Farelerde ve sıçanlarda stresi indüklemek için kısıtlama

Araştırmam, stres etkilerini etkileyen nörobiyolojik mekanizmalara, kötüye kullanım ilaçlarının davranışsal etkilerine ve ikisi arasındaki kesişime odaklanmaktadır. Kısacası laboratuvarım, stres deneyimlerinin madde kullanım bozukluklarına nasıl katkıda bulunduğunu ve bu ilişkiyi ele almak için nasıl müdahaleler geliştirebileceğimizi cevaplamaya çalışıyor. Araştırmam, strese maruz kalmanın noradrenerjik sistemleri stres deneyiminin ötesinde devam edecek şekilde değiştirdiğini göstermiştir.

Noradrenerjik sinyallemedeki bu artışlar, TSSB ve diğer bozuklukların karakteristik özelliği olan yüksek uyarılma tepkilerinin altını çizebilir. Diğer strese neden olan yaklaşımlarla karşılaştırıldığında, kısıtlama ucuzdur, gerçekleştirilmesi kolaydır, anksiyete, depresyon, madde kullanım bozukluğu ve travma sonrası stres bozukluğu dahil olmak üzere insan bozukluklarının yönlerini modellemek için yararlıdır ve çok çeşitli parametrelerle uyarlanabilir. Gelecekte, laboratuvarım stres veya maruziyetten kaynaklanan ilaca bağlı davranıştaki değişikliklerin altında yatan mekanizmalara odaklanacak.

Başlamak için, fareleri ev kafesi kontrolüne, akut kısıtlama stresine veya kronik kısıtlama stres gruplarına rastgele atayın. Atanan gruba göre strese maruz kalma süresini belirleyin. Ardından, 1/8 inç uçlu bir elektrikli matkap kullanarak havalandırma delikleri oluşturmak için 50 mililitrelik konik boruları değiştirin.

Tüp boyunca hava akışına izin vermek için delikleri eşit şekilde aralıklandırın ve farenin konumundan bağımsız olarak nefes alabilmesini sağlayın. Hayvan barınağı ve davranışsal test alanlarından ayrı bir test odasında, atanan fareyi modifiye edilmiş konik tüpe yerleştirin. Hayvanı belirlenen kısıtlama süresi boyunca sınırlamak için kapağı güvenli bir şekilde takın.

Ardından, emniyet borusunu düz bir yüzeye yatay olarak yerleştirin. Gerekirse, yuvarlanmasını önlemek için tüpü laboratuvar bandı veya pipet kabı ile sabitleyin. Olağandışı davranışlar için kısıtlanmış hayvanı her 20 dakikada bir izleyin.

Strese maruz kaldıktan sonra, fareyi ev kafesine geri koyun. Fareyi rastgele olarak ev kafesi kontrolüne, akut kısıtlama stresine veya kronik kısıtlama stres gruplarına atayın. Piyasada bulunan emniyet tüpleri için, fareyi cihaza yerleştirin, fişi nesnenin boyutuna tam olarak uyacak şekilde ayarlayın ve yerine kilitleyin.

Normal nefes almaya izin verirken baştan kuyruğa dönüşleri önlemek için farenin uygun şekilde sınırlandırıldığından emin olun. Hayvan barınağı ve davranış testlerinden ayrı bir test odasında, atanan fareleri belirlenen kısıtlama uzunluğu için kısıtlama tüplerine yerleştirin. Her tüpü düz bir yüzeye yatay olarak yerleştirin.

Stres seansından sonra, fareyi yiyecek ve suya ücretsiz erişimi olan ev kafesine geri koyun. Plazma kortikosteron konsantrasyonu, tek bir strese maruz kaldıktan sonra naif kontrollere göre önemli ölçüde daha yüksekti, ancak tekrarlanan strese maruz kalan farelerde bu yükselme azaldı. Tekrarlanan stres maruziyeti, çeşitli optogenetik stimülasyon parametrelerinde norepinefrin salınımını önemli ölçüde artırdı.