Yazarlar lisans Daniel Korus onun yardım Matlab kodu çalıştırmak için ve lisans Alex Boettcher davranışsal deney çalışan onun yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu proje NSF IOS 1256799 R.L.M. için ve ulusal sağlık Enstitüleri Ödülü numarası T32DA007234 altında ilaç kötüye Ulusal Enstitüsü tarafından desteklenmektedir.

burada açıklanan tüm yordamlar kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) Minnesota Üniversitesi tarafından onaylanmıştır ve uygun bakım ve kullanım laboratuvar hayvanları Guide olarak vardır 13 .
 1. hayvanlar ve Cannulation cerrahi <ol><li>elde edilir Suriye hamster yaş yaklaşık 55 gün bir ortak hayvan tedarikçiden. 
	Not: hayvan yaş nedeniyle çeşitli deneysel paradigmaların kısıtlamalarını değişir, cinsel davranış için tüm yaklaşık aynı yaşta cinsel olgun hayvanlar elde etmek önemli olsa.</li>
	<li>Ev hayvanlarda kontrollü bir sıcaklık (22 ° C) ve (14 10 h ışıklar, 13:00 h ile karanlık ardından h ışık) aydınlatma çevre, gıda ve su kullanılabilir ad libitum dönemlerde deneysel test ile. 
	Not: hamster sezona göre yeniden beri bu 1410: açık/koyu döngüsü taklit eden kendi doğal üreme koşulları.</li>
	<li>Laboratuvar 1 haftalık calıştıkları aseptik ikili ovariectomies ve kafa içi stereotaksik cannulations (örneğin, Fentobarbital) genel anestezi altında yapmak ve yönetmek uygun kurumsal olarak onaylı Post-Operatif analjezik ve antibiyotik tedavisi daha önce açıklandığı gibi 14 , 15. 
	Not: cinsel davranış çalışma için ovariectomies hayvanlar düzgün eksojen hormon uygun olarak deneysel zaman çizelgesi ile cinsel algılama için indüklenen cinsel hormonları önemli endojen kaynağı kaldırmak gereklidir.
	<ol><li>Dopaminerjik ve glutamatergic sonda implantasyonu, Stereotaxic Kılavuzu Kanüller (0.7 mm çap; implant şekil 3) ilgi alanı içine (örneğin, bu laboratuvar doğru nucleus accumbens (NAc) hedef) 15 başka bir yerde kademeli ayrıntılı olarak açıklandığı gibi. 
		Not: bir Glutamat veya dopamin sondası hayvan başına tek sensör kayıtları üzerinden sunulan veriler olmasına rağmen tek bir hayvan 4 sensörler aynı anda kayıt için bu sistemi sağlar; Böylece, 1-4 Kanüller istenen deneysel tasarım ve sonuçları bağlı olarak implante.
		<ol><li>Bölge stereotaksik atlas kullanarak ilgi implant koordinatlarını belirleyin (örneğin, Altın Hamster Brain Morin tarafından &#38; ahşap), sensör 1 mm kanül altında beyin dokusu içine uzanır akılda tutulması.</li>
		</ol></li> <li>Sonra bir kanül Stereotaxic istediğiniz ventral dorsal yere indirdi, bir kap diş akrilik, paslanmaz çelik kemiği vida ve plastik bir kafa ile güvenli inşa kullanarak kafatası yapıştırmayın mount ( şekil 3 ; 15 daha fazla bilgi için bkz:).</li>
		<li>Karbon fiber test etmek için bir referans elektrot (350 mikron çapında, 7.5 mm toplam uzunluk) kontralateral Yarımküre takın. 
		Not: Bir belirli konum veya kanül mesafeden gerekli değildir; referans elektrotlar yer yerleştirilebilir herhangi bir yerde uygun kontralateral Yarımküre.</li>
	</ol></li></ol> 2. Biyoalgılayıcı ve karbon Fiber test <ol><li>1 haftalık Cerrahi Kurtarma, cinsel algılama ikna etmek için hormon astar rejimi yönetmek.
	<ol><li>Estradiol benzoat ayçiçek yağı 0.1 ml 10 µg subkutan enjekte (SC), yaklaşık 48 saat ve cinsel davranış, cinsel algılama erkek 11 doğru ikna etmek için test önce 24 saat.</li>
		<li>Enjekte 500 µg, progesteron ayçiçek yağı, SC, erkek cinsel algılama 11 ikna etmek için giriş önce 4 h 0.1 ml.</li>
	</ol></li> <li>Beyaz ve kırmızı ışığı koşulları 16 , 17 test altında değişiklik tabi kemirgenler sosyal davranışlarını olduğu gibi onların günlük döngüsü, karanlık aşamasının başında bütün hayvanlar test , 18.</li> <li>enzimatik Biyoalgılayıcı Glutamat sınama, sensörler vitro ( şekil 4) 15 , daha önce açıklandığı gibi kullanımdan önce kalibre 19. <ol><li>yapmak kalibrasyon çözüm 20 mL cam test gününde taze tüpler santrifüj kapasitesi. Analit çözüm için 7.4 mg L-glutamik asit yavaşça tüp ters çevirme tarafından ultra-saf H 2 O 10 mL geçiyoruz. İnterferent çözüm 176.1 mg AA 10 ml ultra-saf H 2 O. çözülerek olun</li>
		<li>Kurmak için bir temel laboratuar yüzük stand temel alınarak bir manyetik karıştırıcı yerleştirerek kalibrasyon. 20 mL ceketli kabı manyetik karıştırıcı üstüne yerleştirin ve bir orta 2 prong kelepçe kullanarak yerde kelepçe.
		<ol><li>Ekle manyetik heyecan bar ve 100 mM fosfat 20 mL serum fizyolojik (PBS) ceketli kabı arabelleğe alınmış. Arabellek çözüm 37 ısıtmak için dolaşan bir su banyosu ceketli kabı bağlanmak ° C. 
			Not: enzimatik aktivite sıcaklığı ile etkilenir bu yana enzimatik Biyoalgılayıcı kalibrasyonlar vücut sıcaklığında gerçekleştirilmelidir.</li>
		</ol></li> <li>Yer sensör kalibrasyonu tutucu üzerine ceketli kabı ve bir dik açılı mengene kullanarak yerde güvenliğini sağlama üstte 4 kanallı kalibrasyon Pre amplifikatör ayarla. Pre amplifikatör veri klima ve satın alma aygıtı kayıt kalibrasyon verilerine bağlanın.</li>
		<li>Her enzimatik Biyoalgılayıcı Glutamat (veya diğer analitler için diğer ticari olarak mevcut Biyoalgılayıcı sondalar örneğin, glikoz ilgi) duyarlılığını test önce deneysel kayıt kalibrasyon tutucusuna sonda yerleştirerek bir ceketli kabı, algılama kavite ve gümüş klorür (AgCl) başvuru tel tampon çözelti içinde bir kısmı batış.
		<ol><li>Bir bağlantı noktasına bir 4 kanallı kalibrasyon Pre amplifikatör test edilen her sensör (en fazla 4) bağlanmadan önce ücretsiz indirilebilir satın yazılım kullanan bilgisayar arayüzü yeni bir kayıt başlatmak. Alıcıları çok istikrarlı bir temel ulaşmak izin.</li>
		</ol></li> <li>Sensörler istikrarlı bir temel ulaştığında analit enjeksiyonları eklemeye başlamak. Delik kalibrasyon tutucu pipet ucu arabellek çözüm tanıtmak için kullanın. Bir enjeksiyon yapıldığında açıklama eklemek için kayıt yazılımı hızlı anahtar ek açıklama aracını kullanın.
		<ol><li>Olun 10 µM eklemeler Glutamat pipetting 40 μL analit çözüm arabellek çözüm içine. Eklemeler stabilize etmek sensör için bekleyin. İnterferent AA çözümden (50 μL enjeksiyon hacmi 250 Mikron değişim konsantrasyon için) tek bir enjeksiyon eklemeden önce analit çözüm 3 enjeksiyonlari ekleyin. 
			Not: Kalibrasyon (Adım 2.12 enzimatik deneysel kayıt sırasında görülen) amperometric sinyal değişiklikleri dönüşüm Glutamat konsantrasyonu, değişikliklere istenirse sağlar. Başvuru 15 kademeli yönerge için bkz:. Bu laboratuvar tarafından kullanılan dopaminerjik probları üretim sürecinde ticari sağlayıcı tarafından kalibre. 19 enzimatik bileşenleri aşağılamak gibi zaman içinde onların hassasiyeti düşürebilir gibi Glutamat probları kullanım zaman ayarlanması gerekir. Karbon fiber elektrotlar bozulması tabi olmayan, şirketin Sevkiyat öncesinde gerçekleştirdiği kalibrasyon t yeterli boyunca çünküİşte ek işleme aracılığıyla ince karbon fiber (350 mikron çapında) zarar bir artış olasılığı.</li>
		</ol></li></ol></li> <li>Test odası ile yatak hayvandan alınan satır &#39; s ev kafes. 
	Not: Bu dişi artırır &#39; test ile s aşinalık odası, yanı sıra cinsel uyarıcı estradiol tedaviye yanıt kadın tarafından dağıtıldı koku çiftleşme ipuçları erkek ortaya koyar.</li>
	<li>Hafifçe isoflurane ya da başka bir uçucu anestezi indüksiyon odasında hayvanlar sonda ekleme öncesinde anestezi.</li>
	<li>Tıkayıcı obdurator Kılavuzu kanül çıkarıp karbon fiber elektrot veya rehber şaft aracılığıyla enzimatik sonda takın.</li>
	<li>Sonda eklemeden sonra hayvan test odasında yerleştirin. 
	Not: Bu laboratuvar 10-gal cam akvaryum (24,5 x 48.9 x 29.4 cm) kullanır, ancak eşit alan yuvarlak odaları-da var istihdam.</li>
	<li>Video ve zaman kilitli amperometric sinyal kayıt bir ticari yazılım programı, Begin açıklanan ayrıntılı olarak başka bir yerde 15.</li>
	<li>Bağlanmak duyumsal için kayıt sistemi: elektrikle korumalı bir kablo ve bir elektrik döner üzerinden potansiyostat. Sensör bağlantı bir PIN eki baş bağlama üzerine vidalama ile sabitleyin. Gerekirse laboratuvar film kullanarak bağlantı güçlendirmek. 
	Not: Özelleştirilmiş bir bağlayıcı enzimatik Glutamat sensörleri doğrudan potansiyostat için bağlı olma varken potansiyostat için karbon fiber elektrot ve referans elektrot eklemek gereklidir.</li>
	<li>İzin deneysel test etmeden önce beyinde equilibrate sensörü. 
	Not: Denge saatleri kayıt sensör bağlı olarak farklılık gösterir (örneğin, enzimatik sensörler gerektirir 2-4 h denge, karbon-fiber elektrotlar sadece yaklaşık 30 dk gerektiren süre). Her iki tip sensörler implante edilir, enzimatik sensör uzun equilibrate.</li>
	<li>Sensör denge sonra bir uyarıcı erkek test odasına tanıtmak.</li>
	<li>Uyarıcı erkek tarafından penis ekleme (adlandırılan sıra) ile ilk mount, kayıt için ek bir 10-30 dakika bağlı olarak deneysel gol devam.</li>
	<li>Davranış test, takip kesin dişi &#39; s sensörü.</li>
	<li>Her iki hamster test odasından kaldırın. Yatak çıkarmak ve % 70 etanol kullanarak odası temiz. 
	Not: karbon fiber kayıtları için gerekli kısa denge nedeniyle adımları 2.3-2,14 aynı gün içinde birden fazla hayvan test etmek için tekrar edilebilir. Enzimatik sensörler yaklaşık 4 h denge gerektirdiğinden, hayvanların farklılıkları nedeniyle mümkün arası konu varyasyon sınırlamak için günlük sadece bir hayvan buna ek olarak, test &#39; test sırasında sirkadiyen saat.</li>
</ol> 3. Fedakarlık ve perfüzyon <ol><li>test sürelerin takip derin anestezi kadın denek bir euthanizing maddesi ile (örneğin, laboratuar kullanır 0.2 mL fenitoin ve Fentobarbital çözüm mayi bir enjeksiyon) .</li>
	<li>Transcardially sıvı 25 mM %4 paraformaldehyde-PBS kullanarak 20 dk saplantı tarafından takip tüm dolaşımdaki kan kaldırmak için PBS pH 7,6, hayvanla.</li>
	<li>Beyin kaldırmak ve içinde postfix ~ 30 mL 50 mL konik tüp gecede %4 paraformaldehyde çözeltisi.
	<ol><li>Mağaza % 10 beyinde Sükroz PBS çözüm hazır seri bölümüne kadar. 
		Not: Beyin kirletici potansiyel büyüme önlemek için haftalık Sükroz çözüm değişiklikleri ile 2 hafta için depolanmış olabilir.</li>
	</ol></li> <li>Seri Bölüm 40 µm beyinde dilim ile ikisinden biri implant bölgesi boyunca buz gibi bir microtome ya da cryostat daha önce açıklandığı gibi 19.</li>
	<li>Dilimleri seri olarak piyasada bulunan Yapışkan kaplı slaytlarda mount (veya yapmak için 20 bakın). En az bir gecede kurumaya izin.</li>
	<li>Kresil Mor boya, açık, slaytlarla leke ve coverslip daha önce açıklandığı gibi 20.</li>
	<li>Görüntü sensörünün anatomik yerleşim onaylamak için parlak alan mikroskobu kullanarak slaytları.</li>
</ol> 4. Davranışsal kodlama <ol><li>görünümü ve videoları ücretsiz ticari olarak indirilebilir yazılım kullanarak açıklama (Tablo malzemeleri görmek) tam kod davranışları amperometric sinyal zaman kilitli yavaş çekimde. 
	Not: MATLAB kodu kullanabilmek için (bkz: ), başlangıcı ve sonu her kadın açıklama &#39; s ve erkek &#39; s davranışlar.
	<ol><li>Açıklama Ekle startLordosis kadın onu geri dorsoflexion başlatır ve kuyruğunu yukarıya doğru kusurları çerçeve içinde. Dişi dişi test odasında başka bir konuma readjusts bağlandığınızda sık sık oluşur bu duruş, sonlandırıldığında endLordosis açıklama.</li>
		<li>Açıklama startAI dişi lordoz duruş ve erkek onun burun dişi doğru hamle olduğunda &#39; s anogenital bölge, nerede koklama, yalama veya onun perineal bölgesini koklaşmaya oluşabilir. Ne zaman erkek dişi yakın bir mesafede onun burun kaldırır endAI açıklama &#39; s anogenital bölge.</li>
		<li>Erkek yaklaşımlar ve Bağlama girişimi (örneğin, yan, kıç) yönünü ne olursa olsun bir montaj duruş kadın onun forepaws koyar startMount açıklama.</li>
		<li>Açıklama startIntromission ne zaman başarılı agresif bağlı erkek penis dişi erişir &#39; s vajina. 
		Not: Bir sıra bağlı olarak erkek gözle görülür onun üst bacaklarda bedeni doğru çeker onun pelvis ileri bindirmeler ve kuyruğunu yukarıya doğru penetrasyon gösteren bukleler sıra önce oluşan agresif üzerinden davranışsal ayırt (bkz < güçlü sınıfı "xfig" = > şekil 4 C).
		<ol><li>Uygun olduğunda ek açıklama boşalma. 
			Not: bir çiftleşme butik ve başarılı bir sıra ile birlikte sonunda, erkek boşalmak olacaktır. Bir gerçek emisyon görselleştirmek mümkün olsa da, ortaya çıkışı, boşalma ayak hareketi açıklama onların arka ayak hareketlerle bir sıra 21 sırasında böylece ayakla basma karakteristik bir erkek hamster var.</li>
		</ol></li> <li>Açıklama endIntromission ve endMount aynı anda çerçeve içinde erkek onun açık iki pençesi kaldırdığı ve böylece dişi ile hiçbir temas vardır. Görselleştirmek için sık yetersizlik nedeniyle kararla, eşzamanlı kod nöbetleri çiftleşme arasında tutarlılık ve güvenilirlik için izin vermek için bu iki davranışlar. 
		Not: Bir çiftleşme butik ya başarılı bir boşalma izler ya da dişi en az bir bağlama takip lordoz duruş kırıldığında.</li>
	</ol></li></ol> 5. Örnek veri analizi Not: sabit potansiyel karbon fiber ve enzimatik kayıtları kullanımı için dopamin birND Glutamat, sırasıyla, tonik ve elektrokimyasal yayın phasic kalıpları ölçmek için yeteneği sağlar. Bu laboratuar ücretsiz, ticari kazanç sistemi kullanır ve yazılım dönüştürmek ve kaydetmek için analog sinyalleri dijital kaydedilen (0,600 V, örnekleme hızı önyargı 1 Hz =).
<ol><li>Örnek veri çözümleme protokolü açıklaması <ol><li>diğer programları kullanılabilse ölçmek tonik ve MATLAB kullanarak kaydedilmiş elektrokimyasal sinyal phasic (geçici) değişiklikleri.
		<ol><li>İçin sunulan veri, 50 puanlık hareketli ortalama filtre kullanarak tonik sinyali hesaplamak. Sinyal bir salt geçici normalleştirilmiş temsil ham veri tonik sinyali çıkarılarak hesaplanır. Phasic doruklarına tanımlarken, çeşitli algoritmik seçenek vardır (1'den daha fazla sinyal değişiklikleri olarak tepeler etiketleme örneğin, ortalama yukarıda SD).</li>
			<li>Bu tepeler, Yani, yerel maxima konumlarını tanımlamak, normalleştirilmiş sinyalini en az pik genlik ile MATLAB işlevi peakfinder kullanarak kök ortalama kare sinyal için ayarlayın. Normalleştirilmiş sinyalini tespit doruklarına konumunu her ayında en yüksek genlik ayıklamak için kullanıldı. Olabilir ile rastlayan, ya da göreli tepe nörokimyasal soruşturma altında sürüş herhangi bir zaman kilitli davranışların tanımlanması için zirveleri algılama yeteneğini sağlar.</li>
		</ol></li> <li>Kesimi (bkz. Adım 3) davranış ek açıklamalar doğrultusunda işlenen verileri; bir öğrenci &#39; s t-testi tonik nörotransmitter düzeyinde, geçişler oluşumunu ve genlik farklılıkları değerlendirmek için kullanılan geçişler sırasında nöbetleri çiftleşme sırasında önceden çiftleşme ne dersin lordoz lordoz karşı. Tonik desenleri elektrokimyasal sürüm değişiklikleri ölçmek için lordoz konumu (örneğin, önceden çiftleşme ne dersin lordoz) çiftleşme bir müddet önce doğrudan sırasında meydana gelen veri noktaları veri noktaları için bir çiftleşme bout sırasında karşılaştırıldı bir t-test kullanarak oturumu</li>
	</ol></li> <li>Açıklanan veri çözümleme protokolü için ham veri hazırlanması Not: diğer programlar veya analizler aynı derecede uygun seçenekler olsa da belirtildiği gibi yukarıda açıklanan MATLAB kodu kullanmak için ham veri olarak hazırlanmalıdır Şu şekilde: <ol><li>ek açıklama ve gerilim dosyalarını verme. Altında bunun için &#39; dosya &#39; sekme, seçme &#39; ihracat &#39; işlev ve seçin &#39; ek açıklamaları &#39; ek açıklamaları kaydetmek için sekme. Altında &#39; dosya &#39; sekme, seçme &#39; ihracat &#39; işlev ve seçin &#34; TSV &#39; voltaj ölçümleri TSV uzantısı dosya olarak kaydetmek için sekme.</li>
		<li>Her dosyayı bir elektronik tablo programı ile açın ve Farklı Kaydet'i &#39; xls/xlsx &#39; dosyaları MATLAB ile uyumlu hale getirmek için. 
		Not: İçin &#39; ek açıklama &#39; dosyası, ek el ile ek açıklamaları başlangıcı ve sonu her iki önceden çiftleşme ne dersin lordoz (PreMBlordorsis açıklamalı, dikte etmek için bir elektronik tablo programında sonrası ihracat eklendi ) ve çiftleşme ne dersin bu zaman Puan doğrudan belirtildiği gibi karşılaştırılabilir içinde gaza 5.1.2.</li>
		<li>Açıklama önceden çiftleşme ne dersin lordoz (startPreMBlordosis) başlangıcı aynı anda lordoz davranış (startLordosis) aynı zamanda başlar gibi bir bağlama davranışı içerir ve aynı zamanda yeni bir başlangıcında çiftleşme ne dersin Eğer dişi lordoz duruş kalır.</li>
		<li>İlk monte başladığında önceden çiftleşme ne dersin lordoz (endPreMBlordosis) sonunda açıklama.</li>
		<li>Bu çiftleşme bir müddet başlangıcı anlamına gelir gibi çiftleşme dersin (startMB) başlangıcı endPreMBlordosis, aynı zamanda ek açıklama.</li>
		<li>Bir çiftleşme ne dersin (endMB) iki ucundaki bir boşalma içeren bir bağlama sonu açıklama (bkz. Adım 4.1.4.1), ya da dişi takiben &#39; s sona ermesi lordoz duruş (endLordosis).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overview+of+brain+microdialysis.">Overview of brain microdialysis.</a> Curr Protoc Neurosci. , (2009).</li><li>Chaurasia, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AAPS-FDA+Workshop+white+paper:+Microdialysis+principles,+application+and+regulatory+perspectives.">AAPS-FDA Workshop white paper: Microdialysis principles, application and regulatory perspectives.</a> Pharm Res. 24 (5), 1014-1025 (2007).</li><li>Lindsay, S., Kealey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> High performance liquid chromatography. , (1987).</li><li>Robinson, D. L., Venton, B. J., Heien, M. L., Wightman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detecting+subsecond+dopamine+release+with+fast-scan+cyclic+voltammetry+in+vivo.">Detecting subsecond dopamine release with fast-scan cyclic voltammetry in vivo.</a> Clin Chem. 49 (10), 1763-1773 (2003).</li><li>Hu, Y., Mitchell, K. M., Albahadily, F. N., Michaelis, E. K., Wilson, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+measurement+of+glutamate+release+in+the+brain+using+a+dual+enzyme-based+electrochemical+sensor.">Direct measurement of glutamate release in the brain using a dual enzyme-based electrochemical sensor.</a> Brain Res. 659 (1-2), 117-125 (1994).</li><li>Agnesi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wireless+instantaneous+neurotransmitter+concentration+system-based+amperometric+detection+of+dopamine,+adenosine,+and+glutamate+for+intraoperative+neurochemical+monitoring.">Wireless instantaneous neurotransmitter concentration system-based amperometric detection of dopamine, adenosine, and glutamate for intraoperative neurochemical monitoring.</a> J Neurosurg. 111 (4), 701-711 (2009).</li><li>Erksine, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solicitation+behavior+in+the+estrous+female+rat:+A+review.">Solicitation behavior in the estrous female rat: A review.</a> Horm Beh. 23 (4), 473-502 (1989).</li><li>Weiner, I., Gal, G., Rawlins, J. N., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+involvement+of+the+shell+and+core+subterritories+of+the+nucleus+accumbens+in+latent+inhibition+and+amphetamine-induced+activity.">Differential involvement of the shell and core subterritories of the nucleus accumbens in latent inhibition and amphetamine-induced activity.</a> Behav Brain Res. 81 (1-2), 123-133 (1996).</li><li>Heidbreder, C., Feldon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine-induced+neurochemical+and+locomotor+responses+are+expressed+differentially+across+the+anteroposterior+axis+of+the+core+and+shell+subterritories+of+the+nucleus+accumbens.">Amphetamine-induced neurochemical and locomotor responses are expressed differentially across the anteroposterior axis of the core and shell subterritories of the nucleus accumbens.</a> Synapse. 29 (4), 310-322 (1998).</li><li>Pierce, R. C., Kalivas, P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amphetamine+produces+sensitized+increases+in+locomotion+and+extracellular+dopamine+preferentially+in+the+nucleus+accumbens+shell+of+rats+administered+repeated+cocaine.">Amphetamine produces sensitized increases in locomotion and extracellular dopamine preferentially in the nucleus accumbens shell of rats administered repeated cocaine.</a> J Pharmacol Exp Ther. 275 (2), 1019-1029 (1995).</li><li>Pfaff, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Drive: Molecular and physiological analyses of a simple reproductive behavior. , (1999).</li><li>Carter, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postcopulatory+sexual+receptivity+in+the+female+hamster:+The+role+of+the+ovary+and+the+adrenal.">Postcopulatory sexual receptivity in the female hamster: The role of the ovary and the adrenal.</a> Horm Behav. 3 (3), 261-265 (1972).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the care and use of laboratory animals, 8th ed. , (2011).</li><li>Meisel, R. L., Camp, D. M., Robinson, T. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microdialysis+study+of+ventral+striatal+dopamine+during+sexual+behavior+in+female+Syrian+hamsters.">A microdialysis study of ventral striatal dopamine during sexual behavior in female Syrian hamsters.</a> Beh Brain Res. 55 (2), 151-157 (1993).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 4 Channel EEG/EMG/Biosensor Manual V005. , (2012).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Play-fighting+differs+from+serious+play+fighting+in+both+target+of+attack+and+tactics+of+fighting+in+the+laboratory+rats+Rattus+norvegicus.">Play-fighting differs from serious play fighting in both target of attack and tactics of fighting in the laboratory rats Rattus norvegicus.</a> Aggress Behav. 13 (3), 227-242 (1987).</li><li>Pellis, S. M., Pellis, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+rates+of+attack,+defense+and+counterattack+during+the+developmental+decrease+in+play+fighting+by+male+and+female+rats.">Differential rates of attack, defense and counterattack during the developmental decrease in play fighting by male and female rats.</a> Dev Psychobiol. 23 (3), 215-231 (1990).</li><li>Pellis, S. M., Hastings, E., Shimizu, T., Kamitakahara, H., Komorowska, J., Forgie, M. L., Kolb, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+orbital+frontal+cortex+damage+on+the+modulation+of+defensive+responses+by+rats+in+playful+and+non-playful+social+contexts.">The effects of orbital frontal cortex damage on the modulation of defensive responses by rats in playful and non-playful social contexts.</a> Behav Neurosci. 120 (1), 72-84 (2006).</li><li>Wakabayashi, K. T., Kiyatkin, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+changes+in+extracellular+glutamate+induced+by+natural+arousing+stimuli+and+intravenous+cocaine+in+the+nucleus+accumbens+shell+and+core.">Rapid changes in extracellular glutamate induced by natural arousing stimuli and intravenous cocaine in the nucleus accumbens shell and core.</a> J Neurophysiol. 108 (1), 285-299 (2012).</li><li>Kapelsohn, K. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+methods+for+cutting,+mounting,+and+staining+tissue+for+neural+histology.">Improved methods for cutting, mounting, and staining tissue for neural histology.</a> Protoc Exch. , (2015).</li><li>Siegel, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7:+Male+sexual+behavior.">Chapter 7: Male sexual behavior.</a> The Hamster: Reproduction and Behavior. , (1985).</li><li>Day, J. J., Carelli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nucleus+accumbens+and+pavlovian+reward+learning.">The nucleus accumbens and pavlovian reward learning.</a> Neuroscientist. 13 (2), 148-159 (2007).</li><li>Meisel, R. L., Mullins, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sexual+experience+in+female+rodents:+Cellular+mechanisms+and+functional+consequences.">Sexual experience in female rodents: Cellular mechanisms and functional consequences.</a> Brain Res. 1126 (1), 56-65 (2006).</li><li>Meredith, G. E., Pennartz, C. M., Groenewegen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cellular+framework+for+chemical+signaling+in+the+nucleus+accumbens.">The cellular framework for chemical signaling in the nucleus accumbens.</a> Prog Brain Res. 99, 3-24 (1993).</li><li>Hedges, V. L., Staffend, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+mechanisms+of+reproduction+in+females+as+a+predisposing+factor+for+drug+addiction.">Neural mechanisms of reproduction in females as a predisposing factor for drug addiction.</a> Front Neuroendocrinol. 31 (2), 217-231 (2010).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Nispeten basit olsa da, bazı sorunlar bu tekniği istihdam ortaya çıkabilir. İlk olarak, sondalar stereotaksik yerleşimini kesin olmalıdır: sonda çevreleyen ekstraselüler ortamın daha geniş bir yarıçap örnekleri microdialysis bu teknik yalnızca doğrudan temas gelir bir nörotransmitter ölçüm verir sonda ile. İkinci olarak, kablo, küçük genişliği nedeniyle karbon fiber kayıt durumunda kırılması meydana gelebilir ve sonda kasıtlı bakımı ile eklenmesi gerekir. Sonda garantili-süre içinde 3...

Nörotransmitter yayın davranıyor uyanık hayvanlarda ölçmek için yeteneği belirli davranışlar mekanizmaları ve her ikisi de temel devresi araştırmak için güçlü aracı neurotransmission bir kayma ve temporal desenleri ile bağlamak araştırmacılar doğal izin verir ve gerçek zamanlı olarak operant davranışları. Tarihsel olarak, microdialysis beyin1ekstraselüler ortamında hem elektrikle reaktif ve tepkisiz maddeler ölçmek için istihdam edilmiştir. Bu teknik ekstraselüler sıvı, benzer iyonik kompozisyon sulu bir çözüm, sürekli bir akış küçük bir şaft bir semipermeable hollow fiber membran2/ yapılan bir ucu ile oluşan bir microdialysis sonda aracılığıyla kullanır. Sonda eklemeden sonra nörotransmitter veya diğer analitler ilgi semipermeable membran daha sonraki analiz için aralıklarla yüksek performanslı sıvı Kromatografi (HPLC), tarafından toplanmakta önce pasif Difüzyon tarafından çapraz olabilir bir analitik kimya teknik ayırmak için yaygın olarak kullanılan tanımlamak ve heterojen karışım3bileşenlerinde ölçmek.
Microdialysis hemen her analit ilgi ölçmek için kullanılan hassas bir teknik olmasına rağmen zamansal çözünürlük ile dakika dakika1,2onlarca sırasına en yüksek örneklendirme oranı düşüktür. Hızlı tarama çevrimsel voltammetry (FSCV), electroactive türleri, redoks potansiyeli dayanır bir teknik icadı ekstraselüler sıvı ilgi analit anlık konsantrasyonları yakınındaki aydınlatmak. Kısaca (bkz: Robinson vd. 4 için kapsamlı bir inceleme), bir elektrot yükseltmek ve daha düşük bir üçgen dalga moda hızlı zaman ölçeği4gerilim uygulanır. Gerilim daha doğru varsa, bileşik faiz art arda okside azaltılmış ve. Küçük bir alternatif akım oluşturur bir hareket elektronların bu oksitlenmeye ve azaltma sonuçları. Oranları gerçekleşecek oksitlenmeye ve bileşikleri mikrosaniye cinsinden meydana gelen azalma ile alt ikinci ölçekte tarama. Arka plan geçerli elde edilen geçerli yoklama tarafından oluşturulan çıkararak, bir vs geçerli çizim her bileşik için benzersiz bir gerilim oluşturabilir. Gerilim salınımlarını zaman ölçeğini bilinir, bu veri geçerli bir arsa bir fonksiyonu olarak hesaplamak için kullanılabilir. Böylece, bileşik göreli konsantrasyonları aktarılan toplam elektron sayısı her oksidasyon ve Redüksiyon tepki4bilinen olarak belirlenebilir.
Bu kimyasal özgüllük ve yüksek zamansal çözünürlük FSCV kimyasal konsantrasyonu vivo içindedeğişen algılamak için güçlü bir teknik olun. Ancak, bu manifoldu avantajlara rağmen bu teknik kapsamlı teknik uzmanlık ve pahalı ekipman ve kurulum gerektirir. Ayrıca, nonelectroactive nörotransmiterler (örneğin, Glutamat) bu tekniği kullanarak ölçülen olamaz. Neyse ki, elektrokimya5, hem de ticari kullanım bu buluşlar alanında teknolojik gelişmeler electroactive sigara nörotransmitter davranıyor uyanık hayvanlarda ölçmek için nispeten basit bir yaklaşım tanıttı hassas bir enzimatik Biyoalgılayıcı teknoloji olarak bilinen zamansal tekniği ödün vermeden. Bu tekniği kullanan bir uygulanan potansiyel5 tarafından oluşturulan bir amperometric oksidasyon geçerli olarak belirlenen electroactive hidrojen peroksit biri enzimatik nonelectroactive nörotransmitter ilgi içine dönüşüm iki yüzeylerde, . Piyasada bulunan Biyoalgılayıcı sondalar (bkz. şekil 1) seçerek analitler ilgi rekabetçi endojen interferents katkısını azaltarak ölçmek. Glutamat durumunda, ortak interferent askorbik asit (AA) katkısını rekabetçi ölçülen geçerli AA oksidaz AA sigara electroactive için dönüştürme sensörün aktif enzimatik yüzeyine co yerelleştirme tarafından azalır dihydroascorbate ve su. Buna ek olarak, bir olumsuz ücret Nafion polimer tabaka enzim tabakasının altında mevcut endojen iyonik bileşikler içermez.
Bu aynı Biyoalgılayıcı deneysel kurulum-ebilmek ölçü electroactive nörotransmiterler olduğu gibi FSCV ama bunun yerine bir sabit-potansiyel kayıt6kullanır. FSCV içinde uygulanan salınım voltaj aksine, bir sabit-potansiyel kayıt gerilim Redoks faiz analit için potansiyel tutulur. Birden çok nörotransmitter ezici bir çoğunlukla doğru bir nörotransmitter çarpık beyin alanlarda aynı Redoks potansiyeli olabilir gibi FSCV daha az kimyasal olarak seçime bağlı olsa da, bu yaklaşımın komple doğa kimyasal eksikliği daha ağır basar özgüllüğü.
Electroactive ve nonelectroactive nörotransmitter sürümde yakın gerçek zamanlı ölçmek ve belirli davranış olaylara bağlamak için yakınsak nörotransmitter yayın incelemek için bir fırsat sağlar. Bu el yazması yanıt uyanık davranan hamster doğal ödül olarak dopamin ve Glutamat neurotransmission sorguya çekmek için bu sistemi ayrıntıları. Bu kağıt bu nörotransmitter yayın sırasında diğer davranışları ve deneysel paradigmalar incelenmesi için onun fizibilite gösteren amacı ile kadın hamster cinsel davranışlara Ölçme işleminin detay amaçtır.
Elektrokimyasal kayıtları kullanmak için ideal bir model hamster are Tarihsel olarak, sıçan ve fareler modelleri cinsel davranış çalışmada istihdam edilmiştir. Bu kemirgen türler atlamalı, darting ve kulak kovalamak ve sonuçta mount kadın7erkek ikna için kıpır kıpır dahil çok sayıda kadın talep davranışları içeren bir dinamik çiftleşme sırayla meşgul. Erkek (veya vajinal penetrasyon olmadan) tarafından montaj sırasında etkin talep davranışları sürdürme önce sadece birkaç saniye için ( lordozdenir) onun cinsel davranış duruş da dişi yürütmektedir yalnızca birkaç saniye sürer. Bu davranış, hareketsizlik, kısa süreler ile serpiştirilmiş etkinliği yüksek düzeyde oluşan hayvanlar davranışlar içinde neurotransmission ölçmek için sorunlu kalıptır. İlk olarak, sinirsel aktivite ile ilgili olmayan amperometric kayıtları hareketi eserler olabilir. İkinci olarak, hareket bazı beyin bölgelerinde belirli nörotransmitter sürümü ile ilişkilidir. Örneğin, dopamin yayın dorsal ve ventral striatum8,9, psikostimülan takiben dopamin microdialysis ölçümleri için temel bir bulgu Lokomotor aktivite birleştiğinde Yönetim10. Çünkü erkek tipik talep davranış ecek içindet kemirgenler Lokomotor aktivite düzeyi yüksek içerir ve bir 10 dakika cinsel davranış testi toplu tarafından temsil edilir, bu zor neurotransmission değişimler topluca sadece son açık bileşenleri cinsel davranış için atfetmek yapar dakika.
Nörokimyasal profil sahibi kadın cinsel davranışı çözümlemek için bu laboratuvar cinsel davranış eşlik eden en az Lokomotor aktivite olduğu bir tür aradı. Suriye hamster (Mesocricetus hava) çiftleşme sırayla talep davranışları genellikle görülen sıçanlar ve fareler11eksikliği nedeniyle nörokimyasal kayıtları için idealdir. Sonuç olarak, kadın hamster girmek ve korumak için lordoz duruş 10 dakikalık oturum12test 9 dakika yukarı. Lokomotor hareketlerle yabancı kadın, in vivo eksikliği ile erkek ile cinsel etkileşimlerin bileşenlerle ilişkili olabilir elektrokimyasal kayıtları elde edilebilir.
Çiftleşme nöbetleri hamster içinde Test odasına erkek uyarıcı hayvan giriş sonra erkek başlangıçta onun (Şekil 2A) montaj önce anogenital soruşturma (AI) kadın meşgul olacak. Sırayla bağlamaya erkek, dişi bir alıcı cinsel duruş içinde onu geri kemerler ve montaj erkek penis vajinaya erişebilirsiniz böylece kuyruğunu saptırır lordoz, olarak bilinen varsaymalıyız. Erkek her iki paws (Şekil 2B), ile onun hindquarters clasping erkek, dağ ve penil sıra (Şekil 2C) elde etmek için bir girişim sokmak başlar. Erkek erkek (olmadan ekleme) mount yanı sıra sonunda boşalma ulaşmak daha önce birkaç kez intromit. Bu bağlar ve boşalma için önde gelen intromissions dizisi "çiftleşme ne dersin" olarak adlandırılır. Erkek-ecek-si olmak birkaç çiftleşme nöbetleri içinde tek bir oturum.

<table><tbody><tr><td>Nembutal</td><td>Oak Pharmaceuticals Inc.</td><td>76478-501-50</td><td>Pentobarbital sodium injection, USP. This lab uses 8.5 mg/100 g body weight, injected intraperotineally.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Loxicom analgesic&amp;nbsp;</td><td>Norbrook Laboratories&amp;nbsp;</td><td>6451603670</td><td>NSAID antinflammatory and analgesic used for post-operative pain control. Generic: meloxicam.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Enroflox antibiotic&amp;nbsp;</td><td>Norbrook Laboratories&amp;nbsp;</td><td>5552915411</td><td>Fluoroquinolone antibiotic for post-operative infection prevention. Generic: Enrofloxacin.</td></tr><tr><td>Beuthanasia-D&amp;nbsp;</td><td>Merck Animal Health</td><td>00061047305</td><td>Pentobarbital Sodium, Phenytoin Sodium euthanasia agent.</td></tr><tr><td>Bone screws</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>8111-16</td><td>1/8&quot; bone screw (Pkg. of 16) used to affix skull cap to skull.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Dental acrylic (Bosworth Duz-All)</td><td>Bosworth&amp;nbsp;</td><td>166261C&amp;nbsp;</td><td>Self curing dental acrylic is used in construction of a skull cap to affix cannula and head mount to skull.</td></tr><tr><td>Hardware biosensor setup&amp;nbsp;</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>8400-K2</td><td>Pinnacle offers complete hardware kits for new users of our tethered biosensor system for rats. Kits include a commutator, preamplifier, and data conditioning and acquisition system</td></tr><tr><td>Base video computer package</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>9000-K1</td><td>The base computer package includes a preconfigured computer with ample hard disk storage, a high-definition monitor, a keyboard and mouse, an uninterruptible power supply, and all necessary cables.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Video EQ700 EverFocus camera&amp;nbsp; package</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>&amp;nbsp;9000-K10&amp;nbsp;</td><td>EQ700 night vision capable box camera with independent IR source was obtained as part of Pinnacle video computer package. Dome camera (9000-K9) and HD camera (9000-K11) options are also available.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Sirenia Acquisition software</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>Free--available to download from pinnaclet.com</td><td>Sirenia&amp;nbsp;Acquisition provides a single platform for recording data from any Pinnacle hardware system. The software features synchronization of all data streams, user-configurable settings, data consolidation, and multiple export options. In addition, the software includes basic review and analysis modules for biosensor recordings. Sirenia&amp;nbsp;delivers free ll-in-one software that is ideal for data acquisition and review.</td></tr><tr><td>Tethered rat&amp;nbsp;in vitro&amp;nbsp;calibration kit</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>7000-K2-T-BAS&amp;nbsp;</td><td>In order to relate the current changes measured by a biosensor to actual changes in analyte concentration, it is necessary to calibrate the biosensor prior to implantation into the animal. The process also confirms the integrity and selectivity of the sensors.&amp;nbsp;Calibration kit includes 20 mL jacketed beaker (#7058), 1/2&quot; by 1/8&quot; magnetic stir bar (#7059), right angle clamp (#7056), 2 prong single-adjustment clamp (#7055), 4-channel calibration preamplifer (#7053), and calibration holder (#7051).&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Stir plate&amp;nbsp;</td><td>Corning</td><td>6795-410D</td><td>Corning digital Stirrer, 5&quot; x 7&quot;, 120 VAC used to spin magnetic stirrer in jacketed beaker during &lt;em&gt;in vitro&lt;/em&gt; calibration of glutamate biosensors.</td></tr><tr><td>Water bath capable of closed loop circulation</td><td>PolyScience</td><td>8006A11B</td><td>PolyScience 8006A11B 6L Standard Digital Heated Circulating Bath, 120VAC water bath was used with plastic tubing to heat jacketed beaker to physiological temperature.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Carbon fiber sensor with BASi rat cannulae</td><td>Pinnacle Technology, Inc.</td><td>7002-CFS</td><td>Carbon fiber electrode used for recording dopamine neurotransmission.</td></tr><tr><td>Ag/AgCl reference electrode</td><td>Pinnacle Technology, Inc.</td><td>7065</td><td>Necessary for carbon fiber recordings.</td></tr><tr><td>Glutamate biosensors&amp;nbsp;</td><td>Pinnacle Technology, Inc.</td><td>7001&amp;nbsp;</td><td>Enzymatic biosensor probe used for recording glutamatergic neurotransmission.</td></tr><tr><td>BASi guide cannulae</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>7030&amp;nbsp;</td><td>Guide cannulae implanted into brain region of interest to guide probe.</td></tr><tr><td>BASi cannula plastic headpiece for rats&amp;nbsp;</td><td>Pinnacle Technologies, Inc.</td><td>7011&amp;nbsp;</td><td>Headmount stabilizes probe and attaches to potentiostat.</td></tr></tbody></table>

measuring in vivo changes in extracellular neurotransmitters during naturally rewarding behaviors in female syrian hamsters

Nörotransmitter yayın bir hızlı zaman ölçeğinde ölçmek için yeteneği belirli davranışları veya manipülasyonlar bağlanacak şekilde neurotransmission şekillerinin sağlar; temel mekanizmaları ve devre elucidating güçlü bir araç. Microdialysis tekniği beyin ilgi hemen hemen her analit ölçmek için yıllardır kullanılan iken, bu teknik de geçici çözüm sınırlıdır. Alternatif olarak, hızlı tarama çevrimsel voltammetry geçici kesin ve son derece hassas biri; Ancak, teknik olarak zor bu yöntem ilgi analitin electroactivity üzerinde kullandığından, nonelectroactive maddeler (örneğin, nörotransmitter Glutamat) algılamak imkanı ortadan kaldırmıştır. Bu kağıt sabit potansiyel amperometry ve electroactive ve nonelectroactive nörotransmitter zamansal hassasiyetle ölçmek için enzimatik biosensing bir araya getiren bir anahtar teslim sistemi ayrıntıları. Bu iki güçlü teknikleri eşleştirme tonik ve phasic neurotransmission ölçüm için göreli kolaylıkla sağlar ve aynı anda birden fazla nörotransmitter kayıt izin verir. Bu yazının amacı görüntüleme nihai hedefi ile kadın hamster içinde doğal olarak tatmin edici davranış (Yani, cinsel davranış) kullanarak dopamin ve Glutamat neurotransmission in vivo ölçme işlemi göstermektir Teknik fizibilite diğer davranışları ve deneysel paradigmalar incelenmesi için bu testin.

Elektrokimyasal ve davranışsal yukarıda açıklanan metodoloji kodlama kullanarak, bu lab tonik ve dopamin ve Glutamat phasic dalgalanmalar cinsel davranış vivo kayıtları sırasında karakterize etmek başladı. Bu metodoloji geçici hassas şekilde nedeniyle, daha doğrusu cinsel davranış sırasında neurotransmission karakterize olabilir; aynı zamanda yayın şekillerindeki belirli değişiklikler karşılık gelen tonik değişiklikleri için karşılık gelen geçic...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters at JoVE.com

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Bu kağıt dopamin ve Glutamat yüksek zamansal çözünürlük ile serbest bırakılması sırasında doğal tatmin edici davranışlara ölçmek için karbon fiber elektrotlar ve enzimatik Biyoalgılayıcı teknoloji kullanarak sabit potansiyel amperometric kayıtları kullanımı detayları kadın hamster.

Doğal olarak kadın Suriye hamster davranışları ödüllendirme sırasında hücre dışı nörotransmitter ölçüm Vivo içinde değişimler

The ability to measure neurotransmitter release on a rapid time scale allows patterns of neurotransmission to be linked to specific behaviors or ...

measuring-vivo-changes-extracellular-neurotransmitters-during

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Introduction to Psychology

Neuroscience

Unit 1

Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Biopsychology

SCIENTISTS IN ACTION

10.1K Görüntüleme.  University of Minnesota. Bu kağıt dopamin ve Glutamat yüksek zamansal çözünürlük ile serbest bırakılması sırasında doğal tatmin edici davranışlara ölçmek için karbon fiber elektrotlar ve enzimatik Biyoalgılayıcı teknoloji kullanarak sabit potansiyel amperometric kayıtları kullanımı detayları kadın hamster.

Video: Measuring In Vivo Changes in Extracellular Neurotransmitters During Naturally Rewarding Behaviors in Female Syrian Hamsters

Operant Sensation Seeking in the Mouse

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior. These 'self-administration' methods have been used extensively in drug addiction research due to their high construct validity. Operant studies provide researchers a tool for preclinical investigation of several aspects of the addiction process. For example, mechanisms of acute reinforcement (both drug and non-drug) can be tested using pharmacological or genetic tools to determine the ability of a molecular target to influence self-administration behavior1-6. Additionally, drug or food seeking behaviors can be studied in the absence of the primary reinforcer, and the ability of pharmacological compounds to disrupt this process is a preclinical model for discovery of molecular targets and compounds that may be useful for the treatment of addiction3,7-9. One problem with performing intravenous drug self-administration studies in the mouse is the technical difficulty of maintaining catheter patency. Attrition rates in these experiments are high and can reach 40% or higher10-15. Another general problem with drug self-administration is discerning which pharmacologically-induced effects of the reinforcer produce specific behaviors. For example, measurement of the reinforcing and neurological effects of psychostimulants can be confounded by their psychomotor effects. Operant methods using food reinforcement can avoid these pitfalls, although their utility in studying drug addiction is limited by the fact that some manipulations that alter drug self-administration have a minimal impact on food self-administration. For example, mesolimbic dopamine lesion or knockout of the D1 dopamine receptor reduce cocaine self-administration without having a significant impact on food self-administration 12,16. 
Sensory stimuli have been described for their ability to support operant responding as primary reinforcers (i.e. not conditioned reinforcers)17-22. Auditory and visual stimuli are self-administered by several species18,21,23, although surprisingly little is known about the neural mechanisms underlying this reinforcement. The operant sensation seeking (OSS) model is a robust model for obtaining sensory self-administration in the mouse, allowing the study of neural mechanisms important in sensory reinforcement24. An additional advantage of OSS is the ability to screen mutant mice for differences in operant behavior that may be relevant to addiction. We have reported that dopamine D1 receptor knockout mice, previously shown to be deficient in psychostimulant self-administration, also fail to acquire OSS24. This is a unique finding in that these mice are capable of learning an operant task when food is used as a reinforcer. While operant studies using food reinforcement can be useful in the study of general motivated behavior and the mechanisms underlying food reinforcement, as mentioned above, these studies are limited in their application to studying molecular mechanisms of drug addiction. Thus, there may be similar neural substrates mediating sensory and psychostimulant reinforcement that are distinct from food reinforcement, which would make OSS a particularly attractive model for the study of drug addiction processes. The degree of overlap between other molecular targets of OSS and drug reinforcers is unclear, but is a topic that we are currently pursuing. While some aspects of addiction such as resistance to extinction may be observed with OSS, we have found that escalation 25 is not observed in this model24. Interestingly, escalation of intake and some other aspects of addiction are observed with self-administration of sucrose26. Thus, when non-drug operant procedures are desired to study addiction-related processes, food or sensory reinforcers can be chosen to best fit the particular question being asked. 
In conclusion, both food self-administration and OSS in the mouse have the advantage of not requiring an intravenous catheter, which allows a higher throughput means to study the effects of pharmacological or genetic manipulation of neural targets involved in motivation. While operant testing using food as a reinforcer is particularly useful in the study of the regulation of food intake, OSS is particularly apt for studying reinforcement mechanisms of sensory stimuli and may have broad applicability to novelty seeking and addiction.

In this protocol we describe a method of operant learning using sensory stimuli as a reinforcer in the mouse. It requires no prior training or food restriction, and it allows the study of motivated behavior without the use of a pharmacological or natural reinforcer such as food.

Fare Aradığınız Edimsel Sensation

Operant methods are powerful behavioral tools for the study of motivated behavior.  These 'self-administration' methods have been used extensively in drug ...

Nörobilim

Presynaptic Dopamine Dynamics in Striatal Brain Slices with Fast-scan Cyclic Voltammetry

Extensive research has focused on the neurotransmitter dopamine because of its importance in the mechanism of action of drugs of abuse (e.g. cocaine and amphetamine), the role it plays in psychiatric illnesses (e.g. schizophrenia and Attention Deficit Hyperactivity Disorder), and its involvement in degenerative disorders like Parkinson's and Huntington's disease. Under normal physiological conditions, dopamine is known to regulate locomotor activity, cognition, learning, emotional affect, and neuroendocrine hormone secretion. One of the largest densities of dopamine neurons is within the striatum, which can be divided in two distinct neuroanatomical regions known as the nucleus accumbens and the caudate-putamen. The objective is to illustrate a general protocol for slice fast-scan cyclic voltammetry (FSCV) within the mouse striatum. FSCV is a well-defined electrochemical technique providing the opportunity to measure dopamine release and uptake in real time in discrete brain regions. Carbon fiber microelectrodes (diameter of ~ 7 &mu;m) are used in FSCV to detect dopamine oxidation. The analytical advantage of using FSCV to detect dopamine is its enhanced temporal resolution of 100 milliseconds and spatial resolution of less than ten microns, providing complementary information to in vivo microdialysis.

Using fast-scan cyclic voltammetry to measure electrically evoked presynaptic dopamine dynamics in striatal brain slices.

Hızlı tarama Cyclic Voltametri striatal Beyin Slices presinaptik dopamin Dinamiği

Extensive research has focused on the neurotransmitter dopamine because of its importance in the mechanism of action of drugs of abuse (e.g. cocaine and ...

A Fully Automated and Highly Versatile System for Testing Multi-cognitive Functions and Recording Neuronal Activities in Rodents

We have developed a fully automated system for operant behavior testing and neuronal activity recording by which multiple cognitive brain functions can be investigated in a single task sequence. The unique feature of this system is a custom-made, acoustically transparent chamber that eliminates many of the issues associated with auditory cue control in most commercially available chambers. The ease with which operant devices can be added or replaced makes this system quite versatile, allowing for the implementation of a variety of auditory, visual, and olfactory behavioral tasks. Automation of the system allows fine temporal (10 ms) control and precise time-stamping of each event in a predesigned behavioral sequence. When combined with a multi-channel electrophysiology recording system, multiple cognitive brain functions, such as motivation, attention, decision-making, patience, and rewards, can be examined sequentially or independently.

In this report, we present a fully automated and highly versatile system capable of simultaneously testing multi-cognitive behaviors and recording neuronal activities for rodents.

Multi-bilişsel işlevler Test ve Kemirgenler Nöronal Etkinlikler kayıt için Tam Otomatik ve Çok Yönlü Sistemi

We have developed a fully automated system for operant behavior testing and neuronal activity recording by which multiple cognitive brain functions can be ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Kuluçka özlem sıçanlarda ölçmek için bir şartına yer tercih Protokolü

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

Davranış

A Conflict Model of Reward-seeking Behavior in Male Rats

The present protocol describes a novel conflict task as a model of inhibitory control in rats. In this model, a natural rewarding stimulus (sexual stimulus) that represents a high-value reward, and the aversive stimuli (pins), are concurrently presented. The male rats have to climb or jump over the obstacle full of pins to approach and investigate the sexual partner. If the animal persists in their approaching behavior regardless of the aversive stimuli, it is considered as a maladaptive or risky reward-seeking behavior. The conflict task permits the evaluation of deficit in inhibitory control resulting from exposure to abused drug, such as morphine, or a stressful event. 
The main advantage of this model is that it provides a simple and quick way to discover the deficit in inhibitory control after exposure to opiate drugs or other stressful events. In addition to opiates, this behavioral model would also be useful for quickly discovering the inhibitory control deficits induced by other addictive drugs. However, the limitation is that the male rats' performance may be subject to exercising effects with repeated testing under this conflict task. In the future, one can hope that the individuals with the compulsive phenotype of reward-seeking behavior after exposure to opiates will be identified based on modifying this conflict model.

This conflict model is used to measure the impairment of inhibitory control after exposure to addictive drugs, or other factors that may influence inhibitory control. A sexual stimulus and an aversive obstacle are concurrently presented, thus male rats have to conquer the obstacle to approach the sexual reward.

Ödül-arama davranışı erkek Rats içinde bir çatışma Model

The present protocol describes a novel conflict task as a model of inhibitory control in rats. In this model, a natural rewarding stimulus (sexual ...

Chronic Stress Shifts Effort-Related Choice Behavior in a Y-Maze Barrier Task in Mice

Mood disorders, including major depressive disorder, can be precipitated by chronic stress. The Y-maze barrier task is an effort-related choice test that measures motivation to expend effort and obtain reward. In mice, chronic stress exposure significantly impacts motivation to work for a higher value reward when a lesser value reward is freely available compared to unstressed mice. Here we describe the chronic corticosterone administration paradigm, which produces a shift in effortful responding in the Y-maze barrier task. In the Y-maze task, one arm contains 4 food pellets, while the other arm contains only 2 pellets. After mice learn to select the high reward arm, barriers with progressively increasing height are then introduced into the high reward arm over multiple test sessions. Unfortunately, most chronic stress paradigms (including corticosterone and social defeat) were developed in male mice and are less effective in female mice. Therefore, we also discuss chronic non-discriminatory social defeat stress (CNSDS), a stress paradigm we developed that is effective in both male and female mice. Repeating results with multiple distinct chronic stressors in male and female mice combined with increased usage of translationally relevant behavior tasks will help to advance the understanding of how chronic stress can precipitate mood disorders.

The Y-maze barrier task is a behavior test that examines motivation to expend effort for reward. Here, we discuss testing multiple well-validated chronic stressors including chronic corticosterone and social defeat stress with this behavior, as well as the novel chronic non-discriminatory social defeat stress (CNSDS), which is effective in females.

Kronik Stres Shifts Çabalar-İlgili Seçim Davranış Farelerde Bir Y-Labirent Bariyer Görev

Mood disorders, including major depressive disorder, can be precipitated by chronic stress. The Y-maze barrier task is an effort-related choice test that ...

Environmental Modulations of the Number of Midbrain Dopamine Neurons in Adult Mice

Long-lasting changes in the brain or &#8216;brain plasticity&#8217; underlie adaptive behavior and brain repair following disease or injury. Furthermore, interactions with our environment can induce brain plasticity. Increasingly, research is trying to identify which environments stimulate brain plasticity beneficial for treating brain and behavioral disorders. Two environmental manipulations are described which increase or decrease the number of tyrosine hydroxylase immunopositive (TH+, the rate-limiting enzyme in dopamine (DA) synthesis) neurons in the adult mouse midbrain. The first comprises pairing male and female mice together continuously for 1 week, which increases midbrain TH+ neurons by approximately 12% in males, but decreases midbrain TH+ neurons by approximately 12% in females. The second comprises housing mice continuously for 2 weeks in &#8216;enriched environments&#8217; (EE) containing running wheels, toys, ropes, nesting material, etc., which increases midbrain TH+ neurons by approximately 14% in males. Additionally, a protocol is described for concurrently infusing drugs directly into the midbrain during these environmental manipulations to help identify mechanisms underlying environmentally-induced brain plasticity. For example, EE-induction of more midbrain TH+ neurons is abolished by concurrent blockade of synaptic input onto midbrain neurons. Together, these data indicate that information about the environment is relayed via synaptic input to midbrain neurons to switch on or off expression of &#8216;DA&#8217; genes. Thus, appropriate environmental stimulation, or drug targeting of the underlying mechanisms, might be helpful for treating brain and behavioral disorders associated with imbalances in midbrain DA (e.g. Parkinson&#8217;s disease, attention deficit and hyperactivity disorder, schizophrenia, and drug addiction).

This protocol describes two different environmental manipulations and a concurrent brain infusion protocol to study environmentally-induced brain changes underlying adaptive behavior and brain repair in adult mice.

Yetişkin Farelerde Orta beyin dopamin Nöronlar Sayısının Çevre Modülleri

Long-lasting changes in the brain or &#8216;brain plasticity&#8217; underlie adaptive behavior and brain repair following disease or injury. Furthermore, ...

<meta charset="utf8"></head><body>Tıkınırcasına Yeme Bozukluğunun Lezzetli Bir Gıda Erişimli Fare Modeli ile İncelenmesi

Intermittent Binge-Intake Model in Mice

Obesity affects one in eight individuals globally. Overeating, especially high-calorie foods, plays a significant role in obesity. Binge eating disorder (BED) is a complex condition caused by a combination of biological, psychological, and social factors. It involves excessive consumption of high-calorie foods in a short period and is often linked to anxiety and cravings.
Here, we present a protocol employing continuous and intermittent access to a new highly palatable food (HPF) -- M&amp;M&#39;s -- to develop a mouse model for investigating binge eating disorder (BED). The HPF, chosen for its high fat and sugar content, represents an optimal food source to study due to its strong palatability, which makes it particularly suited for examining compulsive eating behaviors. Using C57BL/6 mice, we provided continuous or intermittent access to M&amp;M&#39;s while allowing unrestricted access to standard chow and water. By the 8th day, the mice in the intermittent access group exhibited pronounced binge-eating behaviors, which persisted through the 26th day. These mice also consumed significantly more calories -- predominantly from the confectionary -- than those in the continuous access and control groups. The contrast between continuous and intermittent access underscores the critical role of feeding schedules in promoting the overconsumption of palatable foods.
Furthermore, behavioral assessments revealed intermittent access to the HPF-induced anxiety-like behaviors, highlighting the psychological impact of access patterns on both eating behavior and emotional states. By incorporating these two distinct feeding paradigms, this study offers valuable insights into how the availability of highly palatable foods can exacerbate binge-eating tendencies. This model provides a more realistic approach to studying binge-eating behaviors and their metabolic consequences. It highlights the importance of standardized models in biomedical research. Our findings offer insights into the physiological and neural mechanisms underlying BED, which could pave the way for developing effective therapeutic interventions for BED and obesity.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Tıkınırcasına Yeme Bozukluğunu Araştırmak için Erişilebilir M&M Tabanlı Fare Modeli - Yeme Davranışları, Kaygı ve Sinirsel Mekanizmalara İlişkin İ

A binge-eating model was established in mice using intermittent access to M&amp;M's (a highly palatable food made of fat and sugar). Mice with intermittent access to this high-fat, high-sugar food showed stress-like behaviors, increased caloric intake, and a preference for that food over standard chow compared to mice with continuous or no access to the food.

Farelerde Aralıklı Tıkınırcasına Alım Modeli

Obesity affects one in eight individuals globally. Overeating, especially high-calorie foods, plays a significant role in obesity. Binge eating disorder ...

Doğal olarak kadın Suriye hamster davranışları ödüllendirme sırasında hücre dışı nörotransmitter ölçüm Vivo içinde değişimler

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Fare Aradığınız Edimsel Sensation

Hızlı tarama Cyclic Voltametri striatal Beyin Slices presinaptik dopamin Dinamiği

Multi-bilişsel işlevler Test ve Kemirgenler Nöronal Etkinlikler kayıt için Tam Otomatik ve Çok Yönlü Sistemi

Kuluçka özlem sıçanlarda ölçmek için bir şartına yer tercih Protokolü

Ödül-arama davranışı erkek Rats içinde bir çatışma Model

Kronik Stres Shifts Çabalar-İlgili Seçim Davranış Farelerde Bir Y-Labirent Bariyer Görev

Yetişkin Farelerde Orta beyin dopamin Nöronlar Sayısının Çevre Modülleri

Farelerde Aralıklı Tıkınırcasına Alım Modeli

Farelerde Aralıklı Tıkınırcasına Alım Modeli

Farelerde Aralıklı Tıkınırcasına Alım Modeli