Bu protokol, kraniyal pencere delme sonucu vasküler hasarı değerlendirmek için bir yöntem sağlar. Bir cerrahi robot, tekniği öğrenmek için eğitim miktarını azaltırken prosedürler arasında gelişmiş tutarlılıklar sunar. Bu prosedür sırasında, çok zor olabilen kraniyal enjeksiyonları kullandık.
Teknikte yeni olanlar için kapsamlı eğitim öneriyoruz. Başlamak için, sistemi makalede açıklandığı gibi kurun ve cerrahi robot kılavuzunu izleyerek çerçeve kalibrasyonunu gerçekleştirin. Cerrahi yazılıma gidin ve temiz bir projeyle başla'yı seçerek yeni bir proje oluşturun.
Ardından, kullanılacak sondaj koordinat atlasını belirlemek için konuyu en üstte fare olarak ayarlayın. Ardından, yeni proje başlat'ı seçin ve sondaj koordinatı planlama ekranına gitmek için sol alt köşedeki planlamaya tıklayın. Stereotaksik atlasta herhangi bir yere tıklayarak gerçekleştirilecek kraniyal pencere tekniği için delme şemasını oluşturun.
Bregma'yı referans olarak kullanın ve makalede açıklandığı gibi motor korteksin koordinatlarını girin. Seçili koordinatları güncellemek için klavyede Enter tuşuna basın. Bu koordinatları kaydetmek ve uygun bir ad girmek için hedefi sakla'yı tıklayın.
Ardından, ana sondaj ekranına geri dönmek için sol alttaki taşı düğmesine tıklayın. Sondaj koordinatlarını otomatik olarak koruyacağı için bu şablon projesini daha sonraki projeler için yeniden kullanmak üzere araçlara, ardından projeye ve farklı kaydet seçeneğine tıklayın. İlk olarak, anestezi uygulanan fareye deri altı antibiyotik, sefazolin, analjezik, karprofen ve buprenorfin enjeksiyonları uygulayın.
Daha sonra, fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin ve bir burun konisinden soluma yoluyla% 0.5 ila% 2 izofluran ile anestezi sağlayın. Birlikte verilen kulak çubuklarını kullanarak hayvanı cerrahi robot stereotaksik çerçeveye monte edin ve ayak parmağını sıkıştırarak hayati ve anestezik derinliği rutin olarak değerlendirin. Daha sonra sterilizasyon için cerrahi bölgeyi klorheksidin glukonat ve% 70 izopropanol ile ovalayın.
Ameliyat sırasında steriliteyi korumak için farenin üzerine steril bir plastik sargı ve stereotaktik çerçeve yerleştirin. Bir neşter bıçağı kullanarak, kafatasının orta hattında, gözlerin arkasından başlayarak bir inçlik bir kesi yapın, pamuk uçlu aplikatörlerle% 3 hidrojen peroksit kullanarak kafatasını kurutun ve temizleyin. Kuyruğu kolay enjeksiyona hazırlamak için alkolle silin.
Başparmağınızı ve işaret parmağınızı kullanarak, kuyruk damarını kuyruğun kıvrımının üstüne çıkarmak için kuyruğu bükün. Şırıngayı damara paralel olarak yerleştirin ve Evans mavisinin hacmini yavaşça enjekte edin. Enjekte edildikten sonra, Evans mavisinin dolaşmasına izin vermek için beş dakika bekleyin.
Başarılı bir enjeksiyon, farenin ekstremiteleri ve cerrahi penceresi maviye döndüğünde hemen doğrulanır. Kafatası delme için hazırlandıktan sonra, cerrahi yazılıma geri dönün ve aletlere tıklayın. Ardından proje'yi, ardından yeni'yi seçin ve bir şablon projesi seçmek için açılır menüden bir şablon projesi seçin.
Aynı protokol öğelerini seçin. Planlama'ya tıklayın, ardından bu yeni projeye geçmek için detaylandırma parametrelerini seçin ve yeni proje başlat'a tıklayın. Ardından, araçları tıklatarak geçerli hayvanın fare kafatasının eğimini ve ölçeklenmesini hesaba katmak için matkabı ve çerçeveyi düzeltin ve düzeltmeler ekranını açmak için eğme ve ölçeklendirme için doğru öğesini seçin.
Ekranın üst kısmında, açık kırmızı matkap düğmesine tıklayarak matkabın etkin olduğundan emin olun Düzeltme yapıldıktan sonra, ekranın orta alt kısmındaki kapat'a tıklayarak düzeltme penceresinden çıkın ve delme prosedürüne başlamak için aletlere ve ardından matkap'ı seçerek delme ekranına gidin. Ekranın üst kısmındaki kraniyotomi şekli penceresini seçerek ve ardından aşağıdaki açılır menüden sondaj hedefi ayrıntılarını görüntüleyerek sondaj sahasını onaylayın. Manuel darbeli delme işlemini gerçekleştirmek için, matkap menüsündeki otomatik durdurma seçeneğinin yanındaki onay kutusunun işaretini kaldırarak otomatik durdurma özelliğini kapatın, bu da matkabın darbe için ne zaman kapalı olduğunu kontrol etmeyi sağlar.
Matkap menüsünde, matkap derinliği ilerlemesi olarak 100 mikrometreyi seçin. Sondaj sahası menüsünü açın ve ilk sondaj sahasına gidin. Matkabı kafatasına dokunana kadar indirmek için ileri düğmesini veya manuel kontrolleri kullanın ve matkap ucu kafatasına ulaştığında ayarlanan yüzeye basın.
Hazır olduğunuzda, sondaja başlamak için ilerle'ye tıklayın. Matkap 100 mikrometre ilerledikten sonra, matkabı durdurmak için Escape tuşuna iki kez basın. İki saniye sonra, kafatasının derinliği için bu döngüyü tekrarlayın.
Sondaj sırasındaki her tohum ve kenar noktası için, dura'ya ulaşıldıktan sonra matkap menüsündeki düğmeyi kullanarak dura'yı ayarladığınızdan emin olun. Kafatası ve beynin sıcaklıktaki değişikliklerini, ölçümün MATLAB'a okunmasını sağlayan bir veri toplama sistemine bağlı üç farklı delme şemasıyla birlikte bir termokupl kullanarak ölçün. Stereotaksik çerçeveye ve robotik matkap kurulumuna bir kadavra faresi monte edin.
Kraniyal pencerenin kafatasının yan tarafına yapılacağı yerden yaklaşık iki milimetre uzakta manuel olarak küçük bir delik açın, bu da termokuplın kafatası penceresinin delinmesinin gerçekleştiği yerin altındaki konuma kaydırılmasını sağlar. Daha önce gösterildiği gibi üç şemanın her biri için delme işlemine başlayın, sıcaklık değişimi nedeniyle ani artışlara neden olur, bu da matkap kafatasından geçerken beynin yakınında meydana gelen ısınmayı gösterir. Termal hasar potansiyeli, yatay, noktadan noktaya ve darbeli nokta nokta yöntemleri kullanılarak sondaj nedeniyle taban çizgisinden sıcaklıktaki değişimin ölçülmesiyle değerlendirildi.
Hem yatay hem de noktadan noktaya sondaj şemaları, termal değişikliklerde önemli olmayan farklılıklar göstermektedir. Bununla birlikte, noktadan noktaya darbeli bir yönteme geçmek, beynin hem yatay hem de noktadan noktaya delmeden önemli ölçüde daha az ısınmasına neden oldu. Yatay kenar delme 300 saniye sürerken, noktadan noktaya kenar delme 200 saniye sürdü.
Darbe yöntemi, tohum ve kenar delme ile en uzun sürdü ve her biri yaklaşık 500 saniye sürdü. Sondaj şeması ile vasküler hasar arasındaki ilişkiyi izlemek için Evans mavi floresan görüntüleme yapıldı. Yatay ve noktadan noktaya kesim yoluyla yapılan delmenin beyindeki damar yapısına zarar verdiği görüldü.
Kontrol gruplarına kıyasla, noktadan noktaya darbeli yöntem, tohum ve kenar noktasında daha az lokalize hasara sahipti, ancak yine de kafatası penceresinde görünür Evans mavisi varlığına sahipti. Manuel delme yaparken, duranın ihlal edilmediğinden emin olmak için matkabı ilerlettikten sonra kraniyotomiyi kontrol etmek çok önemlidir. Kraniyal pencerelere ek olarak, cerrahi sonuçları iyileştirmek için standart kraniyotomiler için cerrahi bir robot kullanılabilir.
