Doğadaki bitkilerin çoğu muhtemelen mikordehizal mantarlar denilen simbiyotik kök yaşayan mantarlar ile birbirine bağlıdır. Bu yöntem, ortak mikordes ağlarının bitki etkileşimlerini ve sonraki ekolojik sonuçları nasıl etkilediğini açıkça inceler. Bu yöntemle, mantarların dışlanmasının aksine, tüm bitkilerin mantarlar tarafından kolonize edilmesine izin verirken, yaygın micorrhizal ağların rolünü açıkça inceleyebiliriz, bu da kötü büyüyen bitkilerle sonuçlanır.
Esnek plastik ile ticari borulu fide kapları değiştirmeye başlamak için, bir matkap basın kullanın ve matkap pres üzerinde bir çit karşı konteyner tutun, ve sondaj sırasında yerinde tutmaya yardımcı olmak için konteyner içine sığar kısa bir dübel ile durdurmak var. Daha sonra, biri diğerinin üzerinde, kabın kenarlarında iki delik açın, böylece delikler birbirinden yaklaşık bir santimetre uzakta dır. Yaklaşık iki santimetre genişliğinde ve beş santimetre uzunluğunda bir uzun açıklık yapmak için delikler arasında kalan ince plastik parçası kesin.
Kabın karşı tarafındaki bu uzatılmış açıklıkları kesmeyi tekrarlayın. Naylon örgü ile yuvaları kapsayacak şekilde, konteyner ler gibi 8,5 santimetre adet olarak çok 9,5 santimetre içine 40 mikrometre gözenek örgü kesti. Daha sonra, yüksek mukavemetli endüstriyel sıcak tutkal kullanarak, naylon örgü harici her iki açıklıkları kapsayacak şekilde kaplar üzerine, kumaş bazı hafif örtüşme ile bağlayın.
Konteyner üzerinde açıklıklar etrafında sıcak tutkal uygulayın ve naylon örgü üzerinde uzun kenarları boyunca, ve naylon örgü üzerine konteyner rulo, ve hidrofobik membran, kullanıldığında, parmaklarınızı yanan önlemek için. Örgü kenarlarının çakıştığı kumaş kenarı boyunca bir tutkal tabakası ekleyin ve sıkıca mühürlemek için kenarı bazı kartonüzerine bastırın. Tutkal soğuduktan sonra, gevşek kenarları ve yırtılmayı önlemek için kumaşın üst ve alt uçlarını konteynere takmak için esnek bant kullanın.
Aynı bandı kullanarak, tencerenin geri kalanına kabın kök büyümesini önlemek için her kabın konik ucunun kenarlarındaki küçük delikleri kapatın. Drenaj sağlarken toprak kaybını önlemek için her kabın altına bir cam mermer yerleştirin ve daha sonra el yazması açıklandığı gibi tencere monte. Bitkiler arasında cmn oluşturma potansiyeli içermeyen bir kontrol tedavisi için katı, değiştirilmemiş kaplar kullanın.
1,2 santimetre uzunluğundaki doğranmış kök parçalarını toprakla iyice karıştırarak toprağa mantar inoculum ekleyin. Bitkileriçin mevcut mineral besin konsantrasyonunu azaltmak için bir kısır silika kum veya cam boncuk ile karışık istenilen bir toprak seçin. Doldurulmuş kapları önceden yapılmış delinmiş köpük kaplara yerleştirin.
Yeterli drenaj besin-zayıf silika kum karışımı yapmak için, bir çimento karıştırıcı küçük parçacık boyutu kum ile orta parçacık boyutu kum karıştırın. Küçük boşlukları doldurmaya yardımcı olmak için bir huni kullanarak bu karışım ile interstisyel alanı doldurun. Sonra, nakil ön arıtma, ya da sözde hemşire bitkiler, her konteyner içine istenilen türlerin mantarları sürdürmek için, hangi konteynerler arasında yayılır ve ortak micorrhizal ağları kurmak.
CMN kurulması için izin vermek için bir sera yaklaşık 24 derece santigrat iki ila üç ay için bitkiler büyümek. Kaplara tohum atarak deneysel bitkileri dikin. Tüm konteynerler onların sürgünler kırpma tarafından, ön işlem hemşire bitkileri çıkarmadan önce fide çimlenmiş olana kadar bekleyin.
CMN tedavileri kurmak için, deney süresince bazı kapların hareket ettirmemelerini sağlayın. Modifiye kaplar arasında uzanan hyphae fiziksel olarak kesmek için, bazı konteynerler haftalık döndürmek, bir tam rotasyon yoluyla bunu emin olun, istemeden yer üstü etkileşimleri değiştirmesini önlemek için. Rotasyondan hemen sonra, interstisyel substrat ile konteynerlerin kenarları arasındaki teması yeniden kurmak için tüm kapları ağır sulayın.
Ortak micorrhizal ağları kestikten sonra tüm kapları suyla ıslatmak, konteyner ile interstisyel substrat arasındaki teması yeniden kurmak için önemlidir, bu nedenle konteynerlerin istenmeyen aerasyonlarını önler. % 0.5 azot 15 zenginleştirilmiş potasyum nitrat ve amonyum klorür ile komşu bitkilerdöllemek. Eşit konsantrasyonda bir azot 14 gübre ile hedef birey döllemek.
Deney boyunca tencerelerin konumlarını en az aylık olarak yeniden rastgele belirleyin. Büyümenin yavaşlamaya başladığını izlemek için en uzun yaprak uzunluğunu ölçerek haftalık büyümeyi ölçün ve bitkiler kök ebağlı hale gelmeden önce hasat yapmayı unutmayın. Hasat için, tüm yerüstü doku klip ve onların tedavi, pot ve pozisyon ile etiketli zarflar içine bireysel bitkiler yerleştirin.
Daha sonra 60 santigrat derecede, sürekli ağırlıkta, yer üstü dokuları kurutun ve sonra her bitki dokusunun kuru ağırlığını ölçün. Kapları çıkarmadan ve kökleri hasat etmeden önce toprağın 2-3 gün kurumasını bekleyin. Hasattan sonra, kök sistemlerinden mümkün olduğunca çok toprağı hafifçe fırçalayın.
Kök kaybını önlemek için kökleri 250 mikron gözenek boyutunda bir elek üzerinde yıkayın. Köklerin kurumasını sağladıktan sonra, tüm kök sistemini tartın. Kök sistemini rastgele kırpın ve parçaları %50 etanol etanol'e yerleştirin.
Kalan kök sistemini yeniden tartın ve kuru ağırlık değerlendirmesi için 60 santigrat derecede kuruması için etiketli bir kağıt zarfta saklayın. Andropogon gerardii Vitman'ı hedef bir bitki deneyinde büyüterken, CMN'lerin kesilmesi veya engellenmesi hedefin yerüstü kuru ağırlığını azaltarak, sağlam CMN'lerin bitki büyümesini teşvik ettiğini düşündürmektedir. Kopmuş CMN'li ve hiçbir CMN'si olmayan bitkiler tedavilerine benzer şekilde yanıt verdi.
Bir bireyin büyümesinin yakındaki başka bir bireyin büyümesini baskıladığı rekabet, sağlam CMN tedavisinde tespit edildi, ancak kopmuş veya hiç CMN tedavilerinde değil. Farklı mineral besin yaprağı doku konsantrasyonları ayrıntılı karşılaştırmalar, manganez bitki boyutu sadece konsantrasyonları karşı, olumlu hedef bitki yerüstü kuru ağırlıkları ile ilişkili, tüm tedaviler üzerinde. Hedef bitki dokusu, yaprak dokularında bitki büyüklüğüne karşılık 15 azot olarak değerlendirildi ve sadece komşuların konteynerlerine azot 15 etiketi eklendi.
Sağlam CMN'li hedef bitkiler, diğer her iki tedaviye kıyasla daha yüksek azot 15 konsantrasyonuna sahipti. Bozulmamış CMN'ler, kopmuş CMN'lerin tedavisinden azot miktarının güçlü bir şekilde pozitif, önemli ölçüde farklı bir eğimine sahipti, bu da büyük bitkilerin, küçük hedef bireylere göre komşu konteynerlere ulaşan CMN'lerden daha fazla azot elde ettiğini düşündürmektedir. PVC borudan yapılmış döndürülmüş çekirdekler kullanılarak yapılan bir saha deneyinde, boruların ötesindeki radikal dışı miselyumun 13 aylık deney sırasında soapberry'nin büyümesi üzerinde çok az etkisi oldu.
Ancak, boruların rotasyonu ile kesilmesi, klorotik bitkiler tarafından önemli ölçüde gösterilen foliar azot, fosfor ve bakır konsantrasyonlarını azalttı. Kumaşın yırtılmalarını önlemek için kabın her bir kabın üzerine yapıştırıldığı yönde ki kapları döndürün ve bitkilerdeki yer üstü değişikliklerini azaltmak için 360 derece döndürün. Bu prosedür, kök kolonizasyonunda radikal dışı miselyumun rolünü ve besin alımı üzerindeki etkisini incelemek için steril toprakla doldurulmuş modifiye PVC borularla sahada kullanılabilir.
Bu teknik, yaygın mikordehizal ağları ile bitkilerin karşılaştırılması için izin verir, ağları ile bağlı olmayan mikordehizal bitkiler, yerine mikordeler olmadan küçük bitkiler için, en sık yapılır.
