Bu protokol, bir termal stres sırasında fizyolojik performansı değerlendirmek için empedans pnömografi kullanımını göstermek için bir model olarak genç Amerikan ıstakoz kullanır. Bu teknik, kalbin her iki tarafına yerleştirilen iki elektrot boyunca küçük bir salınımlı elektrik akımı geçer ve kas sözleşmeleri ve rahatlatır gibi voltaj değişimi ölçer. Bu voltaj daha sonra kolayca termal performans pencerelerini belirlemek için değerlendirilen sıcaklık aralığı boyunca kalp hızı arsa dakika başına atım dönüştürülebilir.
Bu teknik minimal invazivve doğrudan kardiyak performansı görsel olarak gözlemlemek zor olabilir geç evre organizmalarda gerçek zamanlı veri toplama sağlar. Bu yöntem aynı zamanda Arrhenius mola sıcaklığı veya ABT hesaplamaya odaklanır ve termal sınırları belirlemek için öldürücü olmayan bir uç noktası olarak kullanır. Çapı yaklaşık sekiz ila 10 santimetre olan ve 40 ila 70 santimetre uzunluğunda uzantılara sahip bir ısı alışverişi bobini oluşturmak için kendi etrafında şeffaf dövülebilir boru sarın.
Elektrik bandı kullanarak bobini sabitleyin. Dış besleme ve sirkülasyon su banyosu dönüş parçaları ısı alışverişi bobini takın. Hortum kelepçeleri kullanılarak bağlantının güvenli olduğundan emin olun.
Ters ozmoz suyu ile dolaşan su banyosu nun kuyusunu doldurun ve güç kablosunu bir prizine takın. Su banyosunu açın ve ısı alışverişi bobinine olan bağlantısında sızıntı olmadığından emin olun. Siyah BNC kablosunu ünitedeki AC çıkışına takarak ve kanal bir bağlantı noktasını kullanarak güç laboratuarı veri kaydedicisine bağlayarak empedans dönüştürücüsünü ayarlayın.
Termistörü T tipi bölmesine takın ve ardından T tipi bölmesini güç laboratuarı veri kaydedicisinin kanal iki bağlantı noktasına takın. Güç laboratuarı veri kaydedicisinin güç kablosunu bir güç kaynağına takın ve usb kablo konektörünü kullanarak veri kaydediciyi bir PC bilgisayarına bağlayın. Deneysel arenadaki alışma odasını 7,5 litre yapay deniz suyuyla doldurun.
Istakozu plastik bir ızgaraya yerleştirin. Dikkatle küçük kablo bağları kullanarak plastik ızgara ıstakoz pençeleri ve karın güvenli. Bir kağıt havlu ile carapace kapalı kuru ve% 70 etanol batırılmış bir pamuklu bez ile temizleyin.
Dikkatle el perikardın her iki tarafında karaayak neredeyse iki küçük delik matkap. Steril bir kesme iğnesi yerleştirerek her deliği hafifçe bitirin. Bir jilet kullanarak tellerin yalıtım küçük bir bit kazıyın.
Her telin ucunu forceps kullanarak dikkatlice bükün ve yeni açılan deliklerin her birine bir tane yerleştirin. Her tel kurşunu küçük bir damla süper tutkal kullanarak sabitleyin ve 5 ila 10 dakika kurumasını bekleyin. Tutkal kuruduktan sonra, tel empedans dönüştürücüyol larını takın ve açın.
Istakozu alışma odasına yerleştirin ve implante edilmiş elektrotlara 15-20 dakika uyum sağlamasına izin verin. Güç laboratuarını açın ve bilgisayardaki laboratuvar grafik yazılımını açın. Yeni denemeyi tıklatın ve grafik görünümü ekranını açık bırakın.
Grafik görünümünde, Kanal Bir'in kanal işlevi menüsünü bulun. Menüden giriş amplifikatörü seçin ve AC bağlantı seçin. Empedans dönüştürücüde, dengeyi sıfıra yakın tutmayı amaçlayan güç laboratuarı çıkışında güçlü bir sinyal gözlemlenene kadar kazanç ve dengeyi ayarlayın.
Kanal iki'de gerçek zamanlı sıcaklık verilerini kaydetmek için T tipi bölmeyi seçin. Başlat düğmesini tıklatın ve güç laboratuarı veri günlüğe kaydetmeye başlayacaktır. Plastik ızgarayı ekli ıstakozla dikkatlice deneysel arenaya yerleştirin ve ısı alışverişini ızgaranın üzerine yerleştirin.
Test konusu üzerinde görsel stresi azaltmak için deneysel arenada kapağı yerleştirmeden önce, ıstakoz yakın termist yerleştirin. Bakiyeyi gerektiği gibi ayarlayın ve denemenin başladığını belirten çıktıya yorum yapın. Çıktı deneme boyunca periyodik olarak kaydedilmelidir.
Çıktıyı bilgisayara kaydetmek için Dosya'yı tıklatın ve Kaydet'i seçin. Yaklaşık 1,5 santigrat derece her 15 dakikada bir hızda deneysel arenanın su sıcaklığını artırmak bir rampa elde etmek için 12 için 30 santigrat derece iki saat ve 30 dakikalık bir süre içinde bir rampa elde etmek için sirkülasyon su banyosu sıcaklığını ayarlayarak. Rampa tamamlandığında, deneysel arenadan ıstakoz çıkarın ve yaklaşık 20 dakika boyunca bir kurtarma banyosu içine yerleştirin.
20 dakika sonra, güç laboratuarı çıkışındaki dur düğmesine basın ve dosyayı kaydedin. Elektrotları dikkatlice çıkarın ve test ini tutma tankına geri döndürmeden önce kablo bağlarını kesin. Pencere menüsüne tıklayarak ve veri defterini seçerek veri defterini açın.
A sütununa çift tıklayarak ve seçim ve Etkin Nokta'ya tıklayarak A sütununa zaman ayarlayın, zamanı seçin ve Tamam'ı tıklatarak pencereyi kapatın. B sütununa, B sütununa çift tıklayarak ve İstatistikler'i seçerek, verilerin seçili kısmının üzerindeki ortalama sıcaklık olarak ayarlayın. Menünün sağ tarafındaki ortalamayı seçin ve Menü penceresinin altındaki hesaplama kaynağı olarak kanal iki'yi seçin. C sütununa çift tıklayın ve seçim ve Active Point'i seçin.
Seçim süresini seçin, pencereyi kapatmak için Tamam'ı tıklatın. D sütununa çift tıklayın ve döngüsel ölçümleri seçin. Olay sayısını seçin, hesaplama kaynağı olarak kanal 1'i seçin, pencereyi kapatmak için Tamam'ı tıklatın.
Bu, verilerin seçili bir bölümünde kalp hızını belirlemek için verilerin doruknoktalarını sayar. E sütununa çift tıklayın ve döngüsel ölçümleri seçin. Menüler penceresinin altındaki hesaplama kaynağı olarak ortalama döngüsel hızı ve kanal bir'i seçin.
Pencereyi kapatmak için Tamam'ı tıklatın ve bu, verilerin seçili bir bölümü üzerinde dakika başına atım olarak kalp hızının son tahminini sağlar. Veri dosyasına geri dön ve çıktının istenen bölümlerini vurgulayın. Komutları seçin ve veri defterine birden çok ekleyin.
Her kutuyu işaretleyerek ve Seç menüsünün altına 30 girerek zamanı seçin ve her 30 saniyede bir veri çekin. Geçerli seçim etıklayın ve Ekle'yi tıklatın. veri defteri ekranına dön ve çıktıyı Excel dosyası olarak kaydetmek için Dosya ve Kaydet'i seçin.
Excel'de veri dosyasını açın. Sıcaklığı santigrat dereceden Kelvin'in tersi nezsine dönüştürün. Kalp hızı doğal günlük alın, sıcaklık bir fonksiyonu olarak kalp hızı çizerek bir Arrhenius komplo oluşturmak.
Bu verileri parça parça bir regresyonla takıl ve kesişme noktasını belirleyin. Bu Arrhenius fren sıcaklığı veya ABT. Bu, güç laboratuarı veri kaydedicisini kullanarak beklenen çıktıya bir örnektir.
Voltaj kırmızı ve arena sıcaklığı mavi gösterilir. Bu veriler, bir sıcaklık rampası boyunca kalp hızının beklenen dağılımını göstermektedir. Son olarak, bu panel deneysel bir hayvan beklenen Arrhenius arsa gösterir.
Parça parça bir gerileme ile uygun, kırmızı yıldız Arrhenius kırılma sıcaklığı olan kavşak vurgular. Bu tekniği kullanırken, kardiyak performansı doğru bir şekilde kaydettiğinizden emin olmak için deneğinizin uygun alkışlama ve iyileşme süreleri ne kadar süreyle izin verdiği önemlidir. Bunu bir denek üzerinde çalıştırmadan önce denemeniz için uygun ısınma oranını belirlemek de önemlidir.
Bu videoda sadece ısıya odaklansak da, bu teknik, test denelerinin okyanus asitleşmesi gibi ek streslere maruz kalması veya sıcaklık rampasından geçirmeden önce oksijen kullanılabilirliğinin azalması ile organizma fizyolojisi üzerindeki çevresel etkileri anlamak için geniş ölçüde uygulanabilir.
