Zadi-5'in depresyon tedavisindeki terapötik etkinliği davranışsal testlerle belirlenebilirken, ağ farmakolojisi gücünün altında yatan potansiyel mekanizmaları tahmin edebilir. Ağ farmakolojisi, karmaşık etki mekanizmaları sergileyen geleneksel ilaçların araştırılmasını destekleyebilir ve araştırma için gereken zaman ve masrafları daha da en aza indirebilir. Açık alan testi, sükroz tüketim testi ve Morris Su Labirenti gibi testler, nörolojik bozuklukların hayvan modellerinde iştah, motivasyon seviyeleri, öğrenme yeteneği ve hafızayı değerlendirmek için altın standarttır.
Bu testler basit, objektif ve değerlendirme için makul yöntemlerdir. Bir depresif bozukluk çalışmasında yeni ilacın patolojik mekanizmalarını ve etkilerini anlamak için bir hayvan modeli oluşturmak çok önemlidir. İyi bir depresyon modeli oluşturmak için, araştırmacılar uyaran yoğunluklarını uygun şekilde sıralamalı ve ayarlamalıdır.
Başlamak için, seçilen depresyon uyaranlarını, izolasyonla birlikte, kontroller hariç tüm sıçanlara 28 gün boyunca uygulayın ve sıçanları ayrı kafeslerde yükseltin. Açık alan testini gerçekleştirmek için, bir kara kutuyu eşit alana sahip dokuz kare bölgeye bölün. Kutuyu bir video izleme analiz sistemi ile donatın.
Son gavajdan bir gün sonra, fareyi orta kareye yerleştirin ve yatay ve dikey aktivitelerini üç dakika boyunca kaydedin. Ardından, yatay bir aktivite olarak tüm duraklamalarla geçilen karelerin sayısını puanlayın ve dikey bir aktivite olarak ayakta durma ve tımarlamayı puanlayın. Her testten sonra, sonraki testler için sıçan kokusunu gidermek için kutuyu% 75 alkolle temizleyin.
Ardından, tüketimden önce ve sonra ilgili şişeleri tartarak sakaroz tüketim testini gerçekleştirin. Ve bu denklemi kullanarak sıfır, yedi, 14, 21 ve 28. günlerde 60 dakikalık sükroz tercih oranlarını hesaplayın. Morris Su Labirenti Testini gerçekleştirmek için havuzu dört çeyreğe bölün.
Kadranları birden dörde kadar sıralayın ve gizli platformu su yüzeyinin bir santimetre altına üçüncü çeyreğe yerleştirin. Bir miktar opaklık için havuza süt ekleyin. Ardından, platformu 120 saniye boyunca aramak için sıçan deneğini farklı kadranlardaki labirente yerleştirin.
Ve Morris Water Maze video izi analiz sistemini kullanarak gecikme süresini kaydedin. Sıçan deneğini havuzda sabit bir konuma yerleştirin. Konu gizli platformu 120 saniye içinde bulamazsa, gecikmeyi 120 saniye olarak kaydedin.
Ardından, platformu yerinden çıkarın, fareyi suya yerleştirin ve 120 saniye boyunca bölge geçişlerinin sayısını kaydedin. Geleneksel Çin tıbbı sisteminin farmakoloji web sayfasına göz atın ve kimyasalların adlarını almak için bitki adı bölümüne myristicae semen tohumları, al-glandia-radiks kökleri ve piperis longi fructus girin. Oral biyoyararlanımın farmakokinetik indeksini veya OB'yi% 30'dan büyük olacak ve ilaç benzeri indeksi 0.18'den büyük olacak şekilde ayarlayın.
Her bir bileşenin kimyasal adlarını belirlemek için Çin tıbbı farmakopesindeki aktif bileşenleri arayın. Ardından, izomerik gülümsemeleri veya ink'i bulmak için Pub Chem'de tanımlanan kimyasal isimleri arayın. İzomerik gülümsemeler veya mürekkep ile SEA, Batman ve İsviçre hedef tahminini kullanarak aktif bileşenlerin hedef proteinlerini belirleyin ve örtüşen proteinleri bulun.
Verileri bir Excel dosyasına kopyalayın. Ardından, GeneCards, DisGeNET ve DrugBank'ta depresyon ve depresif bozukluk anahtar kelimelerini kullanarak depresyon için potansiyel protein hedeflerini arayın ve belirleyin. Verileri bir Excel dosyasına kopyalayın.
Venn şemasına göz atın ve depresyon hedeflerini birinci listeye yükleyin. Ardından, Zadi-5'in aktif bileşenleri için hedefleri ikinci listeye yükleyin ve gönderin. Venn şemasını edinin ve çakışan hedef adayları filtreleyin.
Ağ adı verilen bir elektronik tablo oluşturun. Ayrıca type adlı bir elektronik tablo oluşturun. Ağı, Zadi-5 otları bileşenleri hastalık hedeflerini oluşturmak için sayfayı Cytoscape'e aktarın.
Etkileşimlerini analiz etmek için dize veritabanındaki ortak hedefleri ayarlayın. Protein türünü homosapiens olarak ayarlayın. Yalnızca deneysel olarak doğrulanmış türleri seçmek için etkileşim eşiği değerini 0,9 olarak ayarlayın ve yalnız ada düğümlerini görüntülemeyin.
DAVID aracını açın ve ilgili sinyal yollarını incelemek için Zadi-5'in 86 potansiyel antidepresan hedefini başlangıç analizi braketine yapıştırın. Fıçı yolu belgesini indirin. Zenginleştirme analizinden PI3k-AKT yolundaki genleri seçin ve bir tür ve ağ belgesi oluşturmak için bunları elektronik tabloya yapıştırın.
PI3K-AKT görselleştirilmiş bileşik hedef yolları ağını oluşturmak için ağ belgesinin türünü Cytoscape'e aktarın. Test edilen hayvan grubu, kronik, öngörülemeyen hafif stres veya CUMS stimülasyonundan önce önemli bir fark göstermedi. CUMS modeli oluşturulduktan sonra grubun dikey ve yatay puanları kontrole göre daha düşüktü.
Model grubu ile karşılaştırıldığında, pozitif kontrol ve Zadi-5 gruplarının dikey ve yatay puanları anlamlı olarak daha yüksekti. Sıfırıncı günde, test edilen grupların sakaroz tüketiminde anlamlı bir fark yoktu. Zadi-5 ve pozitif kontrol grupları, 28. günde model grubundan daha yüksekti.
Morris Su Labirenti'nde, model grubunun platformu bulma gecikmesi, kontrolle karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha yüksekti. Pozitif kontrol ve Zadi-5 gruplarının latansı model grubuna göre daha düşüktü. Bölge geçiş sayıları ile ilgili olarak, model grubu kontrolden daha az geçiş gösterdi.
Pozitif kontrol ve Zadi-5 grupları, model gruba göre daha fazla geçiş gösterdi. Venn şeması analizi, depresyonla ilişkili 1000 protein hedefinden Zadi-5'in kritik depresyonla ilgili hedefleri olarak örtüşen 86 hedefi ortaya çıkardı. Bu bulgulara dayanarak, Zadi-5 bitki bileşenleri hastalık hedefleri ve hedef adaylarının protein-protein etkileşim ağı analizi oluşturulmuştur.
KEG yolu analizine göre, PI3K-AKT sinyal yolu yedinci sırada yer aldı. Birçok sinyal yolu ile ilişkilendirildi. Buna göre, PI3K-AKT yolağının diğer zenginleştirme yolaklarından nispeten daha önemli olduğu düşünülmüştür.
Bu prosedürü denerken, aynı tür uyaranları art arda günlerce tekrarlamaktan kaçınmak çok önemlidir. Zadi-5'in bileşenlerinin çevrimiçi veri tabanlarında analiz edilmesinin ardından, doğrulama kalitesi sıvı kromatografisi, kütle spektrometresi ve nükleer manyetik rezonans spektroskopisi ile sigortalanabilir.
