Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

نقدم هنا، بروتوكولا لتقييم نتائج تطبيق الضوء الأحمر على نمو بيوفيلم المبيضات البيض . جهاز ضوء الأحمر غير متسقة مع الطول الموجي ل 635 نانومتر وكثافة الطاقة 87.6 J·cm-2 طبق في جميع أنحاء نمو المبيضات البيض الأغشية الحيوية ح 48.

Abstract

نقدم هنا، بروتوكولا لتقييم نتائج بدل الضوء الأحمر في العلاج على نمو بيوفيلم المبيضات البيض . لزيادة نمو العوالق SN425 المبيضة ، نما إينوكولومس في وسائل الإعلام "قاعدة النيتروجين الخميرة". لتكوين بيوفيلم، طبقت RPMI 1640 وسائل الإعلام، التي لها تركيزات عالية من الأحماض الأمينية، للمساعدة على نمو بيوفيلم. تعامل الأغشية الحيوية 48 ساعة مرتين في يوم لمدة 1 دقيقة مع جهاز خفيفة غير متماسك (الضوء الأحمر؛ والطول الموجي = 635 نانومتر؛ وكثافة الطاقة = 87.6 J·cm-2). كما تم تطبيق عنصر تحكم إيجابية (PC)، الكلورهيكسيدين 0.12 في المائة (التايوانية)، وكعنصر تحكم سلبية (كارولاينا الشمالية)، 0.89% كلوريد الصوديوم تم تطبيقه على الأغشية الحيوية. مستعمرة تشكيل وحدات (زيمبابوي), كانت كمياً والانسيابيه الوزن الجاف والقابلة للذوبان وغير قابلة للذوبان بعد العلاج. بإيجاز، البروتوكول المعروضة هنا بسيط واستنساخه ويقدم إجابات فيما يتعلق بالجدوى، مبالغ السكاريد الوزن الجاف وخارج الخلية بعد العلاج الضوء الأحمر.

Introduction

زيادة حالات مرض السكري، تطبيقات المعالجة الكابتة للمناعة، والإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، ووباء الإيدز، الإجراءات السريرية الغازية واستهلاك المضادات الحيوية واسعة الطيف في السنوات الماضية زادت حالات المبيضات البيض المتصلة بالأمراض1،2. ترتبط عادة بالتنمية بيوفيلم التهابات المبيضة وقد يسبب المظاهر السريرية، مثل داء المبيضات أو المظاهر الجهازية، مثل المبيضات1،2. واحدة من أبرز عوامل الفوعة النمو بيوفيلم هو إنشاء مصفوفة السكاريد خارج الخلية. وتتعاون تشكيل بيوفيلم زيادة المقاومة للعقاقير المضادة للفطور الموجودة، والإجهاد البيئي، والمضيف الآليات المناعية3.

ويبدأ نمو بيوفيلم المبيضة الانضمام المبكر الخلايا العوالق إلى الركازة، متبوعاً بنشر خلايا الخميرة من خلال سطح الركازة، ونمو أصله. المرحلة الأخيرة من النمو بيوفيلم هو مرحلة النضوج، حيث يتم إعاقة التنمية مثل الخميرة ويوسع تنمية أصله، والمصفوفة خارج الخلية إحاطة بيوفيلم4. تتفاعل والانسيابيه المبيضة (EPS) في المصفوفة شكل معقد5،المنان glucan6. تفاعل والانسيابيه أمر بالغ الأهمية للدفاع عن الأغشية الحيوية مكافحة المخدرات7. ومن ثم، يمكن الحد EPS من المصفوفة خارج الخلية المبيضة دعم تطوير بروتوكولات أنتيبيوفيلم جديدة لمكافحة داء المبيضات الفموية.

ينظم الضوء النمو والتنمية، وسلوك العديد من الكائنات الحية8 وتم تطبيقه كمضادات الميكروبات في العلاج الكيميائي الميكروبات الضوئي (الميثاق). وينطبق ميثاق ضوء مرئي طول موجي محدد ومحسس ضيائي امتصاص ضوء9. ومع ذلك، قد الضيائية صعوبات في اختراق بيوفيلم، مما تسبب في انخفاض كفاءة10. فشل العوامل العلاجية في اختراق الأغشية الحيوية تماما سبب في أن الأغشية الحيوية أحياناً يقاوم العلاج بمضادات الميكروبات التقليدية3،5. لإلغاء تنشيط الخلايا الجرثومية المغلقة، يلزم مضادات الميكروبات تتخلل من خلال المصفوفة خارج الخلية؛ ومع ذلك، يميز EPS عقبة ديفوسيونال لمثل هذه الجزيئات بدفع مستوى النقل إلى بيوفيلم أو بالتأثير على استجابة مضادات الميكروبات مع المصفوفة نفسها11.

نظراً للعيوب للميثاق، يبرز استخدام الضوء بحد ذاته كحدوث تحسن قيمة. وكشفت البيانات الأولية أن العلاج بالضوء الأزرق مرتين في يوم إلى حد كبير يحول دون إنتاج EPS الذوبان في بيوفيلم mutans العقدية . بنقصان قدرة EPS-تستعصي على الحل، تناقص الضوء الأزرق بيوفيلم النمو. ومع ذلك، نتائج العلاج الضوئي باستخدام الضوء الأحمر في الأغشية الحيوية المبيضة شحيحة. ومن ثم، كان الهدف من هذا التحقيق لتقييم ما هي طريقة المعالجة الضوئية باستخدام الضوء الأحمر يؤثر على النمو وترتيب بيوفيلم المبيضة . للعلاج مرتين يوميا وعلينا تكييف لدينا مختبر السابقة البروتوكولات9،12 إلى تقديم نموذج بيوفيلم سهلة واستنساخه أن توفر إجابات فيما يتعلق بالجدوى، السكريات الوزن الجاف وخارج الخلية المبالغ بعد العلاج الضوء الأحمر. يمكن استخدام البروتوكول نفسه لاختبار العلاجات الأخرى.

Protocol

1. إعداد وسائل الإعلام الثقافة

  1. إعداد أجار سابورو سكر العنب (حزب العمل الديمقراطي). تعليق ز 65 من حزب العمل الديمقراطي وتستكمل مع الكلورامفينيكول (50 مغ/لتر) في 1,000 مل ماء المقطر. يغلي بحل الوسط تماما. تعقيم بالتعقيم في 15 PSI (121 درجة مئوية) عن 30 دقيقة كول إلى 45-50 درجة مئوية. تخلط جيدا وتصب 20 مل من حزب العمل الديمقراطي في لوحات بيتري معقمة (الحجم: 100 ملم × 15 ملم).
  2. إعداد الخميرة النيتروجين قاعدة (YNB) المتوسطة تكملها مع الجلوكوز 100 ملم خلط ز 6.7 من YNB و 18 جرام من سكر العنب إلى 1,000 مل من الماء عالي النقاوة. استخدام محرض مزيج وتعقيم المتوسطة استخدام نظام تصفية فراغ 0.22 ميكرومتر.
  3. إعداد ربمي بخلط ز 10.4 RPMI 1640 و 34.32 ز 3-(N-morpholino) حمض بروبانيسولفونيك (والمماسح) إلى 1,000 مل من الماء عالي النقاوة. خلط في محرض دون الحرارة وضبط درجة الحموضة إلى 7 بإضافة هيدروكسيد الصوديوم 1 ن (ز 2 إضافة من هيدروكسيد الصوديوم في 50 مل الماء عالي النقاوة). تعقيم المتوسطة استخدام نظام تصفية فراغ 0.22 ميكرومتر.

2-قبل العدوى والعدوى

  1. إزالة الكائنات الدقيقة SN425 المبيضة من الثلاجة −80 درجة مئوية والسماح لها بالذوبان في درجة حرارة الغرفة. البذور 10 ميليلتر من ثقافة الأسهم على أطباق بتري تحتوي على حزب العمل الديمقراطي وتستكمل مع الكلورامفينيكول (50 مغ/لتر). احتضان أطباق بيتري هوائيا في 37 درجة مئوية ح 48.
  2. بعد 48 ساعة حضانة، إضافة 10 مستعمرات المبيضة إلى 10 مل نيتروجين الخميرة المتوسطة (YNB) قاعدة تكمل مع الجلوكوز 100 مم، واحتضان هوائيا في 37 درجة مئوية ح 16 للعدوى قبل.
  3. وبعد حضانة لإعداد 16 ح، إينوكولومس بتمييع الثقافات كاتب في المتوسطة YNB جديدة تستكمل مع الجلوكوز 100 ملم في 01:10 نسبة (1 مل ثقافة كاتب المخفف في 9 مل YNB). قياس الكثافة البصرية الأولية (OD) في 540 نانومتر.
  4. احتضان إينوكولومس هوائيا في 37 درجة مئوية ح 8 حتى تصل إلى مرحلة النمو سجل منتصف السلالات وقياس التطوير التنظيمي النهائي في 540 نانومتر. طرح OD النهائي من OD الأولية معرفة ما إذا كان التطوير التنظيمي إينوكولومس في مرحلة النمو سجل منتصف (ح 8، استناداً إلى منحنيات النمو في الشكل 1).
  5. للوصول إلى العدوى مع خلايا7 10 مل-1، الطرد المركزي العدوى لمدة 5 دقائق في 5,500 س زوتجاهل المادة طافية والتركيز العدوى إلى نصف حجم الأنابيب.

3-بيوفيلم تشكيل والمعالجة الضوئية

  1. إضافة 1 مل من العدوى إلى الآبار للوحة البوليستيرين 24-جيدا. احتضان هوائيا في 37 درجة مئوية لمدة 90 دقيقة للسماح لالتصاق الخلايا إلى الجزء السفلي من الآبار.
  2. استخدم علامة حمراء غير متماسك الضوء (انظر الجدول للمواد) كمصدر الضوء بطول موجي 635 ± 10 نيوتن متر وقوة إخراج ثابتة ميغاواط 1,460 سم2.
  3. استخدم مقياس طاقة لقياس كثافة الطاقة من الضوء. تعرض إشعاعاً المطبق 87.6 ي سم-2، أي ما يعادل حوالي 1 دقيقة للتعرض. استخدام صيغة كثافة الطاقة (J/سم2) = كثافة الطاقة (W/سم2) × الوقت التشعيع (s). تطبيق على مسافة 5 ملم بين مصدر الضوء وبيوفيلم لتجنب الاحترار العينة.
  4. علاج في مراقبة إيجابية الأغشية الحيوية مع الكلورهيكسيدين 0.12 في المائة لمدة 1 دقيقة والأغشية الحيوية مراقبة سلبية بنسبة 0.89 في المائة كلوريد الصوديوم لمدة 1 دقيقة.
  5. وبعد العلاج، غسل جميع الأغشية الحيوية مرتين مع محلول كلوريد الصوديوم 0.89 في المائة.
  6. أضف 1 مل من 1640 RPMI مخزنة مع 3-(N-morpholino) حمض بروبانيسولفونيك (والمماسح) عند درجة الحموضة 7 للأغشية الحيوية واحتضان لوحات عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها.
  7. في الصباح، وتطبيق العلاجات نفس الخطوات 3.2 إلى 3.6، غسل الأغشية الحيوية مرتين مع 0.89% كلوريد الصوديوم، إضافة جديدة ربمي مخزنة مع والمماسح (1 مل، الأس الهيدروجيني 7) إلى الآبار واحتضان هوائيا في 37 درجة مئوية.
  8. وفي اليوم نفسه، بعد ح 6، فضح الأغشية الحيوية للضوء الأحمر. علاج في مراقبة إيجابية الأغشية الحيوية مع الكلورهيكسيدين 0.12 في المائة لمدة 1 دقيقة والأغشية الحيوية مراقبة سلبية بنسبة 0.89 في المائة كلوريد الصوديوم لمدة 1 دقيقة. وبعد العلاج، يغسل الأغشية الحيوية مرتين مع محلول كلوريد الصوديوم 0.89 في المائة.
  9. كرر الخطوات من 3.2 3.8 حتى تحقيق ح 48 بيوفيلم التنمية.
    ملاحظة: في الأساس، سيحدث معاملة واحدة في الصباح والآخر سوف يحدث في فترة ما بعد الظهر في نفس اليوم (عدا 6 ح).

4-تجهيز

  1. أضف 1 مل العقيمة 0.89% كلوريد الصوديوم إلى البئر لإزالة في بيوفيلم بخدش من شكل جيد باستخدام تلميح ماصة. إضافة بيوفيلم إزالة أنبوب عقيمة.
  2. أضف 1 مل آخر العقيمة 0.89% كلوريد الصوديوم إلى البئر. الصفر مرة أخرى وإضافة التعليق إلى الأنبوب نفسه لإجمالي حجم 2 مل.
  3. الوحدات المكونة للمستعمرة (زيمبابوي)
    1. قوة دوامة تعليق بيوفيلم لمدة 1 دقيقة. من تعليق بيوفيلم, استخدم قاسمة 0.1 مل لتمييع المسلسل.
    2. تمييع تعليق بيوفيلم من 10-1 إلى 10-4 في محلول كلوريد الصوديوم 0.89 في المائة.
    3. البذور 50 ميكروليتر من كل تخفيف إلى لوحات حزب العمل الديمقراطي واحتضان اللوحات في 37 درجة مئوية ح 48.
    4. عد المستعمرات وتطبيق الصيغة زيمبابوي/مل = عدد من المستعمرات x 10ن /q (n = تمييع؛ س = حجم المصنف).
  4. الوزن الجاف
    1. أنابيب ميكروسينتريفوجي وزنها والتسمية.
    2. من تعليق بيوفيلم, استخدام 0.1 مل لتحديد الوزن الجاف (الكتلة الحيوية).
    3. إضافة 1 مل إيثانول المطلقة قاسمة 0.1 مل من الأغشية الحيوية وتخزينها في-20 درجة مئوية ح 18. بعد ح 18، الطرد المركزي في س 10,000 ز لمدة 10 دقائق.
    4. تجاهل المادة طافية، ووضع الأنابيب في مجفف لتجف العينات لمدة أسبوع واحد وتزن أنابيب ميكروسينتريفوجي مرة أخرى.
  5. السكريات للذوبان في الماء (وسبس) والسكريات والقلويات القابلة للذوبان (ASPs)
    1. من تعليق بيوفيلم, قوة دوامة ما تبقى الحجم (1.8 مل) 1 دقيقة وأجهزة الطرد المركزي في 5,500 × ز لمدة 10 دقائق في 4 درجات مئوية. تخزين المادة طافية في أنبوب جديد ويغسل ترسبات مرتين مع الخلايا، والتي تحتوي على المكونات غير قابلة للذوبان من المصفوفة خارج الخلية مع الماء المعقم عالي النقاوة (5,500 × ز، 10 دقيقة في 4 درجات مئوية).
    2. إعادة تعليق المحتوى غير قابلة للذوبان في 1.8 مل الماء المعقم عالي النقاوة.
    3. السكريات للذوبان في الماء (وسبس)
      ملاحظة: إجراء هذه التجربة في غطاء دخان.
      1. من المادة طافية المخزنة، حجز 1 مل للتحديد الكمي للسكريات للذوبان في الماء (وسبس).
      2. مجانسة المادة طافية المخزنة لمدة 1 دقيقة. ثم نقل إلى أنابيب معقمة وإضافة مجلدات 2.5 من الإيثانول 95%. تخزين أنابيب لح 18 في-20 درجة مئوية لهطول الأمطار وسبس.
      3. بعد ح 18، الطرد المركزي هذه الأنابيب في س 9,500 ز لمدة 20 دقيقة في 4 درجات مئوية. بعد الطرد المركزي، تجاهل في سوبيرناتانتس.
      4. تغسل العينات ثلاث مرات مع الإيثانول 75% وأيردري الكريات. تعليق إعادة بيليه مع 1 مل الماء المعقم عالي النقاوة، وتحديد مقدار WSP استخدام الأسلوب حمض الكبريتيك الفينول.
      5. استخدام 0.1% جلوكوز (0.01 غرام السكر إلى 10 مل الماء عالي النقاوة) للمنحنى القياسي (0 و 2.5، 5، 10، 15، 20 و 25 ميكروليتر من الجلوكوز في الأنبوب).
      6. إضافة 200 ميليلتر من الفينول 5% (2.7 مل فينول 90% إلى 47.3 مل من الماء عالي النقاوة) إلى أنبوب زجاج تضم 200 ميكروليتر من العينة أو المنحنى المعياري نقطة (في ثلاث نسخ كل عينة) وتخلط بحذر.
      7. أضف 1 مل حامض الكبريتيك إلى الأنبوب ومزيج. الانتظار 20 دقيقة لرد الفعل وقياس العينات باستخدام جهاز المطياف الضوئي (490 نيوتن متر).
    4. السكريات والقلويات القابلة للذوبان (ASPs)
      ملاحظة: إجراء هذه التجربة في غطاء دخان.
      1. من مبلغ إعادة تعليق غير قابلة للذوبان، فصل 1 مل لتحديد ASPs. الطرد المركزي في مختبرين لكل تعليق بيوفيلم (13,000 س ز، لمدة 10 دقائق في 4 درجات مئوية).
      2. حذر إزالة المادة طافية من كل أنبوبة. ثم وضع العينات في مركز فراغ إلى الجاف الكريات.
      3. وزن الكريات وإضافة 300 ميليلتر من 1 N هيدروكسيد الصوديوم (2 غ من هيدروكسيد الصوديوم في 50 مل الماء عالي النقاوة) كل 1 ملغ الوزن الجاف. احتضان لهم ح 2 في 37 درجة مئوية وثم الطرد المركزي في × 13,000 ز لمدة 10 دقائق.
      4. حذر جمع supernatants ماصة ونقل إلى أنابيب ميكروسينتريفوجي، الحفاظ على بيليه.
      5. مرة أخرى، إضافة وحدة تخزين متساوية من هيدروكسيد الصوديوم ن 1 إلى أنابيب تتألف الكريات، وكرر نفس الخطوات أعلاه لاستخراج ASP.
      6. بعد حضانة ح 2، الطرد المركزي العينات (13,000 س ز لمدة 10 دقائق)، بعناية وجمع في سوبيرناتانتس وإضافة إلى سوبيرناتانتس التي تم جمعها سابقا.
      7. لاستخراج الثالثة، كرر نفس الخطوات كما أعلاه، لكن هذه المرة، لا احتضان العينات ح 2 قبل الطرد المركزي.
      8. وبعد ذلك إضافة ثلاثة مجلدات من الإيثانول 95% لكل عينة. ثم، الأسهم العينات من −20 درجة مئوية ح 18 لهطول الأمطار لآسيا والمحيط الهادئ.
      9. الطرد المركزي هذه الأنابيب (9,500 × ز لمدة 20 دقيقة عند 4 درجة مئوية) وتجاهل في سوبيرناتانتس.
      10. تغسل كل بيليه ثلاث مرات مع الإيثانول 75% وأيردري (فعلت نفس الإجراءات ل WSP). إعادة تعليق الكريات في تساوي إجمالي حجم الاستخراج الأولى مع هيدروكسيد الصوديوم ن 1.
      11. قراءة في النماذج للتحديد الكمي لآسيا والمحيط الهادئ باستخدام الفينول الكبريتيك (نفس أما بالنسبة لتحليل WSP).

النتائج

الشكل 2 يعرض نتائج سجل10 مليلتر زيمبابوي من المبيضة بعد العلاج المصروف مع الضوء الأحمر للضوء الأحمر 1 كحد أدنى إلى حد كبير سجل10 زيمبابوي/مل مقارنة NC (p = 0.004). ويبين الشكل 3 النتائج من الكتلة الأحيائية (ملغ) للأغشية الحيوية ال...

Discussion

الخطوات الأكثر أهمية لاستزراع ناجحة من بيوفيلم المبيضة : 1) للقيام بالعدوى قبل والعدوى في المتوسط YNB تكملة مع الجلوكوز 100 مم؛ 2) الانتظار 90 دقيقة لمرحلة الالتصاق وتغسل بعناية مرتين الآبار بنسبة 0.89 في المائة كلوريد الصوديوم لإزالة الخلايا غير التقيد بها؛ و 3) لإضافة المتوسطة ربمي في الخل?...

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgements

ونشكر الدكتور بولا دا سيلفيرا، كوستا الدكتور سيسيليا اتيم غونسالفس دي أروجو، ماولي شون م.، ماولي م. شين، جانال مالفين أ. د. والدكتور إيريانا زانن لتطوير هذه الدراسة. ونعترف أيضا الدكتور ألكسندر دال جونسون (UCSF) للتبرع إلى الضغط التي تم تحليلها في هذه الدراسة.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Clorhexidine 20% Sigma-AldrichC9394
Dextrose (D-Glucose) AnhydroousFisher ChemicalD16-500
Ethanol 200 proofDecon LaboratoriesDSP-MD.43
LumaCare LC-122 A LumaCare Medical Group, Newport Beach, CA, USA 
NaCl Fisher ChemicalS641-500
NaOH Fisher Bioreagents BP 359-500
Phenol 5%Milipore Sigma843984
RPMI 1640 buffered with 3-(N-morpholino)SigmaR7755
Sabouraud dextrose agar supplemented with chloramphenicolAcumedia7306A
Sulfuric acid Fisher ChemicalSA200-1
Yeast nitrogen base DifcoDF0392-15-9
3-(N-morpholino)propanesulfonic acid MOPSSigma-AldrichM1254
 24-well polystyrene plate Falcon353935

References

  1. Sardi, J. C. O., Scorzoni, L., Bernardi, T., Fusco-Almeida, A. M., Mendes Giannini, J. M. Candida species: current epidemiology, pathogenicity, biofilm formation, natural antifungal products and new therapeutic options. Journal of Medical Microbiology. 62 (Pt 1), 10-24 (2013).
  2. Harriott, M. M., Noverr, M. C. Candida albicans and Staphylococcus aureus form polymicrobial biofilms: effects on antimicrobial resistance. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 53 (9), 3914-3922 (2009).
  3. Srinivasan, A., Lopez-Ribot, J. L., Ramasubramanian, A. K. Overcoming antifungal resistance. Drug Discovery Today Technologies. 11, 65-71 (2014).
  4. Finkel, J. S., Mitchell, A. P. Genetic control of Candida albicans biofilm development. Nature Reviews Microbiology. 9 (2), 109-118 (2011).
  5. Zarnowski, R., et al. Novel entries in a fungal biofilm matrix encyclopedia. MBio. 5, e013333 (2014).
  6. Mitchell, K. F., et al. Community participation in biofilm matrix assembly and function. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (13), 4092-4097 (2015).
  7. Mitchell, K. F., Zarnowski, R., Andes, D. R. Fungal super glue: the biofilm matrix and its composition, assembly, and functions. PLoS Pathogens. 12, e1005828 (2016).
  8. Dai, T., et al. Blue light rescues mice from potentially fatal Pseudomonas aeruginosa burn infection: efficacy, safety, and mechanism of action. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 57 (3), 1238-1245 (2013).
  9. de Sousa, D. L., Lima, R. A., Zanin, I. C., Klein, M. I., Janal, M. N., Duarte, S. Effect of twice-daily blue light treatment on matrix-rich biofilm development. PLoS One. 10 (7), e0131941 (2015).
  10. Fontana, C. R., et al. The antibacterial effect of photodynamic therapy in dental plaque-derived biofilms. Journal of Periodontal Research. 44 (6), 751-759 (2009).
  11. Donlan, R. M., Costerton, J. W. Biofilms: survival mechanisms of clinically relevant microorganisms. Clinical Microbiology Reviews. 15 (2), 167-193 (2002).
  12. Panariello, B. H. D., Klein, M. I., Pavarina, A. C., Duarte, S. Inactivation of genes TEC1 and EFG1 in Candida albicans influences extracellular matrix composition and biofilm morphology. Journal of Oral Microbiology. 9 (1), 1385372 (2017).
  13. Gulati, M., Lohse, M. B., Ennis, C. L., Gonzalez, R. E., Perry, A. M., Bapat, P., Valle Arevalo, A., Rodriguez, D. L., L, D., Nobile, C. J. In vitro culturing and screening of Candida albicans biofilms. Current Protocols in Microbiology. 50 (1), e60 (2018).
  14. Roberts, A. E., Kragh, K. N., Bjarnsholt, T., Diggle, S. P. The limitations of in vitro experimentation in understanding biofilms and chronic infection. Journal of Molecular Biology. 427 (23), 3646-3661 (2015).
  15. Kucharíková, S., Tournu, H., Lagrou, K., Van Dijck, P., Bujdáková, H. Detailed comparison of Candida albicans and Candida glabrata biofilms under different conditions and their susceptibility to caspofungin and anidulafungin. Journal of Medical Microbiology. 60 (Pt 9), 1261-1269 (2011).
  16. Weerasekera, M. M., Wijesinghe, G. K., Jayarathna, T. A., et al. Culture media profoundly affect Candida albicans and Candida tropicalis growth, adhesion and biofilm development. Memórias Do Instituto Oswaldo Cruz. 111 (11), 697-702 (2016).
  17. Kadosh, D., Johnson, A. D. Induction of the Candida albicans filamentous growth program by relief of transcriptional repression: a genome-wide analysis. Molecular biology of the cell. 16 (6), 2903-2912 (2005).
  18. Paschoal, M. A., Lin, M., Santos-Pinto, L., Duarte, S. Photodynamic antimicrobial chemotherapy on Streptococcus mutans using curcumin and toluidine blue activated by a novel LED device. Lasers in Medical Science. 30 (2), 885-890 (2015).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

146

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved