Pulmoner arteriyel hipertansiyon için mümkün olan en iyi modeli ürettiği için bu protokol önemlidir. Başka hiçbir model insan PAH hastalarında bulunan pleksiform lezyonlar üretir. En büyük avantajı, sağ akciğer ve pulmoner arterdeki kan akışını iki katına çıkararak endotel hasarına neden olması ve akciğerleri iki kat daha fazla çalışmaya zorlamamızdır.
Grubumuz terapötik geliştirmek için pulmoner arteriyel hipertansiyon yüksek verimli bir model geliştirmiştir. Pulmoner arter hipertansiyonyanı sıra, Bu yöntem rejeneratif tıpyararlı olabilir ve konjenital kalp defektleri veya post-pnömonektomi hastaları gibi artan pulmoner akım ile diğer hastalıklara fikir verebilir. Bu tekniği hiç yapmamış biri için tavsiyem protokolü tam olarak takip etmek ve cerrahın tam olarak ne yaptığını görebilmesini sağlamaktır.
%4 isofluran eki fareyi anestezi ettikten sonra, hayvan nefes borusunu aydınlatmak için fiber optik kaz ışığı kullanılarak entübe edilir. Gırtlağa 16 kalibrelik bir kateter yerleştirin ve entübasyonu onaylamak için kateterden nefes alan nefesteki nem yoğunluğunu gözlemlemek için soğuk bir ayna kullanın. Fareyi ventilatöre bağlayın ve fareyi mikroskop un altına 37 derece lik bir ısıtma yastığına doğru dekübit pozisyonunda yerleştirin.
Ön ayakları bantla sabitleyin ve sol göğüs kafesini ön bacağın arkasından göğüs kafesinin sonuna kadar tıraş etmek için makaskullanın. Üç sıralı% 10 povidon iyot çözeltisi ve% 70 etanol mendil ile maruz kalan cilt temizleyin ve ameliyat boyunca kalp hızı ve oksijen doygunluğu izlemek için sıçan ayağıüzerine bir nabız-oksimetre yerleştirin. Şimdi, mikroskobu ayarlayın ve cerrahi görünümü odak haline getirin.
Sonra, steril bir ortam yaratmak için farenin vücudunun üzerine steril bir perde ve alet tepsisi yerleştirin. Ve son olarak, steril enstrümanları steril alet tepsisine yerleştirin. Sol pnömonektomi yapmak için, cooley-Mayo makas ve Gerald doku forceps cerrahi perde de 2-3 santimetre delik kesmek için kullanın ve sol toraks iki santimetre uzunluğunda lateral kesi yapmak için bir cerrahi bıçak kullanın.
Kaburga ve interkostal kaslar maruz kalana kadar doku her tabaka kesmek için Cooley-Mayo makas kullanın. Üçüncü interkostal alanın kas yoluyla bir delik yapmak için bir sivrisinek kullanın. Çift uçlu bir sonda kullanarak, akciğeri hareket ettirin ve akciğer arteri görselleştirin ve McPherson-Vannas Iris makasını kullanarak interkostal kasları 1-2 santimetre genişliğe açın.
Kaburga ve kasları açık tutmak için sol plevra içine küçük bir kendini istinat retraktör yerleştirin ve pulmoner arter ve bronş erişim sağlamak için karın sol akciğer aşağı hareket ettirin. Sol ana bronş ve pulmoner arter ligasyonu için, ilk, bir ligating klip aplikatör içine orta hemoclip yük ve dikkatle pulmoner arter ortaya çıkarmak için sol akciğerüst kısmını kaldırmak için Wangensteen atravmatik forseps kullanın. Arter etrafında klips ve aplikatör kapatın, kapatmak veya sol azygos ven yırtılma değil dikkat.
Ve kas lifleri ayırmak için bademcik kullanarak daha fazla kesi açın. Ligating klipsap aplikatör içine başka bir orta Hemoclip yükledikten sonra, sol ana bronş ve sol pulmoner ven görselleştirilene kadar kesi den akciğerin alt kısmını kaldırmak için atravmatik forseps ve standart doku forseps kullanın. İkinci Hemoklip ile birlikte sol ana bronş ve pulmoner ven dikkatle ligate ve kesme veya klips yırtılma olmadan akciğer kaldırmak için makas kullanın.
Sonra, herhangi bir kan emmek ve herhangi bir kanama yı önlemek için steril gazlı bez küçük bir parça kullanın. Kaburga ve interkostal kasları kapatmak için iğne tutucu ve 4-0 prolene sütür kullanın. Interkostal kasları kapatmadan önce, cerrahi kesiden uzakta ve yedinci interkostal alana torasik kaviteye 16-gauge kateter yerleştirin ve hemen iğneyi çıkarın, kateteri yerinde bırakarak.
Göğüs tüpü çıkarıldığında, delik kapalı bağlı olacak, böylece deri ve göğüs tüpü etrafında 5-0 dikiş yerleştirin ve kaburga kapatmak için dikiş ler kravat. Çalışan bir 5-0 dikiş ile cilt ve deri altı alanı kapatın ve toraks normal negatif basıncı geri yüklemek için kateter aracılığıyla plevral boşluğundan hava tahliye etmek için üç mililitreşli şırınga kullanın. Havanın torasik kaviteye geri dönmesini önlemek için kateteri hemen bağlamak için bir iğne tutucu kullanın.
Kateteri çıkarın ve deliği kapatmak için sütür bağlayın. Pnömonektomi ve monokrotaline grupta, ağır pulmoner hipertansiyon 21 gün içinde gelişir, tedavi edilmeyen sahte hayvanların kontrolüne göre ortalama pulmoner arter basıncında bir artış kanıtlandı. Pnömonektomi artı Sugen grubunda ortalama pulmoner arter basıncı kontrol grubuna göre üç kat daha yüksektir.
Sağ ventrikül sistolik basınç da kontrol grubuna göre, hem monokrotaline ve Sugen tedavi hayvanlarda çok daha yüksektir. Hematoksilin ve eozin lekeli normal sıçan akciğer dokusu bölümlerinde alveoller ve alveoler yapılar arasındaki boşluklar belirgindir ve damarlar açık ve normal kalınlıktadır. Pulmoner arter hipertansiyon akciğer, remodeling kanıt vardır, damar duvarlarının kalınlaşma, damarlarda şiddetli daralma, ve inflamasyon ve fokal pulmoner arterit.
Hayvan akciğerini kaybetmeyi telafi etmek zorundadır, bu yüzden iyileşme döneminde sabırlı olmak önemlidir. Hayati belirtileri izleyin ve gerektiğinde ek oksijen veya akciğer hacmi verin. Sugen pulmoner arteriyel hipertansiyon klinik ilgili işareti olan endotel apoptoz oluşturur.
Kemirgenlerde sol pnömonektomi modeli bilim adamları için akış anormallikleri çalışma ve pulmoner arteriyel hipertansiyon için yeni tedaviler geliştirmek için yol açtı. Bu modelde isoflurane, Sugen ve/veya MCT kullanımı nedeniyle, kişisel koruyucu ekipmanlar her zaman giyilmelidir.
