Murin Bağırsak Kriptlerinden Organoidlerin 3D Kültürlenmesi ve Organoid Araştırmaları için Tek Bir Kök Hücre

Kök hücre biyolojisine, özellikle bağırsak kriptinin dibinde bulunan bağırsak kök hücresine odaklanan araştırmamız. Amaç, homeostazın bağırsaktaki kök hücre tarafından nasıl korunduğunu cevaplamaktır. Bağırsak kök hücresinden türetilen bu 3D organ kültürü, kök hücrelerin çoğalmasını, farklılaşmasını ve bakımını incelemek için güçlü bir araç sağlar.

Organ teknolojisi, kendini yenileme ve farklılaşma potansiyelini koruyarak bağırsak kök hücresinin kültürüne uzun süre yardımcı olur. Organoid, bağırsak kırılganlığı ve geçmiş kırılganlık üzerine temel ve translasyonel araştırma çalışmaları için yaygın olarak kullanılmaktadır. Şu anki zorluğumuz, bağırsak epitel hücresi ve kök hücrede yer alan koroner sistemi anlamaktır.

Objektif klonlama ile tetiklenen biyolojik süreçleri anlamak kilit öneme sahiptir. Önemli bulgularımızdan biri, klonlama yoluyla sinyallemenin bağırsak epitelyal büyümesinin ve farklılaşmasının homeostazını sürdürmesidir. Protokolümüz, ince bağırsak kriptolarını sürekli olarak izole etmek için bir yöntem ve kriptal salınım oranını artırmak için daha sonra 3D organoid kültürünü açıklamaktadır.

EDTA ile tedaviden sonra kuvvetli çalkalama içeren mekanik bir izolasyon yöntemi oluşturuyoruz. EDTA ve mekanik ayrışma, kriptal verimi artırmak için birleştirilebilir. Ek olarak, uygun beceri virüs kontaminasyonunu en aza indirebilir ve kript sayısını artırabilir.

Bulgularımız, kas ve organizma reseptörleri aracılığıyla sinyallemenin, bağırsak epitelyal büyümesi ve farklılaşmasının homeostazını korumak için birlikte çalıştığını göstermektedir. Bu, nörokoroner olmayan arteritik sistemin bağırsak kök hücre nişinin ılımlılığında önemli bir rol oynadığını varsaymamızı teşvik eder.