이 프로토콜은 폐 동맥 고혈압에 가장 적합한 모델을 생성하기 때문에 중요합니다. 다른 모델은 인간 PAH 환자에서 발견되는 플렉시폼 병변을 생성하지 않습니다. 주요 장점은 우리가 오른쪽 폐와 폐 동맥에 있는 혈액의 흐름을 두 배로, 내피 손상을 일으키는 원인이 되고 폐가 두 배 열심히 작동하도록 강요한다는 것입니다.
우리 그룹은 치료법을 개발하기 위해 폐 동맥 고혈압의 매우 효율적인 모델을 개발했습니다. 폐 동맥 고혈압 이외에, 이 방법은 재생 의학에 도움이 될 수 있고 선천성 심장 결함 또는 후 폐렴 술 환자 같이 증가한 폐 흐름으로 그밖 질병에 통찰력을 줄 수 있었습니다. 이 기술을 수행 한 적이없는 사람을 위해, 내 조언은 프로토콜을 정확하게 따르고 외과 의사가 그들이하고있는 일을 정확하게 볼 수 있는지 확인하는 것입니다.
4%의 이소플루란으로 쥐를 마취한 후, 동물은 광섬유 거위라이트를 사용하여 기관지 조명을 사용한다. 후두에 16 게이지 카테터를 삽입하고 차가운 거울을 사용하여 카테터에서 숨을 내쉬는 호흡에서 습도의 응축을 관찰하여 삽관을 확인합니다. 쥐를 인공호흡기에 연결하고 37도 의 섭씨 가열 패드에 오른쪽 디큐비투스 위치에 있는 현미경 아래에 쥐를 놓습니다.
테이프로 앞다리를 고정하고 클리퍼를 사용하여 앞다리 뒤에서 흉곽끝까지 왼쪽 흉부를 면도합니다. 노출된 피부를 순차적으로 10%의 포비단 요오드 용액 과 70%에탄올 물티슈로 청소하고, 수술 내내 심박수와 산소 포화도를 모니터링하기 위해 쥐의 발에 맥박 옥시계를 놓습니다. 지금, 현미경을 조정하고 초점에 외과 보기를 가지고.
그런 다음, 멸균 커튼을 쥐의 몸과 악기 트레이 위에 놓고 멸균 환경을 만듭니다. 그리고 마지막으로 멸균 기기 트레이에 멸균 기구를 놓습니다. 왼쪽 폐렴 절제술을 수행하려면 쿨리 마요 가위와 제럴드 조직 집게를 사용하여 수술 드레이프에 2 ~ 3 센티미터 구멍을 자르고 수술 블레이드를 사용하여 왼쪽 흉부에서 2 센티미터 길이의 측면 절개를 합니다.
쿨리 마요 가위를 사용하여 갈비뼈와 늑간 근육이 노출 될 때까지 조직의 각 층을 잘라냅니다. 모기를 사용하여 세 번째 늑간 공간의 근육을 통해 구멍을 만듭니다. 이중 형 프로브를 사용하여 폐 동맥을 시각화하기 위해 폐를 이동하고 McPherson-Vannas 아이리스 가위를 사용하여 늑간 근육을 약 1 ~ 2 센티미터 너비로 엽니다.
갈비뼈와 근육을 열어 놓고 왼쪽 폐를 왼쪽 폐를 낮게 움직여 폐 동맥과 기관지에 접근할 수 있도록 왼쪽 폐를 왼쪽 흉막에 놓습니다. 왼쪽 주 기관지 및 폐 동맥의 결찰을 위해 먼저 중간 크기의 헤모클립을 리깅 클립 어플리케이터에 넣고 Wangensteen 외상성 집게를 사용하여 왼쪽 폐의 상부를 조심스럽게 들어 올려 폐 동맥을 노출시합니다. 왼쪽 azygos 정맥을 닫거나 파열하지 않도록주의하여 동맥 주변의 클립과 어플리케이터를 닫습니다.
그리고 편도선을 사용하여 절개를 더 열어 근육 섬유를 분리합니다. 다른 배지 헤모클립을 리깅 클립 어플리케이터에 적재한 후, 외상성 집게와 표준 조직 집게를 사용하여 왼쪽 주 기관지 및 좌측 폐 정맥이 시각화될 때까지 절개에서 폐의 하부를 들어 올립니다. 왼쪽 메인 기관지와 폐 정맥을 두 번째 헤모클립과 함께 조심스럽게 리게이트하고 가위를 사용하여 클립을 자르거나 찢지 않고 폐를 제거합니다.
그런 다음, 모든 혈액을 흡수하고 출혈을 줄기 위해 멸균 거즈의 작은 조각을 사용합니다. 바늘 홀더와 4-0 프렌 봉합사를 사용하여 갈비뼈와 늑간 근육을 닫습니다. 늑간 근육을 닫기 전에 16 게이지 카테터를 외과 절개에서 벗어나 일곱 번째 늑간 공간에 흉부 구멍에 삽입하고 즉시 바늘을 제거하여 카테터를 제자리에 둡힙하십시오.
가슴 튜브를 제거하면 구멍이 닫히도록 피부와 가슴 튜브 주위에 5-0 봉합사를 넣고 봉합사를 묶어 갈비뼈를 닫습니다. 5-0 봉합사로 피부와 피하 공간을 닫고, 3밀리리터 주사기를 사용하여 카테터를 통해 흉막 구멍에서 공기를 배출하여 흉부에서 정상적인 음압을 회복시다. 바늘 홀더를 사용하여 카테터를 즉시 고정하여 공기가 흉부 구멍으로 다시 돌아가는 것을 방지하십시오.
카테터를 제거하고 봉합사를 묶어 구멍을 닫습니다. 폐렴절제술 및 단크로알린 군에서, 가혹한 폐 고혈압은 처리되지 않은 가짜 동물을 통제하기 에 비해 평균 폐 동맥 압력의 증가에 의해 입증된 바와 같이, 21일까지 발전합니다. 폐렴절제술플러스 수겐군에서는, 평균 폐동맥 압력은 대조군보다 3배 높다.
오른쪽 심실 수축기 압력은 대조군에 비해 단크로알린 및 수겐 처리 동물 모두에서 훨씬 더 높습니다. 헤마톡시린과 에신은 일반 쥐 폐 조직 섹션에서 폐포와 폐포 구조 사이의 공간이 명백하며 혈관은 맑고 정상적인 두께가 있습니다. 폐 동맥 고혈압 폐에서는 리모델링, 혈관 벽의 두껍게, 혈관의 심한 수축, 염증 및 초점 폐 동맥염의 증거가 있습니다.
동물은 폐를 잃는 것에 대해 보상해야하므로 회복 기간 동안 인내심을 가져야합니다. 활력 징후를 모니터링하고 필요에 따라 추가 산소 또는 폐 볼륨을 제공합니다. 수겐은 내피 성 동맥 고혈압의 임상 관련 징후인 내피 성 석멸을 만듭니다.
설치류의 왼쪽 폐렴 절제술 모델은 과학자들이 흐름 이상을 연구하고 폐 동맥 고혈압에 대한 새로운 치료법을 개발할 수 있는 길을 열었습니다. 이 모델에서 이소플루란, 수겐 및/또는 MCT를 사용하므로 개인 보호 장비는 항상 착용해야 합니다.
