Yaklaşımımız, gelecekteki fertilite tedavileri için laparoskopik vajinoplasti ve oosit geri kazanımını birleştirerek Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser sendromunun tedavisinde invaziv hastalığı en aza indirmeye izin vermektedir. Yaklaşımımızın temel avantajları, tek bir anestezi gereksinimi ve genç Rokitansky hastalarında transvajinal oosit geri kazanımının imkansızlığının üstesinden gelinmesidir. Prosedür, infertilite ünitemizin kıdemli jinekoloğu Diana Delprato ve yardımlı üreme laboratuvarımızdan iki kıdemli klinik embriyolog olan Alessandra Alteri ve Greta Cermisoni tarafından gösterilecektir.
Ameliyat gününden itibaren 14. günde kontrollü yumurtalık stimülasyonuna başlayın. Seri transabdominal ultrasonografi ve eşlik eden östradiol ve progesteron ölçümleri ile yumurtalık yanıtını izleyin. Açık teknikle pnömoperitoneum oluşturun.
Laparoskopun yerleştirilmesi için bir adet 10 milimetrelik göbek trokarı ve orta, sağ ve sol alt kadranlara üç adet beş milimetrelik trokar yerleştirin. Laparoskopik görme altında, sırasıyla sağ ve sol yumurtalığın delinmesi için merkezi ve sol trokarlardan transvajinal geri alma için yaygın olarak kullanılan bir aspirasyon pompasına bağlı 17 gauge tek lümenli bir iğne kullanın. Foliküllerin maruz kalmasını kolaylaştırmak için yumurtalıkları laparoskopik forseps ile kaldırın ve tutun.
Birbirine yakın olan birden fazla folikülü aspire ederken, yumurtalık korteksinin transfiks sayısını ve doğal kanama riskini azaltmak için iğne ucunu yumurtalıkta tutun. Peritoneal ipliği iki ilkel uterus boynuzu arasında enine kaldırıp keserek ve daha sonra insizyonu yanal, ön ve posteriordan uzatarak periton diseksiyonu. Perineal yaklaşımda vajinal gamzeyi açığa çıkarın ve H şeklinde bir kesi yapın ve vezikorektal boşluğun keskin ve künt diseksiyonu ile neo-vajinal bir boşluk oluşturun.
Daha sonra, disseke edilmiş periton kenar boşluklarını vajinal vestibulumun kenarına doğru çekin. Peritoneal vestibüler anastomoz için polidioksanon sentetik emilebilir 3-0'da pozisyon kesilmiş sütürler. Her hemipelviste polidiokson sentetik emilebilir 2-0 monofilamentte bir kese ipi sütürü, yuvarlak ligament, tubal istmus, utero-over ligament ve lateral periton yaprağının bağ transfiksasyonu ile mesanenin üzerindeki mobilize peritondan başlayın.
Daha sonra, iki sütüre mezorektumun lateral yönünü ve rektal serosa'nın anterior yönünü rektosigmoid bileşkenin hemen altına dahil edin. Son olarak, periton kaplı neovajinaya parafin kaplı bir gazlı bez yerleştirin. Foliküler aspiratları portatif bir inkübatörde sıcak tutulan 10 milimetrelik yuvarlak dipli tüplerde toplayın ve yaklaşık 10 dakikalık bir taşıma süresi ile derhal embriyoloji laboratuvarına taşıyın.
Tüm kümülüs oosit kompleksleri toplandığından, bunları döllenme ortamını içeren dört kuyucuklu kaba yerleştirin ve kapağı ve tabanı hastanın kimliğiyle ilgili verilerle etiketleyin. Bunları% 6 karbondioksit ve% 5 oksijen içeren kontrollü bir atmosferde 37 santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Laboratuvar personelinin ikinci bir üyesi tarafından prosedürün iki kez kontrol edildiğinden emin olun.
Yumurtlama tetikleyicisinden sonraki 38 saat içinde kümülüs korona hücrelerinin çıkarılmasını gerçekleştirin. Kümülüs oosit komplekslerini, kümülüs hücrelerini bir cam Pasteur pipet ile dağıtmak için enzimi içeren merkezi kuyucuğa yerleştirin ve kümülüs oosit komplekslerini içeren çözeltiyi 30 saniyeye kadar yukarı ve aşağı doğru yavaşça pipetleyin. Yumurtaları, sadece HEPES tamponlu ortam içeren ikinci merkezi kuyucuk kabına taşıyın ve minimum miktarda enzimin yerini aldığınızdan emin olun.
İç çapları azalan inkar edici pipetler kullanarak kalan korona hücrelerini çıkarın. Metafaz II oositleri ayırarak oosit olgunlaşma aşamasını değerlendirin. Metafaz II oositlerini, altı milimetre mineral yağ ile kaplanmış dokuz damla sürekli tek kültür ortamı içeren bir IVF kültürü 60 milimetrelik Petri kabına aktarın.
Bunları% 6 karbondioksit ve% 5 oksijen içeren kontrollü bir atmosferde 37 santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Bir soğutma kutusunu en üste kadar taze sıvı azotla doldurun ve dağılmayı ve buharlaşmayı en aza indirmek için kullanılana kadar örtün. Manipülasyon sırasında yumurtalara zarar vermemek için iç çapı 170 mikrometre olan bir striptizci pipet kullanın.
İçeriği kullanmadan önce karıştırmak için her bir denge çözeltisi, vitrifikasyon çözeltisi ve yıkama çözeltisi şişesini yavaşça sallayın. 60 mililitrelik bir Petri kabının kapağını bir damla 50 mikrolitre yıkama çözeltisi ile hazırlayın. Orta buharlaşmayı sınırlamak için kullanımdan hemen önce damlaları yerleştirin.
Oosit kabını inkübatörden alın ve metafaz II oositlerini kültür kabından minimum hacimli bir ortam ile 50 mikrolitre yıkama çözeltisine aktarın. 50 mikrolitrelik damla yıkama çözeltisi iki, denge çözeltisi bir ve denge çözeltisi ikisini yakın mesafede dağıtın ve oositleri damla yıkama çözeltisinden damla yıkama çözeltisi iki'ye aktarın. Denge çözeltisinin damlasını bir yıkama çözeltisi ile iki yıkama çözeltisine birleştirin ve her iki çözeltinin kendiliğinden karıştırılması için iki dakika bekleyin.
Ardından, denge çözeltisinin iki damlasını daha önce birleştirilmiş damlalarla birleştirin ve iki dakika daha bekletin. Son olarak, 100 mikrolitrelik yeni bir denge çözeltisi damlasını daha önce birleştirilmiş damlalarla birleştirin ve bir dakika daha bekletin. Yumurtaları 10 dakika boyunca 100 mikrolitrelik denge çözeltisi dördüne yerleştirin.
İki adet 50 mikrolitrelik vitrifikasyon çözeltisi damlası ve bir adet 100 mikrolitrelik vitrifikasyon çözeltisi dağıtın. Yumurtaları sırayla 60 saniye boyunca üç damla vitrifikasyon çözeltisine taşıyın, böylece oositler yaklaşık 20 saniye boyunca her damlada kalır. 60 saniyelik inkübasyonun bitiminden yaklaşık 10 saniye kala kriyocihazı mikroskop altına yerleştirin.
Yumurtaları pipetin ucunda taşıyın ve minimum miktarda vitrifikasyon çözeltisi ile kriyocihazın üzerine yerleştirin. Aşırı vitrifikasyon çözeltisini aspire edin, yumurtaları ince bir vitrifikasyon çözeltisi tabakası ile örtün. Kriyocihazı doğrudan sıvı azotun içine daldırın ve hızla hareket ettirin.
Cihazı sıvı azotta tutun ve koruyucu bir kapakla örtün. Oosit redüksiyonu ve vajinoplastinin eşlik eden laparoskopik prosedürleri tüm hastalarda başarılı bir şekilde birleştirildi. Ortalama 11.4 5.4 oosit alındı ve 9.6 4.3 M2 oosit kriyo-korundu.
Toplam ortalama ameliyat süresi 114 17 dakika idi. İntraoperatif kan kaybı tüm hastalarda önemsizdi ve intraoperatif advers olay gözlenmedi. Ameliyat sonrası üçüncü günde, hastalar günlük dilatör kullanımına başladılar ve 6.0 1.0 gününde taburcu edildiler.
Yumurtalık içindeki foliküllerin dikkatli bir şekilde aspire edilmesi tavsiye edilir, optimal erişim ve geri alımı sağlamak için yumurtalıkların otomatik mobilizasyonuna gereken dikkat gösterilir.
