Laringeal transplantasyon modelleri farelerde ve sıçanlarda tanımlanmıştır. Kıdemli alter'in önceki çalışmaları, anastomoz için donör karotis arterleri kullanarak daha etkili bir yöntem geliştirmeye odaklandı ve üstün tiroid arterlerini diseke etme ihtiyacını ortadan kaldırdı. Bu videoda, bu prosedürü farelerde açıkladık.
Bu fare laringeal transplantasyon modeli, immünolojik çalışmaların kolaylıkla ve düşük maliyetle yapılmasını sağlar. Bir sıçan modeline kıyasla damarların daha küçük boyutu nedeniyle teknik olarak daha zor olsa da, cerrahi adımlara aşinalık elde edilirse bu prosedür yaklaşık üç saat içinde gerçekleştirilebilir. Hayvan tamamen anestezi altına alındıktan sonra, fareyi, anestezinin sürdürülmesi için dakikada bir litre oksijen akışına sahip% 1.5 izofluranın% 1.5 izofluran'ın bir yüz maskesi aracılığıyla verileceği tıraş alanına aktarın.
Anestezi derinliğini bir ayak parmağı tutamağı ile onaylayın. Farenin göğsünü ve boynunu çene çizgisine kadar tıraş edin ve epilasyon kremi uygulayın. Ve 30 saniye sonra, kremi silin ve fareyi ameliyat bölgesine aktarın.
Fareyi hareketsiz hale getirin ve ameliyat bölgesini povidon-iyot ve alkolle üç kez hazırlayın, ardından fareyi örtün. Küçük bir yatay insizyonu suprasternal çentikten daha üstün hale getirin. İnce makas kullanarak, cildi bu kesiden mandibulaya kadar iki taraflı olarak yükseltin ve yamuk şekilli bir cilt segmentini çıkarın.
Bilateral tükürük bezlerini, bezden geçen küçük bir damarın görselleştirildiği üst kısımda koter kullanarak tüketin. Bilateral sternokleidomastoid kasları çevre dokulardan diseke edin ve lateral olarak geri çekin. Kayış kasları üzerinde bir orta hat kesisi yapın ve altta yatan tiroid bezine zarar vermemeye dikkat ederek ve laringotrakeal özofagus veya LTE kompleksi üzerinde bırakarak iki taraflı olarak eksize edin.
Bu adımdan sonra bilateral karotis arterler görülebilir. Ortak karotis arterleri klavikula seviyesine inferior olarak ve karotis bifurkasyon seviyesine üstün olarak çevresel olarak diseke edin. Vagus siniri ve internal juguler ven karotis arterlerden arındırılmış olarak diseke edilir ve elde edilen greftte yer almaz.
İç ve dış karotis arterleri ligate ve bölebilecek kadar üstün bir şekilde diseke edin. 10-0 naylon sütür kullanarak, iç karotis arterleri karotis bifurkasyonundan iki ila üç milimetre daha üstün olarak yaslandırın. Dış karotis arterleri, superior tiroid arterin dallanma noktasından en az üç milimetre daha üstün bir şekilde bağlayın ve ortak karotis arterleri sternum seviyesinde bağlayın.
Tüm ligate kapları iki taraflı olarak kesin. Daha fazla diseksiyon sırasında kazara hasar görmesini önlemek için vasküler pedikülleri LTE kompleksinin üstünde tutun. Herhangi bir gaz sızıntısını veya yanlışlıkla anestezi kaybını önlemek için, herhangi bir hava yolu kesiği yapmadan önce hayvanın süresinin dolduğundan emin olun.
Trakeayı beşinci trakea halkasının altına aktarın ve LTE kompleksini aşağı yönde serbest bırakmak için insizyonu yemek borusundan prevertebral fasyaya kadar taşıyın. Trakea ve yemek borusunu altta yatan prevertebral fasyadan inferiordan superior'a doğru serbest bırakın. Hioidden hemen daha düşük bir anterior farenjektomi oluşturun.
LTE kompleksini üstün bir şekilde serbest bırakmak için insizyonu prevertebral fasyaya kadar taşıyın. Kalan lenfoid veya bağ dokusu bağlantılarını LTE kompleksi ve çevresindeki doku arasında bölün. Ve son olarak, grefti çıkarın.
Tedarik edilen grefti steril bir Petri kabına yerleştirin ve herhangi bir kan pıhtısından kurtulmak için normal salin ile yıkayın. Bir milimetre mikro dilatörler kullanarak bilateral karotis arterleri genişletin. 30 gauge künt uçlu bir iğne kullanarak, grefti yıkamak için her karotis artere yaklaşık iki mililitre heparinize salin enjekte edin.
Kan ve salin, kontralateral karotis arterden ve sağlam superior tiroid arterlerini doğrulayan küçük serbest damar uçlarından dışarı akarak görülecektir. Greft heparinize salin içinde bırakılabilir ve alıcıya nakledilmeden önce üç saate kadar kısa bir mola verilebilir. Alıcı fareyi, anestezi indüksiyonu, tıraş ve cerrahi hazırlık adımlarını takiben donör için tarif edilenle aynı şekilde hazırlayın.
Alıcı fareye, ameliyatın başlamasından 30 dakika önce deri altından uzatılmış salınımlı analjezik enjekte edin. Bir neşter kullanarak, çene hattından sternuma üstün olarak uzanan bir orta hat boyun kesisi yapın. Sol taraftaki cildi yükseltin ve yanal olarak geri çekin.
Sol tükürük bezini daha önce tarif edildiği gibi üst damarları koterize ederek tüketin. Düşük sıcaklıktaki koter ile görünür damarları bölerek yağ ve lenfoid dokuyu tüketin. Altta yatan dış juguler venin zarar görmemesine dikkat etmek.
Dış juguler veni çevresel olarak diseke edin. Anastomoz için damarın en az beş milimetre berrak uzunluğunu kullanın. Sternomastoid kası diseke edin ve yanal olarak geri çekin.
Ortak karotis arteri klavikuladan inferior olarak karotis bifurkasyonuna kadar çevresel olarak diseksiyon yapın. Arka plan malzemesini dış juguler venin altına geçirin ve çift yaklaşan B-3 damar kelepçelerini uygulayın. İstenilen monotominin bulunduğu yere dış juguler venin ön duvarından 10-0 naylon bir sütür yerleştirin ve damarı ön niyetle çekmek için sütürü kullanın.
Uygun boyutta tek yarık venotominin oluşturulmasını kolaylaştırmak ve kesimin venöz duvardan tamamen geçmesini sağlamak için mikro makasla dikişin hemen derinliklerinde kesin. 30 gauge künt uçlu bir iğne kullanarak, damarın içini heparinize salin ile yıkayın. Donör LTE kompleksini alıcı sol karotis arter ile sol eksternal juguler ven arasına yerleştirin.
Donör sol karotis arterin serbest ucunu alıcının sol eksternal juguler venine doğru hizalayın ve keskin makas kullanarak ucu eğimlendirin. Dört adet 10-0 naylon kesilmiş sütür kullanarak, donör karotis arteri terk etti ve alıcı uçtan yana bir şekilde dış juguler veni terk etti. Arka plan malzemesini alıcının ortak karotis arterinin altına kaydırın ve çift yaklaşan A-3 damar kelepçelerini uygulayın.
Venotomi ile aynı şekilde bir arteriyotomi oluşturun. Donör sağ karotis arteri alıcı sol karotis artere uçtan uca bir şekilde anastomoz eder. 10-0 naylon ile altı kesilmiş dikiş kullanmak arteriyel anastomoz için idealdir.
Venöz taraftaki kelepçeleri çıkarın. Kanama ile karşılaşılırsa, pamuk uçlarıyla hafif basınç uygulanır. Arter üzerindeki kelepçeleri çıkarın ve hemen pamuk uçlarıyla hafif basınç uygulayın.
Genellikle hafif bir basınçla bir dakika sonra duran adımda bir miktar kanama beklenir. Damardaki arterdeki kan akışının bütünlüğünü kontrol edin. Bozulmamış arteriyel akışla, donör karotis arterin nabzı genellikle görülür ve donör tiroid bezi kızarmış şeffaf renginden orijinal kırmızımsı rengine geri döner.
LTE kompleksi üzerindeki küçük kapların kırmızı renklenmesi de gözlemlenebilir. Cilt kesisini 5-0 monofilament dikişle koşu şeklinde kapatın. Kesi üzerine bir cilt yapıştırıcısı uygulayın.
Ameliyat sırasında sıvı kaybını hesaba katmak için deri altından bir mililitre ılık salin enjekte edin. Anesteziyi durdurun ve fareyi bir kurtarma kafesine aktarın. Hipotermiyi önlemek için fareyi tamamen uyanık olana kadar bir ısıtma yastığı üzerinde gözlemleyin.
Cerrahi başarı, damar kelepçeleri çıkarıldıktan hemen sonra değerlendirilebilir. Şekil A, başarılı bir ameliyatı temsil eder, çünkü kan akışı donör larinksin karotis arterlerinde görselleştirilebilir ve tiroid bezleri kırmızıya döner. Şekil B, başarısız bir ameliyatı temsil etmektedir, çünkü donör larinksin karotis arterlerinde kan akışı görselleştirilemez ve tiroid bezleri soluk kalır.
İmmünsüpresyonun yokluğunda 15 gün sonra, çoğu alıcının nakil için kan akışı yoktur. Arterin açıklığı, çevredeki alıcı dokudan arındırılmış laringotrakeal kompleksin diseksiyonu ve uçtan yana anastomozun görselleştirilmesiyle makroskopik olarak değerlendirilebilir. Teşekkürler. Bu videoyu izledikten sonra, bir laringeal trakeoözofageal kompleksin yaklaşık üç saat içinde bir fareden diğerine heterotopik olarak nasıl nakledileceğini anlamalısınız.
Bu uygulanabilir ve nispeten düşük maliyetli model, bağışıklık sisteminin laringotrakeal kompleksinin reddedilmesindeki rolünü incelemede önemli bir potansiyel sunmakta ve böylece organ transplantasyonunda yeni tedaviler için potansiyel sunmaktadır.
