Bu çalışmada, hibe NIHM, R01 MH091816 ve R21 MH084043 TDG için tarafından desteklenen olmuştur.

1. Gereç ve Yöntem 1.1. Su tankları Bu malzeme, cam daha iyi tankları ve kazaların sık sık hareket dayanabilmesi olarak silindirik tanklar (30 cm yükseklik x 20 cm çapında), şeffaf pleksiglas inşa bizim laboratuvarda fare zorla yüzmeye testi (FST) için gerekli. Su seviyesi 15 cm alttan ve su hacmini fareler tutarlı olmasını sağlamak için tank üzerinde işaretlenmiş olmalıdır. Tank sayısı ideal ilk seti kullanımda iken, ikinci bir su deposu seti doldurulur, böylece bir seferde test edilen farelerin sayısı olarak en az iki kat daha fazla olmalıdır. Tankların boyutları farelerin yüzme testi sırasında, kendi ayakları ve kuyrukları ile ya tankın alt dokunmak mümkün olmayacak bir şekilde seçilmesi gerekir. Tankın yüksekliği tank kaçan fareler önlemek için yeterince yüksek olmalıdır. Lütfen dikkattank çapı ve su derinliği, farelerin davranışlarını değiştirmek için (1-3, bu konuların detaylı bir analiz için bakınız) ayarlanabilir önemli parametrelerdir . 1.2. Termometre Yılından bu yana infrared termometre suya dayanıklı, hızlı sıcaklık ölçümü testi için gerekli süreyi azaltır tercih edilir. Ancak, cam bir cıvalı termometre de bu görev için yeterli olacaktır. 1.3. Timer 1.4. Video kayıt cihazı Biz, bir tripod tarafından desteklenen bir video kamera kullanın. Bu test, genellikle aynı anda test ediliyor birden fazla hayvanlar içerdiğinden, canlı skor çok zor olabilir ve tavsiye edilmez. Video kamera, davranış puanlama için daha sonra kullanılacak olan kaliteli bir resmi işlemek için yeterince yüksek çözünürlükte kayıt altına almalıdır. Her zaman yeterli kayıt bellek startin önce kamera olduğundan emin olung test edin. Biz videoları dijital aktarım için izin veren, mekanik medya kullanımı (yani video kaset) olmadan dijital olarak kaydeden bir video kamera kullanın. Tanklar, tepegöz floresan aydınlatma ile laboratuvar ortamlarında meydana gelebilecek aşırı yansımaları varsa, fotoğraf makinesi ile bir polarize lens filtresi kullanmak isteyebilirsiniz. 1.5. Bölücüler Bizim laboratuvarda iki takım (35 cm yükseklik x 22 cm genişlik x 22 cm derinlik) bölücüler var. Bu üç duvarları dikdörtgen ve hem de arka plan olarak ve tanklar arasında bölücüler gibi, test sırasında birbirlerini görmeye ve potansiyel davranışlarını değiştirerek fareler önlemek için kullanılır. Bir set, albino ve açık renkli hayvanlar için siyah olabilir; diğer seti, yüksek kontrast vermek amacıyla koyu renkli hayvanlar için renkli bir ışık olabilir. Deneyci kamera görüntüleri değiştirmek ya da büyük d kılmak, böylece bölücüler yüzeyleri aşırı yansıtıcı olmadığını emin olmalısınızaydınlatma düzeyleri arasındaki ifferences. 1.6. Beyaz gürültü jeneratör Bu, ani yüksek sesler potansiyel hayvanları korkutmak olacağını duyulabilir hangi laboratuar ortamlarında ihtiyaç vardır. Gürültü jeneratör gibi aralıklı rahatsız edici sesler maskeleyebilir. Beyaz gürültü jeneratör ses seviyesi diğer ortam ve beklenmedik sesler üzerinde seçili olmalıdır. Bizim deney odasında ortam gürültü seviyesi 60 dB (aktive beyaz gürültü jeneratör olmadan). Tankların yerleştirildiği yerde aktive beyaz gürültü jeneratör ile toplam gürültü düzeyi 70-72 dB. Ancak bu rakamlar sadece örnek olarak verilmiştir olduğunu kaydetti olmalı ve her laboratuar kendi benzersiz bir ortam ve şartlara göre doğru gürültü seviyesini seçmelisiniz. 1.7. Kurutma kağıdı ve ısı lambası , Evlerine kafeslerde hayvanlar dönmeden önce, kuruması için önemlidir.onları hafifçe kağıt havlu kullanarak ve (pozlama sıcaklığı 32 aşmadığı belli ° C), hipotermi önlemek için bir ısı lambası kullanmak yararlı olur. 2. Davranış Usulleri <ol><li> Genel deneysel tasarım denemenize özgü değişkenler arasında uygun dengeleyebilmek yansıtmalıdır. Örneğin, deneylerde her grubun, her FST oturumu (yani, dört tedavi grubu varsa, her oturumda temsil edilecektir) eşit temsil etmek için çalışıyoruz. Ayrıca, fare döndürülebilir, her tedavi grubu, farelerin Her oturumda farklı bir tank yerleştirilir. </li><li> Kamera ve bölücüler pozisyonda yerleştirin. Kamera farelerin mümkün olan en yüksek çözünürlük elde etmek için mümkün olduğunca yakın olmalıdır. </li><li> Tanklar, tank duvarları işaretlenir belirlenen oda sıcaklığında (23-25 ​​° C) musluk suyu ile dolu olmalıdır. Tesisi sürekli sıcak / soğuk wa yoksater, doğru sıcaklık hızla su getirmek için, sıcak su ve / veya buz hazırlamak isteyebilirsiniz. Infrared termometre ile su sıcaklığını kontrol edin. Sıcak su seviyesi için tek ve soğuk su eklenmesi için ikinci bir işareti - Alternatif olarak, sıcak ve soğuk su sıcaklıkları tesiste sabit olup olmadığını, tank iki işaretleri çizebilirsiniz doğru final yakın hızla su sıcaklığı. </li><li> Kullanılan fareler, test odası tanıtıldı önce, beyaz gürültü jeneratörü çalıştırmak. Beyaz gürültü seviyesi sadece dış gürültüleri maskelemek için yeterli olacaktır. Yüksek ses kaçının ve beyaz gürültü ile aynı düzeyde, tüm hayvanlar için kullanılacak olan emin olun. </li><li> Hayvanların test odasına getirin. Hayvanların bulunduğu koloni oda ve test odasına bitişik olan veya birbirine çok yakın ise, ortam koşullarına benzer ve kafesin hareket sırasında rahatsızlık aklimasyonundan peri sonra, minimalod gerekli olacaktır. Aksi takdirde, aklimasyonundan bir süre (genellikle en az bir saat) için test odası, hayvanları yerleştirin. Aklimasyonundan süre gerekiyorsa, acclimated hayvanların aynı odada aynı anda test edilen fareler tarafından etkilenen olmayacaktır emin olun. Koku alma ve ultrasonik ipuçları aynı odada bulunan diğer hayvanlar tarafından hissedilen farkında olun. </li><li> Hayvanların su tankları içine yerleştirmeden önce video kaydetmeye başlayın. </li><li> Hayvanın kuyruğunu tutun ve su ve yavaşça yerleştirin. Fareler su sonra, kuyruk yavaş yavaş bırakın. Tipik olarak, bu yordamı kullanarak su altında kalmış olan hayvan kafası önleyecektir. </li><li> Kayıt engel minimize edileceği bir düzen içinde tanklarda fareler yerleştirin. Bu düzen, elbette, gruplar ve deneysel tasarım özgü diğer gereksinimleri counterbalancing ile birlikte karar verilmesi gerekir. </li><li>Tüm fareler kronometre tankları geri sayım başlatmak. Fareler için normal test uzunluğu altı dakika FST. </li><li> Test sırasında hayvanlar makul bir mesafe vardır ve hayvanlar tarafından fark edilebilir herhangi bir hareket veya gürültü yapmazlar. Fareler kolayca ya, fareler ya da yüzme davranışları üzerindeki etkilerini önceki bilginiz olmadan test edilen yeni bir bileşik yeni bir gerginlik, deneyci hayvanları daha yakından izlemek gerekir, ancak, suda yüzebilen. Sıçanlara aksine, fareler genellikle ancak dalış durumunda fare tank kaldırılması gerektiğini, FST sırasında dalış yok. Deneyi fareler davranış yüzme ve yüzen bir fare korumak ve gerekirse test durdurmak için olay video izlenmelidir odayı terk eder. </li><li> Altı dakikalık bir test süresi sonunda kayıt durdurun. Bizim laboratuvarda, en sonunda hayvanların tanımlayan kamera önünde bir notuHer bir kayıt. Kimliği sadece kayıt en sonunda gösterilir beri bu yaklaşımı kullanarak kayıt daha sonra puanlama hayvanların bireysel kimlik bilemezsiniz. Bu, daha sonra kayıtları ile ilgili oluşabilecek sorunları tutan herhangi bir kimlik ve kayıt engeller. Kullanılmakta olan kayıt tutma stratejisi ne olursa olsun, açıkça hayvanların tespit etmeli ve aynı zamanda daha sonra grup atamaları bilgiye sahip test puanlama bireysel önlemek. </li><li> Koyun ve yavaşça kendi homecage geri bir kurutma kağıdı ve yer ile kurulayın aynı sırayla onların kuyrukları tarafından hayvanların sudan çıkarın. </li></ol> 3. Davranış Analizi <ol><li> FST fare sürümü, genellikle uzun, altı dakika başından sonuna kadar. Ancak, genellikle test sadece son dört dakikada bir analiz edilmektedir. Bu farelerin en FST başında çok aktif olduğu gerçeğini nedeniyle, ve ptedavinin otential etkileri, ilk iki dakika içinde gizlenmiş olabilir. </li><li> Laboratuarımızda, video dosyalarını doğrudan kameradan bir bilgisayara yükleyebilir ve PC üzerinde analiz yapmak. </li><li> Davranış analizi sırasında, her fareler cep harcadığı zaman ölçülür. Hareketliliği süresi toplam tutarı test süresi 240 saniye sonra çıkarılır ve daha sonra hareketsizlik süresi olarak belirtilmiştir. Doğrudan hareketsizlik zamanı ölçmek için mümkün olsa da, laboratuvarda daha kolay yerine bu tür hareketlerin olmaması çok aktif hareketleri algılamak ve ölçmek için bulduk. </li><li> FST davranış analizi ve gözlemciler arasında değişkenlik genellikle en büyük kaynak, iyi niyetli hareketlilik olarak sayılır hareketlerin en önemli özelliği doğru tanımlanmasıdır . FST hareketlilik için operasyonel tanımı dışında herhangi bir vücut dengesini ve 4 su üstünde kafa tutmak için gerekli hareketleri. Fare genellikle kolay, ancak onlar hala vücutlarında denge ve başlarını suyun üstünde tutmak için küçük hareketleri tezahür su içinde yüzer. Bu davranışlar, kaçmak için ve hareketlilik olarak atılır bir girişim değildir. Ayrıca, tek bir hareketlilik nöbetinden sonra, aslında hareketsiz olsa bile, fare hala momentum bir sonucu olarak su kayması yapabilirsiniz. Bu hareketler aynı zamanda hareketlilik olarak atılır. </li><li> Laboratuarımızda, zaman ölçümleri için ekrandaki kronometre yazılımı (XNote Kronometre, dnSoft Araştırma Grubu) kullanabilirsiniz. İki ayrı stopwatches ekranda kullanılır. Davranışsal analiz dönemi ne zaman sona erer ilk kronometre 240 saniye ve uyarılar gözlemci sayar. Ikinci kronometre zaman mobil geçirdi ölçer. Bazı kronometre yazılımı ekrandaki stopwatches klavye ile kontrol edilebilir, böylece işlevleri başlatmak ve durdurmak için tuşlar atamak yeteneğine sahiptir. Bizim laboratuvarda, normal bir klavye yerine, yaygın olarak bilinen bir giriş aygıtı kullanmakstopwatches kontrol etmek için bir &#39;gamepad&#39;. </li><li> Test edilmiş ve ekranda birden fazla fare varsa, hareketsizlik ölçmek için bir bilgisayar kullanırken, böylece diğer hayvanlar (başka bir program penceresini kullanmak ya da fiziksel olarak kağıt ekran kapağı) karşılamak için iyi bir fikirdir onların hareketleri, gözlemcinin dikkatini dağıtmaz. </li><li> Eğer bir ekran kronometre kullanılan, ama kronometre milisaniye ondalık kapsayacak şekilde kesin. Bunun nedeni, gözlemci yeteneği izlemek çalıştıran veya çalışır durumda değilse belirlemek için hala izin verirken, önyargı önlemek için. Gözlemci, hayvanların grubu atamaları kör, farelerin hareketlilik düzeyi hakkında genel bir fikir olacağından, o bu özel fare için geçen hareketliliği süresi toplam miktarını görmek için izin verilip verilmediğini ortaya çıkan bazı önyargı olabilir analiz oturumun tamamlanmasından önce. Kronometre kapsayan, o sadece kronometre, herhangi bir noktada açık veya kapalı olduğunu ancak wil olmadığını bilecekl toplam süre geçen ve bu nedenle herhangi bir önyargı etkilenmez olamaz bilmiyorum. </li><li> Bir gözlemciler arası güvenilirlik testi, test hayvanlardan elde edilen verileri toplamak için başlamadan önce her yeni gözlemci için yapılmalıdır. Laboratuvarımızda, her yeni gözlemci ilk deneyimli bir gözlemci puanlama izler. Hareketsizlik hareketliliği ayırt etmek için yeni bir gözlemci kazanımlar güven sonra, daha sonra deneyimli bir gözlemci izliyor ve herhangi bir hata işaret skoru. Bu aşamada başarılı bir şekilde tamamlandıktan sonra, yeni gözlemci, eğitim amaçlı laboratuvarımızda devam FST videolar belirli bir analiz edecektir. Gözlemciler arası korelasyon yüksek düzeyde deneyimli gözlemci ile elde edilir sonra gerçek deneyler FST videos analiz eden bir araştırmacı başlangıç. Biz bu eğitim analizleri verileri gelecekte kullanmak için laboratuvara için bir iç standart teşkil arşiv. Biz onlar mobi ifade edildiği biçimde suşları arasındaki farklılıklar gözlemlediklity (ve hareket) davranışları, ve cinsiyetler arasındaki ortalama hareketsizlik süresi. Zorlanma, cinsiyet, ya da genetik olarak değiştirilmiş yeni bir fare modeli laboratuvarda test edildiğinde tekrar bu tür güvenirlik analizi gerçekleştirilmesi için gerekli. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar Bazal hareketsizlik ve belirli bir ilaca 5-11 yanıt açısından, genetik olarak farklı kendilenmiş ve outbred fare suşları arasında belirgin farklılıklar vardır . Örneğin, bir fare suşlarının paneli (Şekil 1) 5 lityum diferansiyel antidepresan gibi tepkileri belirledi. Bu deneyde deneysel ayrıntıları Can ve ark, 2011 5 yayınlanmaktadır. <img src="/files/ftp_upload/3638/3638fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. zorunlu yüzme testinde Hareketsizlik süresi (saniye) çeşitli kendilenmiş ve ou, tuzlu su, 200, 300, veya 400 mg / kg tek bir IP enjeksiyon, beş saat sonratbred fare suşlarının. *: P &lt;0.05, **: p &lt;0.01, ***: p &lt;0.001 tuzlu grup, Dunnett Kullanıcı post hoc testi ile karşılaştırıldığında önemli bir fark göstermektedir. Veriler ortalama ± SEM olarak ifade edilir. Her bir suş için grup başına düşen hayvan sayısı, 6-8 (5 çoğaltılamaz Şekil ). Tüm fare suşlarının FST için uygundur. Bu nedenle, İsviçre, NIH İsviçre, ve FVB / NJ gibi bazı suşları, bir zemin etkisi (Şekil 1) 5 temsil kontrol koşulları altında, çok az veya hemen hemen hiç hareketsizlik göstermektedir. Bazal hareketsizlik eksikliği etkili bir anti-depresan etkisi deneysel manipülasyon tespit önler. Dalgalanmaya rağmen bazı fare suşları aberrantly davranmaya ve test sırasında tankın içine dalış olabilir, çok nadir ise de mümkündür. Böyle bir suş (laboratuvarımızda yayınlanmamış gözlem) DBA/1OlaHsd. Bu suşlar FST için uygun değildir. Bu nedenle dalış risk, ancak small FST ya da bir roman genetik manipülasyon barındıran bir fare daha önce test edilmemiş yeni bir gerginlik test ederken, çok dikkatli bir şekilde, potansiyel olarak zararlı davranışları meşgul fareler kurtarmak için ilk çalışmaları gözlemlemek için zorunludur. Deneysel tasarım birden fazla hayvan (beş) aynı anda test edilir, burada açıklanan. Kullanan bölücüler farelerde test esnasında birbirlerini görmesini engellemek ve beyaz gürültü jeneratörü sesli seslenmelere bastırır iken, set-up iletilen tüm ultrasonik veya koku alma ipuçları önlemek değildir. Olası test doğaya verilen rağmen, bu farelerin davranışlarını etkileyebilir. Bu sorunun bir çözümü hayvanların ayrı ayrı test etmek olacaktır. Ancak, bu yaklaşım, kendi sorunları var. Örneğin, yaygın olarak, her oturumun test hayvanlar aynı homecage geliyor. Bu deneysel değişkenlerin randomizasyon ve dengelemek sağlar. Test fareler bireyselly bir fare homecage bir zamanda kaldırma anlamına gelecektir. Bu geride kalan diğerleri arasında kafes tekrarlanan stres ve sosyal hiyerarşinin rahatsız neden olacaktır. Test ile diğer bir konu tek başına, zaman kısıtlamaları vardır. Bir seferde tek bir fare Test deney fareler sirkadiyen döngüsünün farklı zamanlarda test edildiği bir durum sonucunda birçok saat uzatacaktır. Bu gün etkileri karıştırıcı zaman yaratabilir. Deney tasarlama, araştırmacılar, bu konuları göz önünde tutmalıdır.

<ol>
	<li>Hasco&#233;t, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In Mood and Anxiety Related Phenotypes in Mice. 42, 85-118 (2009).</li><li>Sunal, R., G&#252;m&#252;&#231;el, a. B., Kayaalp, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+changes+in+swimming+area+on+results+of+"behavioral+despair+test".">Effect of changes in swimming area on results of "behavioral despair test".</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 49, 891-896 (1994).</li><li>Petit-Demouliere, B., Chenu, F., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Forced+swimming+test+in+mice:+a+review+of+antidepressant+activity.">Forced swimming test in mice: a review of antidepressant activity.</a> Psychopharmacology. (Berl). 177, 245-255 (2005).</li><li>Cryan, J. F., Markou, A., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+antidepressant+activity+in+rodents:+recent+developments+and+future+needs.">Assessing antidepressant activity in rodents: recent developments and future needs.</a> Trends in Pharmacological Sciences. 23, 238-245 (2002).</li><li>Can, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+responses+to+lithium+in+genetically+diverse+mouse+strains.">Antidepressant-like responses to lithium in genetically diverse mouse strains.</a> Genes, Brain and Behavior. 10, 434-443 (2011).</li><li>Lucki, I., Dalvi, A., Mayorga, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensitivity+to+the+effects+of+pharmacologically+selective+antidepressants+in+different+strains+of+mice.">Sensitivity to the effects of pharmacologically selective antidepressants in different strains of mice.</a> Psychopharmacology. (Berl). 155, 315-322 (2001).</li><li>David, D. J., Renard, C. E., Jolliet, P., Hascoet, M., Bourin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant-like+effects+in+various+mice+strains+in+the+forced+swimming+test.">Antidepressant-like effects in various mice strains in the forced swimming test.</a> Psychopharmacology (Berl). 166, 373-382 (2003).</li><li>Bai, F., Li, X., Clay, M., Lindstrom, T., Skolnick, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-+and+interstrain+differences+in+models+of+"behavioral+despair".">Intra- and interstrain differences in models of "behavioral despair".</a> Pharmacol. Biochem. Behav. 70, 187-192 (2001).</li><li>Guzzetti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+differences+in+paroxetine-induced+reduction+of+immobility+time+in+the+forced+swimming+test+in+mice:+Role+of+serotonin.">Strain differences in paroxetine-induced reduction of immobility time in the forced swimming test in mice: Role of serotonin.</a> European Journal of Pharmacology. 594, 117-124 (2008).</li><li>Cervo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genotype-dependent+activity+of+tryptophan+hydroxylase-2+determines+the+response+to+citalopram+in+a+mouse+model+of+depression.">Genotype-dependent activity of tryptophan hydroxylase-2 determines the response to citalopram in a mouse model of depression.</a> J. Neurosci. 25, 8165-8172 (2005).</li><li>Jiao, J., Nitzke, A., Doukas, D., Seiglie, M., Dulawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antidepressant+response+to+chronic+citalopram+treatment+in+eight+inbred+mouse+strains.">Antidepressant response to chronic citalopram treatment in eight inbred mouse strains.</a> Psychopharmacology. 213, 509-520 (2011).</li><li>Porsolt, R. D., Pichon, M. L. e., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depression:+a+new+animal+model+sensitive+to+antidepressant+treatments.">Depression: a new animal model sensitive to antidepressant treatments.</a> Nature. 266, 730-732 (1977).</li><li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+despair+in+mice:+a+primary+screening+test+for+antidepressants.">Behavioral despair in mice: a primary screening test for antidepressants.</a> Arch. Int. Pharmacodyn. Ther. 229, 327-336 (1977).</li><li>Porsolt, R. D., Bertin, A., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Behavioural+despair"+in+rats+and+mice:+strain+differences+and+the+effects+of+imipramine.">"Behavioural despair" in rats and mice: strain differences and the effects of imipramine.</a> Eur. J. Pharmacol. 51, 291-294 (1978).</li><li>Mineur, Y. S., Belzung, C., Crusio, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unpredictable+chronic+mild+stress+on+anxiety+and+depression-like+behavior+in+mice.">Effects of unpredictable chronic mild stress on anxiety and depression-like behavior in mice.</a> Behav. Brain. Res. 175, 43-50 (2006).</li><li>Millstein, R. A., Holmes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+repeated+maternal+separation+on+anxiety-+and+depression-related+phenotypes+in+different+mouse+strains.">Effects of repeated maternal separation on anxiety- and depression-related phenotypes in different mouse strains.</a> Neuroscience &#38; Biobehavioral Reviews. 31, 3-17 (2007).</li><li>Cryan, J. F., Valentino, R. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+substrates+underlying+the+behavioral+effects+of+antidepressants+using+the+modified+rat+forced+swimming+test.">Assessing substrates underlying the behavioral effects of antidepressants using the modified rat forced swimming test.</a> Neuroscience &#38; Biobehavioral Reviews. 29, 547-569 (2005).</li><li>Crowley, J. J., Jones, O. '. L. e. a. r. y., F, O., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+tests+for+measuring+the+effects+of+antidepressants+in+mice.">Automated tests for measuring the effects of antidepressants in mice.</a> Pharmacology Biochemistry and Behavior. 78, 269-274 (2004).</li><li>Kurtuncu, M., Luka, L. J., Dimitrijevic, N., Uz, T., Manev, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reliability+assessment+of+an+automated+forced+swim+test+device+using+two+mouse+strains.">Reliability assessment of an automated forced swim test device using two mouse strains.</a> Journal of Neuroscience Methods. 149, 26-30 (2005).</li><li>Hayashi, E., Shimamura, M., Kuratani, K., Kinoshita, M., Hara, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automated+experimental+system+capturing+three+behavioral+components+during+murine+forced+swim+test.">Automated experimental system capturing three behavioral components during murine forced swim test.</a> Life Sciences. 88, 411-417 (2011).</li><li>Cryan, J., Page, M., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+behavioral+effects+of+the+antidepressants+reboxetine,+fluoxetine,+and+moclobemide+in+a+modified+forced+swim+test+following+chronic+treatment.">Differential behavioral effects of the antidepressants reboxetine, fluoxetine, and moclobemide in a modified forced swim test following chronic treatment.</a> Psychopharmacology. 182, 335-344 (2005).</li><li>Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beta-catenin+overexpression+in+the+mouse+brain+phenocopies+lithium-sensitive+behaviors.">Beta-catenin overexpression in the mouse brain phenocopies lithium-sensitive behaviors.</a> Neuropsychopharmacology. 32, 2173-2183 (2007).</li><li>Can, A., Grahame, N. J., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affect-related+related+behaviors+in+mice+selectively+bred+for+high+and+low+voluntary+alcohol+consumption.">Affect-related related behaviors in mice selectively bred for high and low voluntary alcohol consumption.</a> Behav. Genet. , (2011).</li><li>McKinney, W. T., Bunney, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Model+of+Depression:+I+Review+of+Evidence:+Implications+for+Research..">Animal Model of Depression: I Review of Evidence: Implications for Research..</a> Arch. Gen. Psychiatry. 21, 240-248 (1969).</li><li>Willner, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+validity+of+animal+models+of+depression.">The validity of animal models of depression.</a> Psychopharmacology.(Berl). 83, 1-16 (1984).</li><li>Detke, M. J., Lucki, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+serotonergic+and+noradrenergic+antidepressants+in+the+rat+forced+swimming+test:+the+effects+of+water+depth.">Detection of serotonergic and noradrenergic antidepressants in the rat forced swimming test: the effects of water depth.</a> Behav. Brain Res. 73, 43-46 (1995).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E., Gould, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> In Mood and Anxiety Related Phenotypes in mice: characterization using behavioral tests. 42, (2009).</li><li>Bourin, M., Fiocco, A. J., Clenet, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+valuable+are+animal+models+in+defining+antidepressant+activity.">How valuable are animal models in defining antidepressant activity.</a> Human Psychopharmacology: Clinical and Experimental. 16, 9-21 (2001).</li></ol>

Yazarlar Çıkar çatışması beyan ederim.

FST (bazen Porsolt yüzmeye testi denilen), sıçanlar için ilk geliştirilen ve fareler için Porsolt ve meslektaşları 12,13 tarafından güncellenmiştir . Laboratuvarımızda başarılı yukarıda açıklanan protokole ek olarak, büyük ölçüde ince test değişiklikler bir dizi (tam bir incelemesi 1 için bkz. Hascoët ve BouriN) yayınlanmıştır . Anti-depresan ilaçlar ve etkileri temel ve preklinik araştırma 3,14-16 çeşitli davranışsal ve nörobiyolojik manipülasyon...

<ul><li> Su tankları </li><li> Termometre </li><li> Timer </li><li> Video Kamera </li><li> White Noise Jeneratör (isteğe bağlı) </li><li> Kağıt Kurutma </li></ul>

the mouse forced swim test

Zorla yüzmeye testi, antidepresan ilaçlar, antidepresan etkinliği, yeni bileşiklerin ve devletler gibi depresif kılan veya önlemeyi amaçlayan deneysel manipülasyonlar değerlendirilmesi için kullanılan bir kemirgen davranış testi. Fare kaçınılmaz şeffaf bir tank içinde su ile doldurulur ve bir kaçış ilgili hareketlilik davranışı ölçülür yerleştirilir. Zorla yüzmeye testi güvenilir bir biçimde yürütmek için basit ve minimal özel ekipman gerektirir. Zorunlu yüzme testinin başarılı bir şekilde uygulanması, haksız stres farelere belirli usul detayları ve minimizasyonu bağlılık gerektirir. Protokol tanımı ve eşlik eden video, biz bunları önlemek için, sonuçların yorumlanması ve zararlı olabilecek potansiyel tuzaklar vurgu yaparak bu testin fare sürüm yapmak için nasıl. Ayrıca, test davranışlar nasıl değerlendirilir.

Watch this Scientific Journal Video about The Mouse Forced Swim Test at JoVE.com

The Mouse Forced Swim Test

Zorla yüzmeye testi kemirgenlerde potansiyel antidepresan etkinliğini değerlendirmek için deneysel bir yaklaşım olarak onaylanmıştır. Deneysel hayvan, su ve kaçış ilgili hareketlilik davranış bir tank yerleştirilir rakamlarla gösterir. Bu testin fare sürümü için ortak prosedürler açıklanmıştır.

Fare Zorla Swim Testi

The forced swim test is a rodent behavioral test used for evaluation of antidepressant drugs, antidepressant efficacy of new compounds, and experimental ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

104.7K Görüntüleme.  University of Maryland School of Medicine. Zorla yüzmeye testi kemirgenlerde potansiyel antidepresan etkinliğini değerlendirmek için deneysel bir yaklaşım olarak onaylanmıştır. Deneysel hayvan, su ve kaçış ilgili hareketlilik davranış bir tank yerleştirilir rakamlarla gösterir. Bu testin fare sürümü için ortak prosedürler açıklanmıştır.

Video: The Mouse Forced Swim Test

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and evaluating mouse models of human disease. MRI is an excellent modality for investigating genetically altered animals. It is capable of whole brain coverage, can be used in vivo, and provides multiple contrast mechanisms for investigating different aspects of neuranatomy and physiology. The advent of high-field scanners along with the ability to scan multiple mice simultaneously allows for rapid phenotyping of novel mutations.
Effective mouse MRI studies require attention to many aspects of experiment design. In this article, we will describe general methods to acquire quality images for mouse phenotyping using a system that images mice concurrently in shielded transmit/receive radio frequency (RF) coils in a common magnet (Bock et al., 2003). We focus particularly on anatomical phenotyping, an important and accessible application that has shown a high potential for impact in many mouse models at our imaging centre. Before we can provide the detailed steps to acquire such images, there are important practical considerations for both in vivo brain imaging (Dazai et al., 2004) and ex vivo brain imaging (Spring et al., 2007) that should be noted. These are discussed below.

Magnetic resonance imaging (MRI) has become an increasingly popular tool for examining the phenotype of genetically altered mice. This article illustrates the methods necessary to achieve high-throughput phenotyping of genetically altered mice using multiple-mouse MRI.

Çoklu-fare nöroanatomik Manyetik Rezonans Görüntüleme

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

Nörobilim

Detection of Neuritic Plaques in Alzheimer's Disease Mouse Model

Alzheimer's disease (AD) is the most common neurodegenerative disorder leading to dementia. Neuritic plaque formation is one of the pathological hallmarks of Alzheimer's disease. The central component of neuritic plaques is a small filamentous protein called amyloid &beta; protein (A&beta;)1, which is derived from sequential proteolytic cleavage of the beta-amyloid precursor protein (APP) by &beta;-secretase and &gamma;-secretase. The amyloid hypothesis entails that A&gamma;-containing plaques as the underlying toxic mechanism in AD pathology2. The postmortem analysis of the presence of neuritic plaque confirms the diagnosis of AD. To further our understanding of A&gamma; neurobiology in AD pathogenesis, various mouse strains expressing AD-related mutations in the human APP genes were generated. Depending on the severity of the disease, these mice will develop neuritic plaques at different ages. These mice serve as invaluable tools for studying the pathogenesis and drug development that could affect the APP processing pathway and neuritic plaque formation. In this protocol, we employ an immunohistochemical method for specific detection of neuritic plaques in AD model mice. We will specifically discuss the preparation from extracting the half brain, paraformaldehyde fixation, cryosectioning, and two methods to detect neurotic plaques in AD transgenic mice: immunohistochemical detection using the ABC and DAB method and fluorescent detection using thiofalvin S staining method.

One of the pathological characteristics of AD is the formation of Amyloid &#x03B2; protein positive neuritic plaques. In this protocol we describe two methods to detect neuritic plaques in transgenic AD model mice: immunohistochemical detection using the ABC and DAB method and fluorescent detection using thioflavin S staining method.

Nöritik plaklar Alzheimer Hastalığı Fare Modeli Algılama

Alzheimer's disease (AD) is the most common neurodegenerative disorder leading to dementia. Neuritic plaque formation is one of the pathological hallmarks ...

T-maze Forced Alternation and Left-right Discrimination Tasks for Assessing Working and Reference Memory in Mice

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in rodents. In our laboratory, we evaluated the two types of memory in more than 30 strains of genetically engineered mice using the automated version of this apparatus. Here, we present the modified T-maze apparatus operated by a computer with a video-tracking system and our protocols in a movie format. The T-maze apparatus consists of runways partitioned off by sliding doors that can automatically open downward, each with a start box, a T-shaped alley, two boxes with automatic pellet dispensers at one side of the box, and two L-shaped alleys. Each L-shaped alley is connected to the start box so that mice can return to the start box, which excludes the effects of experimenter handling on mouse behavior. This apparatus also has an advantage that in vivo microdialysis, in vivo electrophysiology, and optogenetics techniques can be performed during T-maze performance because the doors are designed to go down into the floor. In this movie article, we describe T-maze tasks using the automated apparatus and the T-maze performance of &alpha;-CaMKII+/- mice, which are reported to show working memory deficits in the eight-arm radial maze task. Our data indicated that &alpha;-CaMKII+/- mice showed a working memory deficit, but no impairment of reference memory, and are consistent with previous findings using the eight-arm radial maze task, which supports the validity of our protocol. In addition, our data indicate that mutants tended to exhibit reversal learning deficits, suggesting that &alpha;-CaMKII deficiency causes reduced behavioral flexibility. Thus, the T-maze test using the modified automatic apparatus is useful for assessing working and reference memory and behavioral flexibility in mice.

This article presents the protocol of T-maze tests using a modified automated apparatus for assessing the learning and memory functions in mice.

T-labirent Zorla Değişim ve Çalışma ve Fareler Referans Bellek değerlendirilmesi için sağ-sol Ayrımcılık Görevler

Forced alternation and left-right discrimination tasks using the T-maze have been widely used to assess working and reference memory, respectively, in ...

Tissue Preparation and Immunostaining of Mouse Sensory Nerve Fibers Innervating Skin and Limb Bones

Detection and primary processing of physical, chemical and thermal sensory stimuli by peripheral sensory nerve fibers is key to sensory perception in animals and humans. These peripheral sensory nerve fibers express a plethora of receptors and ion channel proteins which detect and initiate specific sensory stimuli. Methods are available to characterize the electrical properties of peripheral sensory nerve fibers innervating the skin, which can also be utilized to identify the functional expression of specific ion channel proteins in these fibers. However, similar electrophysiological methods are not available (and are also difficult to develop) for the detection of the functional expression of receptors and ion channel proteins in peripheral sensory nerve fibers innervating other visceral organs, including the most challenging tissues such as bone. Moreover, such electrophysiological methods cannot be utilized to determine the expression of non-excitable proteins in peripheral sensory nerve fibers. Therefore, immunostaining of peripheral/visceral tissue samples for sensory nerve fivers provides the best possible way to determine the expression of specific proteins of interest in these nerve fibers. So far, most of the protein expression studies in sensory neurons have utilized immunostaining procedures in sensory ganglia, where the information is limited to the expression of specific proteins in the cell body of specific types or subsets of sensory neurons. Here we report detailed methods/protocols for the preparation of peripheral/visceral tissue samples for immunostaining of peripheral sensory nerve fibers. We specifically detail methods for the preparation of skin or plantar punch biopsy and bone (femur) sections from mice for immunostaining of peripheral sensory nerve fibers. These methods are not only key to the qualitative determination of protein expression in peripheral sensory neurons, but also provide a quantitative assay method for determining changes in protein expression levels in specific types or subsets of sensory fibers, as well as for determining the morphological and/or anatomical changes in the number and density of sensory fibers during various pathological states. Further, these methods are not confined to the staining of only sensory nerve fibers, but can also be used for staining any types of nerve fibers in the skin, bones and other visceral tissue.

Immunocytochemical identification of peripheral sensory nerve fiber subtypes (and detection of protein expression therein) are key to the understanding of molecular mechanisms underlying peripheral sensation. Here we describe methods for preparation of peripheral/visceral tissue samples, such as skin and limb bones, for specific immunostaining of peripheral sensory nerve fibers.

Deri ve Kol ve bacak kemikleri innerve Fare Duyusal Sinir Lif doku hazırlanması ve immün

Detection and primary processing of physical, chemical and thermal sensory stimuli by peripheral sensory nerve fibers is key to sensory perception in ...

The Tail Suspension Test

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that are expected to affect depression related behaviors. Mice are suspended by their tails with tape, in such a position that it cannot escape or hold on to nearby surfaces. During this test, typically six minutes in duration, the resulting escape oriented behaviors are quantified. The tail-suspension test is a valuable tool in drug discovery for high-throughput screening of prospective antidepressant compounds. Here, we describe the details required for implementation of this test with additional emphasis on potential problems that may occur and how to avoid them. We also offer a solution to the tail climbing behavior, a common problem that renders this test useless in some mouse strains, such as the widely used C57BL/6. Specifically, we prevent tail climbing behaviors by passing mouse tails through a small plastic cylinder prior to suspension. Finally, we detail how to manually score the behaviors that are manifested in this test.

The tail-suspension test is validated as an experimental procedure to assess antidepressant efficacy of drug treatments in mice. Mice are suspended by their tails for six minutes and escape-related behaviors are assessed. We describe procedures used in conducting the tail suspension test.

Kuyruk Süspansiyon Testi

The tail-suspension test is a mouse behavioral test useful in the screening of potential antidepressant drugs, and assessing of other manipulations that ...

Telomerase Activity in the Various Regions of Mouse Brain: Non-Radioactive Telomerase Repeat Amplification Protocol (TRAP) Assay

Telomerase, a ribonucleoprotein, is responsible for maintaining the telomere length and therefore promoting genomic integrity, proliferation, and lifespan. In addition, telomerase protects the mitochondria from oxidative stress and confers resistance to apoptosis, suggesting its possible importance for the surviving of non-mitotic, highly active cells such as neurons. We previously demonstrated the ability of novel telomerase activators to increase telomerase activity and expression in the various mouse brain regions and to protect motor neurons cells from oxidative stress. These results strengthen the notion that telomerase is involved in the protection of neurons from various lesions. To underline the role of telomerase in the brain, we here compare the activity of telomerase in male and female mouse brain and its dependence on age. TRAP assay is a standard method for detecting telomerase activity in various tissues or cell lines. Here we demonstrate the analysis of telomerase activity in three regions of the mouse brain by non-denaturing protein extraction using CHAPS lysis buffer followed by modification of the standard TRAP assay.
In this 2-step assay, endogenous telomerase elongates a specific telomerase substrate (TS primer) by adding TTAGGG 6 bp repeats (telomerase reaction). The telomerase reaction products are amplified by PCR reaction creating a DNA ladder of 6 bp increments. The analysis of the DNA ladder is made by 4.5% high resolution agarose gel electrophoresis followed by staining with highly sensitive nucleic acid stain.
Compared to the traditional TRAP assay that utilize 32P labeled radioactive dCTP&#39;s for DNA detection and polyacrylamide gel electrophoresis for resolving the DNA ladder, this protocol offers a non-toxic time saving TRAP assay for evaluating telomerase activity in the mouse brain, demonstrating the ability to detect differences in telomerase activity in the various female and male mouse brain region.

Telomerase Activity in the Various Regions of Mouse Brain: Non-Radioactive Telomerase Repeat Amplification Protocol TRAP Assay

Telomerase is expressed in the neonatal brain and also in distinct regions of the adult brain. We present a non-toxic time saving TRAP assay for the analysis of telomerase activity in various regions of the mouse brain and detection of differences in telomerase activity between male and female mouse brains.

Fare Beyin Çeşitli Bölgelerinde Telomeraz Aktivite: Radyoaktif olmayan Telomeraz Amplifikasyon Protokolü tekrarlayın (TRAP) Deneyi

Telomerase, a ribonucleoprotein, is responsible for maintaining the telomere length and therefore promoting genomic integrity, proliferation, and ...

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the over-production of amyloid-beta and the deposition of amyloid-beta plaques in brain regions of the afflicted individuals. Throughout the years scientists have generated numerous Alzheimer&#8217;s disease mouse models that attempt to replicate the amyloid-beta pathology. Unfortunately, the mouse models only selectively mimic the disease features. Neuronal death, a prominent effect in the brains of Alzheimer&#8217;s disease patients, is noticeably lacking in these mice. Hence, we and others have employed a method of directly infusing soluble oligomeric species of amyloid-beta - forms of amyloid-beta that have been proven to be most toxic to neurons - stereotaxically into the brain. In this report we utilize male C57BL/6J mice to document this surgical technique of increasing amyloid-beta levels in a select brain region. The infusion target is the dentate gyrus of the hippocampus because this brain structure, along with the basal forebrain that is connected by the cholinergic circuit, represents one of the areas of degeneration in the disease. The results of elevating amyloid-beta in the dentate gyrus via stereotaxic infusion reveal increases in neuron loss in the dentate gyrus within 1 week, while there is a concomitant increase in cell death and cholinergic neuron loss in the vertical limb of the diagonal band of Broca of the basal forebrain. These effects are observed up to 2 weeks. Our data suggests that the current amyloid-beta infusion model provides an alternative mouse model to address region specific neuron death in a short-term basis. The advantage of this model is that amyloid-beta can be elevated in a spatial and temporal manner.

Here, we present a protocol for direct stereotaxic brain infusion of amyloid-beta. This methodology provides an alternative in vivo mouse model to address the short-term effects of amyloid-beta on brain neurons.

Fare Hippocampus içine Oligomerik Amiloid-beta Stereotaksik İnfüzyon

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Automated Analysis of C. elegans Swim Behavior Using CeleST Software

Dissecting the neuronal and neuromuscular circuits that regulate behavior remains a major challenge in biology. The nematode Caenorhabditis elegans has proven to be an invaluable model organism in helping to tackle this challenge, from inspiring technological approaches,&#160;building the human brain connectome, to actually shedding light on the specific molecular drivers of basic functional patterns. The bulk of the behavioral studies in C. elegans have been performed on solid substrates. In liquid, animals exhibit behavioral patterns that include movement at a range of speeds in 3D, as well as partial body movements, such as a posterior curl without anterior shape change, which introduce new challenges for quantitation. The steps of a simple procedure, and use of a software that enables high-resolution analysis of C. elegans swim behavior, are presented here. The software, named CeleST, uses a specialized computer program that tracks multiple animals simultaneously and provides novel measures of C. elegans locomotion in liquid (swimming). The measures are mostly grounded in animal posture and based on mathematics used in computer vision and pattern recognition, without computational requirements for threshold cut-offs. The software tool can be used to both assess overall swimming prowess in hundreds of animals from combined small batch trials and to reveal novel phenotypes even in well-characterized genetic mutants. The preparation of specimens for analysis with CeleST is simple and low-tech, enabling wide adaptation by the scientific community. Use of the computational approach described here should therefore contribute to the greater understanding of behavior and behavioral circuits in the C. elegans model.

Automated Analysis of C. elegans Swim Behavior Using CeleST Software

An efficient and simple methodology for computer-based analysis of nematode swimming behavior in liquid is described. The method requires little to no investment for C. elegans laboratories. The hardware used is standard, and the computer software for the behavioral analysis (CeleST) is an open source one.

ve Otomatik Analizi<em&gt; C. elegans</emCelest Yazılım Kullanma&gt; Deniz Davranışı

Dissecting the neuronal and neuromuscular circuits that regulate behavior remains a major challenge in biology. The nematode Caenorhabditis elegans has ...

Diffuse Reflectance Spectroscopy: Getting the Capillary Refill Test Under One's Thumb

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill should occur within 2 s after releasing 5 s of firm pressure (e.g., by the physician&#39;s finger) in the normal healthy supine patient. A slower refill time indicates poor skin perfusion, which can be caused by conditions including sepsis, blood loss, hypoperfusion, and hypothermia. Since its introduction, the clinical usefulness of the test has been debated. Advocates point out its feasibility and simplicity and claim that it can indicate changes in vascular status earlier than changes in vital signs such as heart rate. Critics, on the other hand, stress that the lack of standardization in how the test is performed and the highly subjective nature of the naked eye assessment, as well as the test&#39;s susceptibility to ambient factors, markedly lowers the clinical value. The aim of the present work is to describe in detail the course of the refill event and to suggest potentially more objective and exact endpoint values for the capillary refill test using diffuse polarization spectroscopy.

This protocol describes how the use of diffuse polarization spectroscopy can improve the clinical usefulness of the capillary refill test. We suggest a more detailed analysis of the course of the capillary refill in healthy volunteers using diffuse reflectance spectroscopy videos and new informatic endpoints.

Diffüz yansıma spektroskopisi: bir parmağının altında kılcal damar yeniden doldurmak Test alma

The capillary refill test was introduced in 1947 to help estimate circulatory status in critically ill patients. Guidelines commonly state that refill ...

Localization of the Locus Coeruleus in the Mouse Brain

The locus coeruleus (LC) is a major hub of norepinephrine producing neurons that modulate a number of physiological functions. Structural or functional abnormalities of LC impact several brain regions including cortex, hippocampus, and cerebellum and may contribute to depression, bipolar disorder, anxiety, as well as Parkinson disease and Alzheimer disease. These disorders are often associated with metal misbalance, but the role of metals in LC is only partially understood. Morphologic and functional studies of LC are needed to better understand the human pathologies and contribution of metals. Mice are a widely used experimental model, but the mouse LC is small (~0.3 mm diameter) and hard to identify for a non-expert. Here, we describe a step-by-step immunohistochemistry-based protocol to localize the LC in the mouse brain. Dopamine-&#946;-hydroxylase (DBH), and alternatively, tyrosine hydroxylase (TH), both enzymes highly expressed in the LC, are used as immunohistochemical markers in brain slices. Sections adjacent to LC-containing sections can be used for further analysis, including histology for morphological studies, metabolic testing, as well as metal imaging by X-ray fluorescence microscopy (XFM).

The locus coeruleus is a small cluster of neurons involved in a variety of physiological processes. Here, we describe a protocol to prepare mouse brain sections for studies of proteins and metals in this nucleus.

Fare beynindeki Locus Coeruleus lokalizasyonu

The locus coeruleus (LC) is a major hub of norepinephrine producing neurons that modulate a number of physiological functions. Structural or functional ...