A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
أبرز أوجه التشابه مع الدماغ الشبكية وهكذا يمثل نافذة فريدة لدراسة المفرج وهيكل الخلايا العصبية في الدماغ غير إينفاسيفيلي. ويصف هذا البروتوكول وسيلة لدراسة استخدام تقنيات التصوير الشبكية الخرف. يحتمل أن يمكن أن تساعد هذه الطريقة في تشخيص وتقييم المخاطر للعته.
يقدم الشبكية "نافذة" فريدة من نوعها دراسة العمليات الفيزيولوجية المرضية الخرف في الدماغ، كما أنها تعد امتداداً للجهاز العصبي المركزي (CNS) وأبرز أوجه التشابه مع الدماغ من حيث المنشأ الجنينية، الخصائص التشريحية و الخصائص الفسيولوجية. ويمكن الآن هيكل الخلايا العصبية والأوعية الدموية في شبكية العين الشبكية تصور بسهولة وغير إينفاسيفيلي استخدام تقنيات التصوير، بما في ذلك التصوير الفوتوغرافي النظارة والتصوير المقطعي التماسك الضوئية (أكتوبر)، وكمياً شبه تلقائياً باستخدام برامج الحاسوب تحليل. دراسة الاقترانات بين تغيرات الأوعية الدموية والخلايا العصبية في الشبكية والخرف يمكن تحسين فهمنا للعته، ويحتمل أن المعونة في تشخيص وتقييم المخاطر. ويهدف هذا البروتوكول لوصف أسلوب القياس الكمي وتحليل المفرج الشبكية وهيكل الخلايا العصبية، التي يحتمل أن تكون مرتبطة بالعته. هذا البروتوكول كما يوفر أمثلة على التغيرات الشبكية في المواضيع مع الخرف، ويناقش القضايا التقنية والقيود الحالية لتصوير الشبكية.
ونظرا للزيادات في متوسط العمر المتوقع، الخرف قد أصبح مشكلة طبية الرئيسية، والمساهمة الاجتماعية الهامة والصحة الاقتصادية عبء عالمياً1،2،3،،من45. اليوم، أي شخص في الولايات المتحدة تطور مرض الزهايمر (AD)، الشكل الأكثر شيوعاً للعته، كل s 666. ويقدر أن 115 مليون شخص بحلول عام 2050، سوف تتأثر بإعلان7.
ويقدم الشبكية "نافذة" فريدة من نوعها لدراسة الخرف بسبب خصائصه التشريحية والفسيولوجية مماثلة مع الدماغ. فيما يتعلق بالمفرج والشرايين الشبكية والاوردة، قياس 100 إلى 300 ميكرون في القطر، وسمات مماثلة مع الأوعية الدماغية الصغيرة، مثل نهاية الشرايين دون أناستوموسيس، ووظيفة الحاجز، والسيارات-البند8، 9-فيما يتعلق بهيكل الخلايا العصبية، الخلايا ganglionic الشبكية (رجكس) مشاركة الخصائص النموذجية مع الخلايا العصبية في الجهاز العصبي المركزي (CNS) 10. رجكس مكانة بارزة ترتبط بالدماغ كما أنها تشكل الإشارات المرئية العصب البصري والمشروع من الشبكية إلى نويات يتناول الأفقي ووالاكيميه متفوقة. العصب البصري، مماثلة للعديد من الألياف العصبية في الجهاز العصبي المركزي، ميليناتيد من أوليجوديندروسيتيس وهو انشيثيد في طبقات سحائي. وبخاصة، يمكن أن يؤدي إلى إهانة للعصب البصري في استجابات مشابهة لوحظت في محاور عصبية الجهاز العصبي المركزي الأخرى، مثل رجعي وانحطاط anterograde إكسون وتشكيل ندبة، وتدمير المايلين، تنكس الثانوية وعلى مستوى طبيعي من نيوروتروفيك عوامل وأجهزة الإرسال العصبية11،12،،من1314. كما يمكن تفسير ظهور الأعراض البصرية في بعض المرضى الإعلانية بروابط قوية بين الشبكية و الدماغ15،16. كنتيجة لذلك، اقترح أن الشبكية قد تعكس العمليات المرضية الخرف في الدماغ وتصوير الشبكية ويمكن استخدامها لدراسة الخرف.
المفرج الشبكية وهيكل الخلايا العصبية يمكن الآن تصور غير إينفاسيفيلي باستخدام تقنيات التصوير الشبكية. على سبيل المثال، يمكن التقاط الصور الفوتوغرافية النظارة الشبكية باستخدام كاميرات النظارة، وخصائص المفرج الشبكية (مثلاً، سفينة العيار وتورتوسيتي والنمطي هندسي متكرر البعد) يمكن أن يكون كمياً ثم استخدام تحليل الحاسوب البرامج. وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضا قياس استخدام التصوير المقطعي التماسك الألياف البصرية (OCT) معلمات لهيكل الخلايا العصبية الشبكية (مثل سمك العقدة الداخلية خلية بليكسيفورم [GC-الشعيرات] وطبقة الألياف العصبية الشبكية [رنفل]) وكمياً باستخدام المدمج تحليل الخوارزميات.
نظراً لأهمية تصوير الشبكية لدراسة الخرف، يهدف هذا البروتوكول إلى وصف أسلوب التصوير وتحليل المفرج الشبكية وهيكل الخلايا العصبية في فيفو باستخدام تقنيات التصوير الشبكية. هذا البروتوكول كما يوفر أمثلة على التغيرات الشبكية في المواضيع مع الخرف، ويناقش القضايا التقنية والقيود الحالية لتصوير الشبكية.
جميع الأساليب الموصوفة هنا أقرتها لجنة أخلاقيات بحوث سريرية محلية في هونج كونج-
ملاحظة: للبساطة، يتم استخدام المعدات المدرجة في الجدول للمواد لتوضيح إجراءات تصوير الشبكية والتحليل اللاحق. ويتضح قياس البارامترات الأوعية الدموية الشبكية باستخدام برنامج (سيفا) تقييم السفينة سنغافورة I 17 (الإصدار 4.0، وجامعة سنغافورة الوطنية، سنغافورة). ومع ذلك، تجدر الإشارة إلى أن مجموعة مختلفة من المعدات يمكن أن يعتمد المبادئ الأساسية لا تزال مشابهة.
1-إعداد المواضيع "تصوير الشبكية"
2. قياس "بارامترات الأوعية الدموية الشبكية" من "النظارة الصور الفوتوغرافية باستخدام" برنامج تحليل الحاسوب
رقم 1: رسم تخطيطي عرض إجراءات قياس البارامترات الأوعية الدموية الشبكية. الحصول على (أ) تركز على القرص البصري النظارة الصور باستخدام كاميرا النظارة. الشكل 1A و 2A الشكل صورتين النظارة مع الجودة المثلى. (ب) تحميل الصور النظارة على الملقم المستندة إلى مجموعة النظراء، وأدخل تفاصيل الدراسة ذات الصلة، بما في ذلك معامل التحويل الصورة (ICF). قد تستخدم برامج الحاسوب تحليل أخرى أساليب غير المستندة إلى مجموعة النظراء لتنظيم وتخزين الصور. (ج) فتح الصورة النظارة في برنامج تحليل الحاسوب. مارك (د) موقع مركز القرص البصري، و (ه) مطالبة البرنامج للكشف عن حافة القرص البصري ووضع شبكة قياس تلقائياً. (و) بناء السفينة وسم استناداً إلى مسارات السفن، وإرساء السفن يغطي تقدير أقطار الأوعية. (ز) ضبط تغطي وسم السفن غير صحيحة والسفينة يدوياً. (ح) التدبير الطيف من المعلمات الشبكية والأوعية الدموية، بما في ذلك الكوادر السفينة، تورتوسيتي، والبعد كسورية والتشعب. يمكن تنفيذها خطوة (د) الخطوة (F)، والخطوة (ح) تلقائياً بواسطة بعض برامج الحاسوب تحليل. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
رقم 2: صور النظارة مع الجودة الأمثل والأمثل- يجب فحص جودة الصورة من صورة النظارة فورا بعد الحصول على الصور، كما أن جودة الصورة يؤثر تأثيراً مباشرا على قياس بارامترات الأوعية الدموية الشبكية اللاحقة. يجب أن يتم تجاهل الصورة إذا كان واحداً من هذه المصنوعات اليدوية ويلاحظ. هذه الصور تم التقاطها باستخدام كاميرا النظارة 50°. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
رقم 3: حساب معامل تحويل الصورة (ICF)- لحساب ICF، حدد عشوائياً عينة 10 ٪ من الصور من الدراسة (الخطوة 1). ثم، عينات قياس الارتفاع من أقراص ضوئية (بكسل) من الصور (الخطوة 2). حساب ICF استخدام الصيغة: ICF = 1800 ميكرومتر/(متوسط الارتفاع بكسل للأقراص البصرية للصور عينات)، حيث يكون مكم 1800 تقريبا ارتفاع القرص البصري العادي (الخطوة 3). كما التكبير تأثير ودقة وضوح الصورة تختلف من كاميرا لكاميرا، من الضروري لحساب ICF دقيقة لكل كاميرا المستخدمة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 4: الأخطاء الشائعة للسيارات-التتبع- تتبع السفينة التلقائية ليست دقيقة تماما، والتعديلات اليدوية المطلوبة لضمان دقة القياس. وهذا الرقم يبين الأخطاء الشائعة للسيارات-اقتفاء أثر ويوضح النتائج المثلى بعد التعديلات اليدوية. (أ) مركز القرص البصري تم وضع علامة بشكل غير صحيح، وهذا يؤدي إلى انحراف في شبكة القياس، التي قد تؤثر على القياسات اللاحقة. ومن الناحية المثالية، ينبغي أن تحدد دائرة الأعمق في شبكة القياس حافة القرص البصري. تتبع السفينة غير مكتملة (ب) يمكن أن يؤدي إلى قياس البعد كسورية، تورتوسيتي، و ما ينبغي أن تتبع مسار السفينة حتى نهاية السفينة غير صحيحة. إذا كان الجزء الأعلى من السفينة يقع خارج الشبكة القياس، يمكن إيقاف التتبع في الدائرة البيضاء الأبعد. (ج) السفينة وسم في مواقع كروس تخضع ميل أعلى للخطأ ومن ثم تتطلب اهتماما خاصا. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 5: يغطي السفينة غير صحيحة. يعرض الشكل التالي أمثلة ليغطي السفينة غير صحيحة ينبغي إبطال مفعولها واستبعادها من قياس اللاحقة. ينبغي إلغاء تنشيط يغطي السفينة إذا لم تكن عمودي على السفن (A). وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي أيضا المعطلة يغطي السفينة إذا كانت السفينة يتم تتبعه تحجب تحت سفينة أخرى (ب)، أو يغطي السفينة لا يمكن أن تمثل عرض تقريبي للسفينة (ج). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 6: القياس الكمي للمفرج الشبكية. (أ) "المنطقة ب" (يعرف 0.5-1.0 القرص أقطار بعيداً عن الهامش القرص) يستخدم لقياس الكوادر السفينة من منطقة ب وفقا "خطر تصلب الشرايين" في "دراسة المجتمعات المحلية". المنطقة ج (يعرف 0.5-2.0 القرص أقطار بعيداً عن الهامش القرص) يستخدم لقياس الكوادر السفينة من المنطقة ج ومجموعة من معلمات شبكة الأوعية الدموية الشبكية (مثل تورتوسيتي، والبعد كسورية، والتشعب). (ب) تغطي السفينة خطوط القياس المستخدمة لتقدير الكوادر السفينة الشبكية (أو الأقطار). يغطي السفينة غير صحيحة ينبغي أن تستبعد يدوياً من القياس. (ج) تدابير لجميع السفن التي تحتوي على التشعب الأولى داخل المنطقة ج، البرنامج تلقائياً (θ) الزوايا المتفرعة من التشعب الأولى. وباﻹضافة إلى ذلك، يحسب معامل التفريع أيضا باستخدام الصيغة: معامل التفريع = (د 1 2 + د 2 2) &/d 0 2، حيث هو د 0 الجذع العيار، و د 1 ود 2 هي كوادر فرع. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
3-تقييم سمك الشعيرات GC ورنفل
رقم 7: رسم تخطيطي عرض إجراءات قياس سمك رنفل و GC-الشعيرات- يمكن استخدام التصوير المقطعي التماسك الضوئية (OCT) لقياس سمك طبقة بليكسيفورم الخلية الداخلية العقدة (GC-الشعيرات) وطبقة الألياف العصبية الشبكية (رنفل). (أ وب) قياس سمك الشعيرات GC ورنفل استخدام المدمج في “ مكعب بقعي ” و “ مكعب القرص البصري ” المسح البروتوكولات على التوالي. (ج، د) التحقق من جودة الصورة مباشرة بعد الحصول على الصور. تجاهل الصورة وتكرار الفحص إذا كانت قوة إشارة أصغر من 6، أو يتم الكشف عن التحف الحركة. (ه، و) ثم، موجه البرنامج التحليل المدمج لتحليل نتيجة المسح تلقائياً وإنشاء تقرير للتفسير. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 8: نتائج دون المستوى الأمثل للتصوير المقطعي التماسك الضوئية- المشتركة نتائج دون المستوى الأمثل للتصوير المقطعي التماسك الضوئية (OCT) تشمل قوة إشارة سيئة (A) (قيمة قوة < 6)، و (ب) الحركة المصنوعات اليدوية. ينبغي استعراض نوعية المسح الضوئي مباشرة بعد الحصول على الصور، ويجب أن يكون الفحص يتكرر إذا تصادف هذه المصنوعات اليدوية. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
الرقم 9: طبقات الشبكية تستخدم تقييم لهيكل الخلايا العصبية الشبكية. يتم قياس طبقة الألياف العصبية الشبكية (رنفل) باستخدام الخوارزمية (ONH) رأس العصب البصري، بينما العقدة الداخلية خلية طبقة بليكسيفورم يقاس باستخدام خوارزمية تحليل (الائتلاف) خلية العقدة. خوارزمية أنه قطاعات الحدود الداخلية والخارجية رنفل لقياس سمك رنفل. خوارزمية الائتلاف بالكشف عن خط الحدود الخارجي طبقة الألياف العصبية الشبكية (رنفل)، والطبقة بليكسيفورم الداخلية (IPL) أن تسفر عن سمك طبقة خلايا العقدة (جكل) مجتمعة والشعيرات. يتم قياس سمك جكل والشعيرات معا، كما الحد الفاصل بين جكل والشعيرات تشريحيا غيرواضح. غير أن سمك مجتمعة جكل والشعيرات (أي الشعيرات GC) ما زال يدل على صحة رجكس. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
10 الرقم: مثال لإظهار الاختلافات في المفرج الشبكية بين موضوع عادي وموضوع إعلان. عند مقارنة هذا الموضوع العادي، أظهرت صورة النظارة الموضوع الإعلانية أضيق السفينة الكوادر (كراي المنطقة ب، ميكرومتر 116....
ويصف هذا البروتوكول إجراءات قياس التغيرات العصبية والأوعية الدموية في الشبكية في فيفو. الشبكية سهم أصول الجنينية مشابهة والميزات التشريحية والخصائص الفسيولوجية مع المخ، وقد تعكس هذه التغييرات الشبكية تغييرات مماثلة للمفرج وهيكل الخلايا العصبية في الدماغ.
كما هو مبي...
ونود أن نعرب عن تقديرنا لمدرسة الحوسبة، "جامعة سنغافورة الوطنية،" لتقديم الدعم التقني.
فيما يتعلق بالعلاقات المالية المحتملة، هو صاحب البلاغ وونغ يوسف تيان مخترع المشارك من البرنامج سنغافورة I السفينة التقييم (سيفا) المستخدمة في هذه المقالة.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Non-mydriatic Retinal Camera | Topcon, Inc, Tokyo, Japan | TRC 50DX | N/A |
Singapore I Vessel Assessment Program | National University of Singapore | Version 4.0 | N/A |
CIRRUS HD-OCT | Carl Zeiss Meditec, Inc, Dublin, CA | Model 4000 | N/A |
Mydriatic Agents | N/A | N/A | Prepared from 1% tropicamide and 2.5% phenylephrine hydrochloride |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved