerotik tıkanması PAD sonuçları. Esasen etkili medikal tedaviler 4 mevcut olarak PAD hedefleyen terapiler, öncelikle endovasküler 2 veya cerrahi revaskülarizasyon 3 yöneliktir. Baypas greft bazı toplumlarda (örneğin, sigara içen kadınlar, sigara safen ven greft) 6,7 kötüdür 5 (5 yıl içinde% 50 kadar) yüksek başarısızlık fiyat bilgisi Ne yazık ki, revaskülarizasyon, genellikle sınırlı fayda sağlar. Böyle anjiyoplasti ve stent olarak Endovasküler yaklaşımlar, aynı zamanda (1 yıl içinde% 50 fazla) yüksek restenoz oranları tehlikeye edilir, i özellikleilaç salınımlı balonlar ve stentler kullanımı biraz 9-11 sonuçlar alınmasını sağlamıştır rağmen n, hastalık 8 Femoropopliteal. PAD için yeni tedaviler geliştirmek için güvenilir insan hastalığı yeniden hayvan modelleri geliştirmek için gereklidir. Bugüne kadar, PAD en yaygın model en çok farelerde 12,13 gerçekleştirilir arka bacak iskemisi modeli (HLI) &#39;dir. en yaygın belirtisi, model proksimal ve distal femoral arter cerrahi ligasyonu gerektirir ve müdahil yan dalları kan akımı ve akut ekstremite iskemi indüksiyon tıkanması ile sonuçlanan geminin eksizyonu ile izledi. HLI periferik ekstremite kas dokusunda anjiyojenik ve arteriyojenik tepkiler ve bu tepkilerin çeşitli terapiler (örneğin, ilaçlar, gen aktarım, kök hücreler) etkilerini incelemek amacıyla öncelikle kullanılır olmuştur. Daha yakın zamanlarda, bizim grup iskelet kas hücrelerinin rolünü incelemek için bu modeli kullandı in tepki iskemi ve sonuçları 14 genetik farkların etkilerini ekstremite için. HLI modeli mevcut iskemi damar ve kas yanıtları genetik (yani, doğal suş) 15 bağlıdır anlayış, yaş 16 ve diyabet 17 de dahil olmak üzere, diğer hastalıklar veya ateroskleroz ile ilgili koşullar, varlığını veya yokluğunu kolaylaştırmıştır hiperkolesterolemi 18. Ancak, geleneksel HLI modelinin önemli bir zayıflık insan PAD periferal arterlerde tıkayıcı aterosklerotik lezyonların kademeli gelişmenin bir sonucu olarak kronik iskemi neden halbuki, akut ekstremite iskemisi 12,13 modeli olmasıdır. Bu zayıflığı aşmak için bir girişim, Tang ve arkadaşları başlangıçta AMEROID konstriktör- 19 kullanılarak kademeli femoral arter tıkanıklığı bir fare modeli, ve daha sonra d aynı grup geliştirdiBenzer bir fare modeli 20 eveloped. AMEROID konstriktör- kronik miyokardiyal iskemi 21,22 bir köpek modelinde 1950&#39;lerde ilk açıklanmıştır. Bu cihazlar, genellikle kazein, higroskopik bir malzemeden bir iç tabaka saran bir dış metal manşon, ve bir arter etrafına yerleştirilen zaman çevre dokulardan nemi emer onlar yavaş yavaş damar tıkanıklığı neden olur. Modelin bunların modifikasyonda, Yang ve ark., Proksimal ve cerrahi ligasyon sitelerinin benzer yerlerde distal femoral arter hem konstriktör- yerleştirilir ve geleneksel modelde olduğu gibi, femoral arter yan dalları bağlanmıştır. Ameliyat sonrası 5 hafta ve daha az kas nekrozu 20 - Akut HLI karşılaştırıldığında, AMEROID konstriktör kaynaklı iskeminin enflamatuar ve kesilme baskısı bağımlı gen alt ekspresyonu, düşük kan akışı geri 4 sonuçlandı. Bu gözlemlere dayanarak, bu kademeli arter tıkanıklığı P bir model olabilir hissedildiinsan hastalığı için daha uygun AD. Özellikle, ilk çalışmada, AMEROID konstriktör kaynaklı iskeminin etkileri yalnızca işemi kaynaklı kas nekroz 15 göreceli olarak dirençli olan, C57BL / 6 fareleri 19 incelendi. Son zamanlarda daha yavaş iskemi modelinde değişik ve daha iskemi, hassas BALB / C fare türünde 23 etkilerini inceledi. Modelin ilk tezahürü olarak, proksimal ve distal femoral arter hem konstriktör- yerleştirilen ancak bozulmamış tüm yan dalları bıraktı. İkinci, daha hafif değişiklik, biz sadece proksimal femoral arter tek bir yılanı yerleştirilir ve yine bozulmamış arterin tüm yan braches bıraktı. Bu modele göre, her iki modifikasyon, biz, bu BALB / c fareleri, ancak C57BL / 6 fareleri bulunan benzer kan akışını ve vasküler yoğunluğa sahip olmasına rağmen önemli bir kas nekrozunu gösterilir. Önceki çalışmamızda 14 benzer şekilde, bu bulgular o bacak kası gösterdiYaralanma sadece kan akımı etkisinde, ancak kısmen genetik yapılarına bağlı olduğu değildir. Ayrıca, biz ekstremite kan akımı böylece modeli birden fazla &#39;subakut&#39; yerine kademeli ekstremite iskemi gibi görünüyor, 3 gün içinde nadir düştü bulundu. Bu önceki çalışmalara göre, arka bacak iskemisi uyarılması için tek bir yöntem, her durumda uygun olmayabilir açıkça görülmektedir. Koşullarında (örneğin, genetik farklılıkları ve varlığı ya da ko-morbid koşullar yokluğunda) etkisi damar ve iskelet kas özel cevapları, çeşitli araştırmacılar bulabilir için gerekli kronik olup ve / veya en iyi şekilde arka bacak iskemisi şiddetini değiştirmek için kendi amaçlarına uygun. Ayrıca, model önceki tariflerde tipik haliyle tekniğin güvenilir arası Araştırmacı tekrarlanabilirliği kolaylaştırmak için uygun bir anatomik yerler yoktu. Bu yazıda, fare akut veya subakut ya hindlimb iskemi uyarılması için yöntemleraçıklanmaktadır ve hassas anatomik oluşumlar bulunur.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="698">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11251-35</td>
			<td style="width:167px;">Dumoxel</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dumont Style 5 Mini Forceps</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11200-14</td>
			<td>Inox</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Extra Fine Bonn Scissors</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">7-0 Silk Suture</td>
			<td style="width:176px;">Sharpoint</td>
			<td style="width:139px;">DA-2527N</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">5-0 Coated Vicryl Suture</td>
			<td style="width:176px;">Ethicon</td>
			<td style="width:139px;">J463G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Graefe Forceps</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">11053-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vannas Spring Scissors</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;">15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:216px;">Artifical Tears Ointment</td>
			<td style="width:176px;">Rugby Laboratories</td>
			<td>0536-6550-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Surgical Tape</td>
			<td style="width:176px;">3M</td>
			<td style="width:139px;">1530-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fine Cotton Swabs</td>
			<td style="width:176px;">Contec</td>
			<td style="width:139px;">SC-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Temperature Controller</td>
			<td style="width:176px;">Physitemp</td>
			<td style="width:139px;">TCAT-2DF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">Ameroid Constrictors</td>
			<td style="width:176px;">Research Instruments SW</td>
			<td style="width:139px;">MMC-0.25 x 1.00-SS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hot Bead Sterilizer</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Deltaphase Isothermal Pad</td>
			<td style="width:176px;">Braintree Scientific</td>
			<td style="width:139px;">39DP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Needle Driver</td>
			<td style="width:176px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Phosphate Buffered Saline&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Gibco</td>
			<td style="width:139px;">10010-023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Moor LDPI</td>
			<td style="width:176px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:139px;">moorLDI2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:216px;">moorLDI Measurement software</td>
			<td style="width:176px;">Moor Instruments</td>
			<td style="width:139px;">v. 6.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Hair Removal Cream</td>
			<td style="width:176px;">Nair</td>
			<td style="width:139px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

methods for acute and subacute murine hindlimb ischemia

Periferik arter hastalığı (PAH) güvenilir bu hastalık için yeni tedavilerin geliştirilmesi için gerekli olan insan hastalığı yeniden kardiyovasküler morbidite ve gelişmiş ülkelerde ölüm ve hayvan modellerinde önde gelen nedenidir. Fare hindlimb iskemi modeli yaygın olarak bu amaçla kullanılmaktadır, ancak femoral arter ligasyonu ile akut ekstremite iskemisi uyaran standart bir uygulama iskemi vasküler ve iskelet kas dokusu yanıtları incelemek için araştırmacıların yeteneğini tehlikeye, önemli doku nekrozuna neden olabilir . Femoral arter ligasyonu için alternatif bir yaklaşım AMEROID konstriktör- kullanımı yoluyla yavaş yavaş femoral arter oklüzyonu meydana gelmesidir. daha yavaş, sub-akut iskemi ile sonuçlanır - 3 gün, femoral arter ligasyonu siteleri ile aynı ya da farklı yerlerde femoral arter etrafına yerleştirildiğinde, bu cihazlar üzerinde 1 arter tıkanması. Bu w, daha az önemli iskelet kası doku nekrozuna nedenhich daha yakından insan PAD görülen yanıtları taklit edebilir. genetik altyapı etkiler hem akut ve subakut iskemi modellerinde çıktıları, çünkü fare suşu dikkate en iyi modeli seçiminde önemlidir çalışılmaktadır. Bu yazıda fare subakut veya akut hindlimb iskemi ikna etmek için uygun prosedür ve fare femoral arter üzerinde bitişik harfler veya AMEROID konstriktör- anatomik yerleşimi anlatılır.

Fare arka bacak damar sistemini uygun şekilde tanımlanması, burada açıklandığı gibi, subakut ve akut arka bacak iskemisi uyarılması için teknikler tekrarlanabilirliği sağlamak için çok önemlidir. Hayvan çalışmalarında kalıcı sapması, ilave olarak, diğer faktörler anestezi Çeşidi, hayvan pozisyonu (sırtüstü vs eğilimli) ve vücut sıcaklığına (bakınız Şekil 3) de dahil olmak üzere, lazer Doppler perfüzyon görüntüleme (LDP...

Watch this Scientific Journal Video about Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia at JoVE.com

Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

Surgical induction of hindlimb ischemia in the mouse is useful to examine angiogenesis, however this is compromised in certain inbred mouse strains that display marked ischemia-induced tissue necrosis. Methods are described to induce subacute limb ischemia using ameroid constrictors to circumvent this problem through the induction of gradual arterial occlusion.

Akut ve Subakut Fare Arka ayağın İskemi Yöntemleri

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably ...

methods-for-acute-and-subacute-murine-hindlimb-ischemia

Research

JoVE Journal

Medicine

16.2K Görüntüleme.  Duke University Medical Center. Surgical induction of hindlimb ischemia in the mouse is useful to examine angiogenesis, however this is compromised in certain inbred mouse strains that display marked ischemia-induced tissue necrosis. Methods are described to induce subacute limb ischemia using ameroid constrictors to circumvent this problem through the induction of gradual arterial occlusion. 

Video: Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

Expired CO2 Measurement in Intubated or Spontaneously Breathing Patients from the Emergency Department

Carbon dioxide (CO2) along with oxygen (O2) share the role of being the most important gases in the human body. The measuring of expired CO2 at the mouth has solicited growing clinical interest among physicians in the emergency department for various indications: (1) surveillance et monitoring of the intubated patient; (2) verification of the correct positioning of an endotracheal tube; (3) monitoring of a patient in cardiac arrest; (4) achieving normocapnia in intubated head trauma patients; (5) monitoring ventilation during procedural sedation. The video allows physicians to familiarize themselves with the use of capnography and the text offers a review of the theory and principals involved. In particular, the importance of CO2 for the organism, the relevance of measuring expired CO2, the differences between arterial and expired CO2, the material used in capnography with their artifacts and traps, will be reviewed. Since the main reluctance in the use of expired CO2 measurement is due to lack of correct knowledge concerning the physiopathology of CO2 by the physician, we hope that this explanation and the video sequences accompanying will help resolve this limitation.

Expired CO2 Measurement in Intubated or Spontaneously Breathing Patients from the Emergency Department

This video describes how to perform CO2 measurement in intubated as well as spontaneously breathing patients. The main clinical indications refer to emergency situations: (1) verifying adequate positioning of an endotracheal tube; (2) achieving normocapnia in trauma patients; (3) monitoring ventilation in the case of procedural sedation.

Süresi doldu CO 2</subAcil Servisten Entübe veya kendiliğinden nefes alamayan hastalarda> Ölçüm

Carbon dioxide (CO2) along with oxygen (O2) share the role of being the most important gases in the human body. The measuring of expired CO2 at the mouth ...

Tıp

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ischemia and reperfusion. Immune response includes cytokine expression and release or secretion of endogenous ligands of innate immune receptors. Activation of innate immunity can potentially modulate infarct size. We have modified an existing murine closed-chest model using hanging weights which could be useful for studying myocardial pre- and postconditioning and the role of innate immunity in myocardial ischemia and reperfusion. This model allows animals to recover from surgical trauma before onset of myocardial ischemia.
Volatile anesthetics have been intensely studied and their preconditioning effect for the ischemic heart is well known. However, this protective effect precludes its use in open chest models of coronary artery ligation. Thus, another advantage could be the use of the well controllable volatile anesthetics for instrumentation in a chronic closed-chest model, since their preconditioning effect lasts up to 72 hours. Chronic heart diseases with intermittent ischemia and multiple hit models are other possible applications of this model.
For the chronic closed-chest model, intubated and ventilated mice undergo a lateral blunt thoracotomy via the 4th intercostal space. Following identification of the left anterior descending a ligature is passed underneath the vessel and both suture ends are threaded through an occluder. Then, both suture ends are passed through the chest wall, knotted to form a loop and left in the subcutaneous tissue. After chest closure and recovery for 5 days, mice are anesthetized again, chest skin is reopened and hanging weights are hooked up to the loop under ECG control.
At the end of the ischemia/reperfusion protocol, hearts can be stained with TTC for infarct size assessment or undergo perfusion fixation to allow morphometric studies in addition to histology and immunohistochemistry.

Surgical trauma induces an inflammatory response. Cytokines and endogenous ligands are known to modulate myocardial infarct size following ischemia and reperfusion. We present a modified closed-chest model of murine ischemia and reperfusion using hanging weights to minimize effects of thoracotomy.

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

A Research Method For Detecting Transient Myocardial Ischemia In Patients With Suspected Acute Coronary Syndrome Using Continuous ST-segment Analysis

Each year, an estimated 785,000 Americans will have a new coronary attack, or acute coronary syndrome (ACS). The pathophysiology of ACS involves rupture of an atherosclerotic plaque; hence, treatment is aimed at plaque stabilization in order to prevent cellular death. However, there is considerable debate among clinicians, about which treatment pathway is best: early invasive using percutaneous coronary intervention (PCI/stent) when indicated or a conservative approach (i.e., medication only with PCI/stent if recurrent symptoms occur).
There are three types of ACS: ST elevation myocardial infarction (STEMI), non-ST elevation MI (NSTEMI), and unstable angina (UA). Among the three types, NSTEMI/UA is nearly four times as common as STEMI. Treatment decisions for NSTEMI/UA are based largely on symptoms and resting or exercise electrocardiograms (ECG). However, because of the dynamic and unpredictable nature of the atherosclerotic plaque, these methods often under detect myocardial ischemia because symptoms are unreliable, and/or continuous ECG monitoring was not utilized.
Continuous 12-lead ECG monitoring, which is both inexpensive and non-invasive, can identify transient episodes of myocardial ischemia, a precursor to MI, even when asymptomatic. However, continuous 12-lead ECG monitoring is not usual hospital practice; rather, only two leads are typically monitored. Information obtained with 12-lead ECG monitoring might provide useful information for deciding the best ACS treatment.
Purpose. Therefore, using 12-lead ECG monitoring, the COMPARE Study (electroCardiographic evaluatiOn of ischeMia comParing invAsive to phaRmacological trEatment) was designed to assess the frequency and clinical consequences of transient myocardial ischemia, in patients with NSTEMI/UA treated with either early invasive PCI/stent or those managed conservatively (medications or PCI/stent following recurrent symptoms). The purpose of this manuscript is to describe the methodology used in the COMPARE Study.
Method. Permission to proceed with this study was obtained from the Institutional Review Board of the hospital and the university. Research nurses identify hospitalized patients from the emergency department and telemetry unit with suspected ACS. Once consented, a 12-lead ECG Holter monitor is applied, and remains in place during the patient's entire hospital stay. Patients are also maintained on the routine bedside ECG monitoring system per hospital protocol. Off-line ECG analysis is done using sophisticated software and careful human oversight.

Continuous 12-lead electrocardiographic (ECG) monitoring can identify transient myocardial ischemia, even when asymptomatic, among patients with suspected acute coronary syndrome (ACS). In this article we describe our method for initiating patient monitoring using a Holter device, downloading the ECG data for off-line analysis, and how to utilize the ECG software to identify transient ischemia.

Sürekli ST segment analizi kullanarak Şüpheli Akut Koroner Sendromlu Hastalarda Geçici Miyokard İskemi Teşhisi İçin Bir Araştırma Yöntemi

Each year, an estimated 785,000 Americans will have a new coronary attack, or acute coronary syndrome (ACS). The pathophysiology of ACS involves rupture ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often unreported mortality rates that may confound analyses. Bilateral renal pedicle clamping is commonly used to induce IR-AKI, but differences between effective clamp pressures and/or renal responses to ischemia between kidneys often lead to more variable results. In addition, shorter clamp times are known to induce more variable tubular injury, and while mice undergoing bilateral injury with longer clamp times develop more consistent tubular injury, they often die within the first 3 days after injury due to severe renal insufficiency. To improve post-injury survival and obtain more consistent and predictable results, we have developed two models of unilateral ischemia-reperfusion injury followed by contralateral nephrectomy. Both surgeries are performed using a dorsal approach, reducing surgical stress resulting from ventral laparotomy, commonly used for mouse IR-AKI surgeries. For induction of moderate injury BALB/c mice undergo unilateral clamping of the renal pedicle for 26 min and also undergo simultaneous contralateral nephrectomy. Using this approach, 50-60% of mice develop moderate AKI 24 hr after injury but 90-100% of mice survive. To induce more severe AKI, BALB/c mice undergo renal pedicle clamping for 30 min followed by contralateral nephrectomy 8 days after injury. This allows functional assessment of renal recovery after injury with 90-100% survival. Early post-injury tubular damage as well as post injury fibrosis are highly consistent using this model.

We describe models of moderate and severe ischemia-reperfusion-induced kidney injury in which the mice undergo unilateral renal pedicle clamping followed by simultaneous or delayed contralateral nephrectomy, respectively. These models consistently give rise to renal dysfunction and post-injury fibrosis, but injury severity and survival are dependent on mouse background, age and surgical equipment.

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

Ischemic Tissue Injury in the Dorsal Skinfold Chamber of the Mouse: A Skin Flap Model to Investigate Acute Persistent Ischemia

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are still occurring, particularly in reconstructive flap surgery. Multiple experimental flap models have been developed to analyze underlying causes and mechanisms and to investigate treatment strategies to prevent ischemic complications. The limiting factor of most models is the lacking possibility to directly and repetitively visualize microvascular architecture and hemodynamics. The goal of the protocol was to present a well-established mouse model affiliating these before mentioned lacking elements. Harder et al. have developed a model of a musculocutaneous flap with a random perfusion pattern that undergoes acute persistent ischemia and results in ~50% necrosis after 10 days if kept untreated. With the aid of intravital epi-fluorescence microscopy, this chamber model allows repetitive visualization of morphology and hemodynamics in different regions of interest over time. Associated processes such as apoptosis, inflammation, microvascular leakage and angiogenesis can be investigated and correlated to immunohistochemical and molecular protein assays. To date, the model has proven feasibility and reproducibility in several published experimental studies investigating the effect of pre-, peri- and postconditioning of ischemically challenged tissue.

The window of the murine dorsal skinfold chamber presented visualizes a zone of acute persistent ischemia of a musculocutaneous flap. Intravital epi-fluorescence microscopy permits for direct and repetitive assessment of the microvasculature and quantification of hemodynamics. Morphologic and hemodynamic results can further be correlated with histological and molecular analyses.

Mouse Dorsal Skinfold Odası&#39;nda İskemik Doku Yaralanması: Bir Cilt Flap Model Akut Kalıcı iskemisi Araştırma

Despite profound expertise and advanced surgical techniques, ischemia-induced complications ranging from wound breakdown to extensive tissue necrosis are ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, hypotension, necrotizing enterocolitis, bowel transplantation, trauma and chronic inflammation. Intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury is a consequence of acute mesenteric ischemia, caused by inadequate blood flow through the mesenteric vessels, resulting in intestinal damage. Reperfusion following ischemia can further exacerbate damage of the intestine. The mechanisms of IR injury are complex and poorly understood. Therefore, experimental small animal models are critical for understanding the pathophysiology of IR injury and the development of novel therapies.
Here we describe a mouse model of acute intestinal IR injury that provides reproducible injury of the small intestine without mortality. This is achieved by inducing ischemia in the region of the distal ileum by temporally occluding the peripheral and terminal collateral branches of the superior mesenteric artery for 60 min using microvascular clips. Reperfusion for 1 hr, or 2 hr after injury results in reproducible injury of the intestine examined by histological analysis. Proper position of the microvascular clips is critical for the procedure. Therefore the video clip provides a detailed visual step-by-step description of this technique. This model of intestinal IR injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Here we describe the detailed procedure of intestinal ischemia-reperfusion in mice which results in reproducible injury without mortality to encourage the standardization of this technique across the field. This model of intestinal ischemia-reperfusion injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Open Tracheostomy Gastric Acid Aspiration Murine Model of Acute Lung Injury Results in Maximal Acute Nonlethal Lung Injury

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute respiratory distress syndrome (ARDS), characterized by neutrophilic alveolitis, and injury to both alveolar epithelium and vascular endothelium. Clinically, ARDS is defined by acute onset of hypoxemia, bilateral patchy pulmonary infiltrates and non-cardiogenic pulmonary edema. Human studies have provided us with valuable information about the physiological and inflammatory changes in the lung caused by ARDS, which has led to various hypotheses about the underling mechanisms. Unfortunately, difficulties determining the etiology of ARDS, as well as a wide range of pathophysiology have resulted in a lack of critical information that could be useful in developing therapeutic strategies.
Translational animal models are valuable when their pathogenesis and pathophysiology accurately reproduce a concept proven in both in vitro and clinical settings. Although large animal models (e.g., sheep) share characteristics of the anatomy of human trachea-bronchial tree, murine models provide a host of other advantages including: low cost; short reproductive cycle lending itself to greater data acquisition; a well understood immunologic system; and a well characterized genome leading to the availability of a variety of gene deletion and transgenic strains. A robust model of low pH induced ARDS requires a murine ALI that targets mainly the alveolar epithelium, secondarily the vascular endothelium, as well as the small airways leading to the alveoli. Furthermore, a reproducible injury with wide differences between different injurious and non-injurious insults is important.
The murine gastric acid aspiration model presented here using hydrochloric acid employs an open tracheostomy and recreates a pathogenic scenario that reproduces the low pH pneumonitis injury in humans. Additionally, this model can be used to examine interaction of a low pH insult with other pulmonary injurious entities (e.g., food particles, pathogenic bacteria).

This protocol induces acute lung injury in a mouse that has close fidelity to the pathogenesis of acid pneumonitis observed in humans. We generate a maximal acute nonlethal low pH lung injury and account for differences in rodent-human anatomic respiratory structure using an open tracheostomy coupled with circumferential pressure release.

Akut Akciğer Hasarı Açık Trakeostomi Gastrik Asit Aspirasyon Fare Modeli Maksimal Akut Ölümcül olmayan Akciğer Hasarı Sonuçlar

Acid pneumonitis is a major cause of sterile acute lung injury (ALI) in humans. Acid pneumonitis spans the clinical spectrum from asymptomatic to acute ...

Combined Intravital Microscopy and Contrast-enhanced Ultrasonography of the Mouse Hindlimb to Study Insulin-induced Vasodilation and Muscle Perfusion

It has been demonstrated that insulin's vascular actions contribute to regulation of insulin sensitivity. Insulin's effects on muscle perfusion regulate postprandial delivery of nutrients and hormones to insulin-sensitive tissues. We here describe a technique for combining intravital microscopy (IVM) and contrast-enhanced ultrasonography (CEUS) of the adductor compartment of the mouse hindlimb to simultaneously visualize muscle resistance arteries and perfusion of the microcirculation in vivo. Simultaneously assessing insulin's effect at multiple levels of the vascular tree is important to study relationships between insulin's multiple vasoactive effects and muscle perfusion. Experiments in this study were performed in mice. First, the tail vein cannula is inserted for the infusion of anesthesia, vasoactive compounds and ultrasound contrast agent (lipid-encapsulated microbubbles). Second, a small incision is made in the groin area to expose the arterial tree of the adductor muscle compartment. The ultrasound probe is then positioned at the contralateral upper hindlimb to view the muscles in cross-section. To assess baseline parameters, the arterial diameter is assessed and microbubbles are subsequently infused at a constant rate to estimate muscle blood flow and microvascular blood volume (MBV). When applied before and during a hyperinsulinemic-euglycemic clamp, combined IVM and CEUS allow assessment of insulin-induced changes of arterial diameter, microvascular muscle perfusion and whole-body insulin sensitivity. Moreover, the temporal relationship between responses of the microcirculation and the resistance arteries to insulin can be quantified. It is also possible to follow-up the mice longitudinally in time, making it a valuable tool to study changes in vascular and whole-body insulin sensitivity.

Insulin-induced vasodilation regulates muscle perfusion and increases the microvascular surface area (microvascular recruitment) available for solute exchange between blood and tissue interstitium. Combined intravital microscopy and contrast-enhanced ultrasonography is presented to simultaneously assess insulin&#39;s action at the larger vessels and the microcirculation in vivo.

Intravital mikroskobu ve kontrast-artırılmış Ultrasonografi fare Hindlimb, insülin kaynaklı vazodilatasyon ve kas perfüzyon çalışmaya kombine

It has been demonstrated that insulin's vascular actions contribute to regulation of insulin sensitivity. Insulin's effects on muscle perfusion regulate ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular disease is the development of ischemia. In severe cases, patients can develop critical limb ischemia in which they experience constant pain and an increased risk of limb amputation. Current therapies for peripheral ischemia include bypass surgery or percutaneous interventions such as angioplasty with stenting or atherectomy to restore blood flow. However, these treatments often fail to the continued progression of vascular disease or restenosis or are contraindicated due to the overall poor health of the patient. A promising potential approach to treat peripheral ischemia involves the induction of therapeutic neovascularization to allow the patient to develop collateral vasculature. This newly formed network alleviates peripheral ischemia by restoring perfusion to the affected area. The most frequently employed preclinical model for peripheral ischemia utilizes the creation of hind limb ischemia in healthy rabbits through femoral artery ligation. In the past, however, there has been a strong disconnect between the success of preclinical studies and the failure of clinical trials regarding treatments for peripheral ischemia. Healthy animals typically have robust vascular regeneration in response to surgically induced ischemia, in contrast to the reduced vascularity and regeneration in patients with chronic peripheral ischemia. Here, we describe an optimized animal model for peripheral ischemia in rabbits that includes hyperlipidemia and diabetes. This model has reduced collateral formation and blood pressure recovery in comparison to a model with a higher cholesterol diet. Thus, the model may provide better correlation with human patients with compromised angiogenesis from the common co-morbidities that accompany peripheral vascular disease.

We describe a surgical procedure used to induce peripheral ischemia in rabbits with hyperlipidemia and diabetes. This surgery acts as a preclinical model for conditions experienced in peripheral artery disease in patients. Angiography is also described as a means to measure the extent of introduced ischemia and recovery of perfusion.

Diyabetik tavşanların arka ekstremite Iskemi preklinik modeli

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard therapy, a considerable number of CLI patients are not suited for either surgical or endovascular revascularization. Angiogenic therapies are emerging as an option for these patients but are currently still under investigation. Before application in humans, those therapies must be tested in animal models and its mechanisms must be clearly understood. An animal model of hindlimb ischemia (HLI) has been developed by the ligation and excision of the distal external iliac and femoral arteries and veins in mice. A comprehensive panel of tests was assembled to assess the effects of ischemia and putative angiogenic therapies at functional, histologic and molecular levels. Laser Doppler was used for the flow measurement and functional assessment of perfusion. Tissue response was evaluated by the analysis of capillary density after staining with the anti-CD31 antibody on histological sections of gastrocnemius muscle and by measurement of collateral vessel density after diaphonization. Expression of angiogenic genes was quantified by RT-PCR targeting selected angiogenic factors exclusively in endothelial cells (ECs) after laser capture microdissection from mice gastrocnemius muscles. These methods were sensitive in identifying differences between ischemic and non-ischemic limbs and between treated and non-treated limbs. This protocol provides a reproducible model of CLI and a framework for testing angiogenic therapies.

Here, a critical hindlimb ischemia experimental model is presented followed by a battery of functional, histologic and molecular tests&#160;to assess the effectiveness of angiogenic therapies.&#8203;

Hindekstremite Iskemi bir Murine modelinde terapötik anjiyogenezi değerlendirilmesi

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Akut ve Subakut Fare Arka ayağın İskemi Yöntemleri

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Süresi doldu CO_{2 Ölçüm}

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Sürekli ST segment analizi kullanarak Şüpheli Akut Koroner Sendromlu Hastalarda Geçici Miyokard İskemi Teşhisi İçin Bir Araştırma Yöntemi

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Mouse Dorsal Skinfold Odası'nda İskemik Doku Yaralanması: Bir Cilt Flap Model Akut Kalıcı iskemisi Araştırma

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Akut Akciğer Hasarı Açık Trakeostomi Gastrik Asit Aspirasyon Fare Modeli Maksimal Akut Ölümcül olmayan Akciğer Hasarı Sonuçlar

Intravital mikroskobu ve kontrast-artırılmış Ultrasonografi fare Hindlimb, insülin kaynaklı vazodilatasyon ve kas perfüzyon çalışmaya kombine

Diyabetik tavşanların arka ekstremite Iskemi preklinik modeli

Hindekstremite Iskemi bir Murine modelinde terapötik anjiyogenezi değerlendirilmesi

Akut ve Subakut Fare Arka ayağın İskemi Yöntemleri

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Süresi doldu CO 2 Ölçüm

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Sürekli ST segment analizi kullanarak Şüpheli Akut Koroner Sendromlu Hastalarda Geçici Miyokard İskemi Teşhisi İçin Bir Araştırma Yöntemi

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Mouse Dorsal Skinfold Odası'nda İskemik Doku Yaralanması: Bir Cilt Flap Model Akut Kalıcı iskemisi Araştırma

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

Akut Akciğer Hasarı Açık Trakeostomi Gastrik Asit Aspirasyon Fare Modeli Maksimal Akut Ölümcül olmayan Akciğer Hasarı Sonuçlar

Intravital mikroskobu ve kontrast-artırılmış Ultrasonografi fare Hindlimb, insülin kaynaklı vazodilatasyon ve kas perfüzyon çalışmaya kombine

Diyabetik tavşanların arka ekstremite Iskemi preklinik modeli

Hindekstremite Iskemi bir Murine modelinde terapötik anjiyogenezi değerlendirilmesi

Süresi doldu CO_{2 Ölçüm}