A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
يمكن أن يؤثر فهم الهياكل الفسيولوجية والتشريحية الفريدة من الأخطبوط بشكل كبير على البحوث الطبية الحيوية. يوضح هذا الدليل كيفية إنشاء وصيانة بيئة بحرية لاستيعاب هذا النوع ويتضمن أحدث أساليب التصوير والتحليل لتصور تشريح الجهاز العصبي والأخطبوط ووظيفته.
وقد استلهمت العديد من التطورات في البحوث الطبية الحيوية من خلال اكتشاف الآليات التشريحية والخلوية التي تدعم وظائف محددة في أنواع مختلفة. الأخطبوط هو واحد من هذه الحيوانات الاستثنائية التي أعطت العلماء رؤى جديدة في مجالات علم الأعصاب والروبوتات والطب التجديدي والأطراف الاصطناعية. تتطلب الأبحاث التي أجريت مع هذا النوع من السيفالوبودات إنشاء مرافق معقدة وعناية مركزة لكل من الأخطبوط والنظام البيئي الخاص به وهو أمر بالغ الأهمية لنجاح المشروع. يتطلب هذا النظام أنظمة تصفية ميكانيكية وبيولوجية متعددة لتوفير بيئة آمنة ونظيفة للحيوان. وإلى جانب نظام التحكم، يلزم إجراء الصيانة والتنظيف الروتينيين المتخصصين للحفاظ على تشغيل المرفق على المدى الطويل. وينصح بتوفير بيئة غنية لهذه الحيوانات الذكية من خلال تغيير المناظر الطبيعية للخزان، ودمج مجموعة متنوعة من الفريسة، وإدخال مهام صعبة بالنسبة لهم للعمل من خلال. وتشمل نتائجنا التصوير بالرنين المغناطيسي والتصوير الذاتي للجسم كله، فضلا عن الدراسات السلوكية لفهم أفضل للجهاز العصبي. الأخطبوط تمتلك علم وظائف الأعضاء الفريدة التي يمكن أن تؤثر على العديد من مجالات البحوث الطبية الحيوية. إن تزويدهم بنظم إيكولوجية مستدامة هو الخطوة الحاسمة الأولى في الكشف عن قدراتهم المتميزة.
وغالبا ما تكون المفاهيم الجديدة في البحوث الطبية الحيوية والهندسة الطبية الحيوية مستوحاة من تحديد استراتيجيات محددة تمتلكها الأنواع البيولوجية لمعالجة الظروف والتحديات البيئية والفسيولوجية. فعلى سبيل المثال، أدى فهم خصائص الفلورسينس في اليراعات إلى استحداث أجهزة استشعار فلورية جديدة يمكنها الإبلاغ عن النشاط الخلوي في كائنات نموذجية أخرى(1)؛ وقد أدى تحديد القنوات الأيونية التي ينشطها الضوء في الطحالب إلى تطوير التشكيل الخلوي والزمني المحدد للضوء والعصبي2،3،4،5؛ اكتشاف البروتينات في سمك السلور الزجاجي التي تبحر وفقا للمجال المغناطيسي للأرض أدى إلى تطوير التعديل المغناطيسي العصبي6,7,8,9,10,11; فهم منعكس سيفون في Aplysia كان له دور فعال لفهم الأساس الخلوي للسلوك12,13,14.
يواصل الباحثون التوسع في صندوق أدوات الهندسة الحيوية والحيوية الحالي من خلال الاستفادة من نقاط القوة الفريدة ووجهات النظر الجديدة حول الوظائف الفسيولوجية التي تحتفظ بها أنواع المختبر غير التقليدية. وقد بدأت الوكالات الاتحادية في دعم خطوط الدراسات هذه من خلال تمويل الأعمال الجديدة التي أجريت على أنواع متنوعة.
جنس واحد من الحيوانات مع التشريح فريدة من نوعها وقدرات التجديد، فضلا عن السيطرة التكيفية لكل من ذراعيها، وعلماء الأحياء والمهندسين رائعة، والجماهير آسر من كل جزء من المجتمع هو Octopus17. في الواقع، تمت دراسة العديد من جوانب فسيولوجيا الأخطبوط وسلوكه على مدى العقود الماضية15،16،17،18،19،20،21،22،23،24،25،26 . ومع ذلك، فإن التطورات الأخيرة في البيولوجيا الجزيئية والتطورية، والروبوتات، وتسجيل الحركة، والتصوير، والتعلم الآلي، وعلم الفيزيولوجيا الكهربية تسرع الاكتشافات المتعلقة بعلم وظائف الأعضاء والسلوك الأخطبوط وتترجمها إلى استراتيجيات مبتكرة للهندسة الحيوية27،28،29،30،31،32،33،34،35 36,37,38,39.
هنا نحن نصف كيفية إعداد وصيانة تربية الأخطبوط ، والتي ستكون ذات أهمية وأهمية للعلماء والمهندسين من خلفيات مختلفة ، والمصالح العلمية ، والأهداف. ومع ذلك، تركز نتائجنا على تطبيق الأخطبوط في أبحاث علم الأعصاب والهندسة العصبية. الأخطبوط لديه جهاز عصبي متطور للغاية مع 45 مليون خلية عصبية في الدماغ المركزي، و 180 مليون خلية عصبية في الفصوص البصرية، و 350 مليون خلية عصبية إضافية في الحبال المحورية الثمانية والعصابات الطرفية. على سبيل المقارنة ، لديه عدد مماثل من الخلايا العصبية والقط فقط نصف ذلك40. على عكس الجهاز العصبي الفقاري ، لا يوجد سوى ألياف 32K فوثر و 140K afferent التي تربط الملايين من الخلايا العصبية في دماغ الأخطبوط بملايين الخلايا العصبية في كل من الحبال المحورية لذراعهم40،41،42. تشير هذه الألياف المترابطة القليلة نسبيا إلى أن معظم تفاصيل تنفيذ البرامج الحركية يتم إجراؤها في الحبل المحوري نفسه ، مع التأكيد على التحكم العصبي الموزع بشكل فريد الذي تمتلكه الأخطبوطات. أذرع الأخطبوط لديها مراقبة السيارات الدقيقة غير عادية تمكنهم من مهارات التلاعب مثل فتح أغطية جرة، حتى عندما تكون داخل الحاوية. هذه القدرة الحركية المتطورة للغاية هي فريدة من نوعها لفئة السيفالوبودات (الأخطبوط والحبار والحبار)43.
في الواقع ، من خلال مئات الملايين من السنين من التطور ، طور الأخطبوط جينوما رائعا ومتطورا ونظاما فسيولوجيا4344 ألهم تطورا وتقدما جديدا عبر المجالات العلمية والهندسية. على سبيل المثال ، يمكن أن تلتصق رقعة لاصقة مقاومة للماء استنادا إلى البنية التشريحية لمصاصي الأخطبوط بالأسطح الرطبة والجافة45 ؛ يمكن لمواد التمويه الاصطناعية المستوحاة من جلد الأخطبوط المموه تحويل سطح مسطح ثنائي الأبعاد إلى سطح ثلاثي الأبعاد مع نتوءات وحفر46. مصغرة الروبوتات لينة ومستقلة (أي، Octobots) التي يمكن أن تكون في المستقبل بمثابة أدوات جراحية داخل body47؛ كما تم تطوير ذراع (أي OctoArm) تعلق على robot48 مثل دبابة. وتستخدم أنواع كثيرة من الأخطبوط في البحوث الطبية الحيوية على سبيل المثال، الأخطبوط فولغاريس، الأخطبوط سينينسيس، الأخطبوط فاريابيليس، والأخطبوط bimaculoides (O. bimaculoides)؛ وO. vulgaris وO. bimaculoides كونها الأكثر شيوعا34,49,50. التسلسل الأخير لجينوم الأخطبوط المختلفة يجعل هذا الجنس من أهمية خاصة ويفتح آفاقا جديدة في البحوث الأخطبوط34,43,51,52.
O. bimaculoides المستخدمة في إعداد لدينا هو نوع متوسط الحجم من الأخطبوط، اكتشفت لأول مرة في عام 1949، التي يمكن العثور عليها في المياه الضحلة قبالة ساحل شمال شرق المحيط الهادئ من وسط كاليفورنيا إلى جنوب شبه جزيرة باخا كاليفورنيا17. يمكن التعرف عليه من خلال بقع العيون الزائفة على عباءته تحت عينيه. بالمقارنة مع الأخطبوط المحيط الهادئ العملاق (Enteroctopus dofleini) والأخطبوط المشترك (O. vulgaris) ، فإن الأخطبوط ذو البقعتين في كاليفورنيا (O. bimaculoides) صغير الحجم نسبيا ، بدءا من أصغر من بضعة سنتيمترات ، وينمو بسرعة كحدث. عندما تثار داخل المختبر، يمكن أن ينمو حجم عباءة الكبار إلى متوسط حجم 100 سم وتزن ما يصل إلى 800 g53،54. الأخطبوط لديها فترة نمو سريع خلال أول 200 يوم. بحلول ذلك الوقت ، يعتبرون بالغين ويستمرون في النمو طوال بقية حياتهم55،56،57. الأخطبوط يمكن أن يكون أكل لحوم البشر، وخصوصا عندما يتم إيواء كلا الجنسين معا داخل دبابة. لذلك، فإنها تحتاج إلى أن يسكن بشكل فردي في خزانات منفصلة58.
تمت الموافقة على جميع الدراسات الحيوانية من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (IACUC) من جامعة ولاية ميشيغان.
1. معدات خزان الأخطبوط انشاء
الشكل 1: إعداد خزان الأخطبوط. مدخل المياه ومنفذ (أ). ثلاثة خزانات الأخطبوط مع كل مساحة 1.22 م × 0.3 م (ب). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: نظام سومب. عرض جانبي لنظام sump (أ). أعلى عرض لنظام مستنقع (ب). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: حوض السمك مع نظام تصفية مستنقع تحت الخزان ووحدات التحكم البيئي. تشير الأسهم الخضراء إلى اتجاه تدفق المياه عبر النظام. المياه المتدفقة من القسم الأول إلى القسم الثاني لالتبريد وعلى ثلاثة لفصل المادة البيولوجية الثقيلة عن المادة الأخف وزنا. تطفو النفايات الثقيلة إلى الأسفل والخروج إلى القسم الخامس بينما تتدفق المادة البيولوجية الأصغر إلى فلتر الجوارب داخل القسم الرابع. تتدفق المياه من أربعة تحت القسم الخامس تدخل مقشط البروتين في ستة لإزالة النفايات المتبقية داخل الماء. بن الطحالب يحتوي على الكائنات الحية الدقيقة لكسر النفايات والأمونيا والنترات، فضلا عن أكسجين المياه. في الجزء الأخير من النظام، يتم إضافة المزيد من المياه لحساب التبخر قبل ضخها مرة أخرى إلى الخزان. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
2. صهاريج التخزين
3. إعداد خزان الطعام
4. إدخال الأخطبوط إلى الخزان
5. الرعاية اليومية
6. الصرف الصحي الأسبوعي
الشكل 4: خزان لسرطانات الكمان (Minuca pugnax). الجزء السفلي من الخزان نصف مخصص للسرير الجاف والنصف الآخر ل2 سم من المياه المالحة الضحلة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: خزان للجمبري الشبح (Palaemonetes paludosus). الصخور في خزان الروبيان توفر أماكن للجمبري للاختباء والسكب وكذلك لنمو الكائنات الحية الدقيقة. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
7. رعاية الحيوانات غير الصحية
8. تخدير الأخطبوط
9. القتل الرحيم الأخطبوط
10. سلوك O. bimaculoides
11. التصوير بالرنين المغناطيسي الأخطبوط
ملاحظة: في السابق، تم قياس استجابات التصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفية في شبكية العين الأخطبوط في الحيوانات المخدرة70. هنا، حصلنا على التصوير بالرنين المغناطيسي عالية الدقة المكانية فائقة من الجهاز العصبي الأخطبوط التي تتطلب ساعات من المسح الضوئي. وهكذا، تم تنفيذ هذا في القتل الرحيم O. bimaculoides.
12. التصوير المقطعي المضان بالتبريد (CFT)
تم الحصول على جميع الحيوانات في دراساتنا من البرية ، وبالتالي لم يكن من الممكن تحديد عمرها بالضبط وكانت إقامتها في المختبر متغيرة. لوحظت حالة الأخطبوط يوميا. لم نرى الطفيليات أو البكتيريا أو تلف الجلد أو السلوك غير الطبيعي. وكان متوسط وزن الحيوانات 170.38 +/- 77.25 غرام. كل يسكن خزان سعة 40 جالون خ?...
إعداد النظام:
وقد تم تطوير النظام الإيكولوجي الحوض بطريقة تستخدم كل من الطرق الميكانيكية والبيولوجية لتصفية واكسجين المياه. تستخدم عناصر التصفية في النظام مرشحات الجوارب ، وكشطات البروتين ، والتنظيف المنتظم للحفاظ على مستويات النيتروجين والأوكسجين. والأهم من ذلك، أننا نعتمد ...
جميع المؤلفين يعلنون عدم وجود تضارب في المصالح.
وقد تم دعم هذا العمل من قبل NIH UF1NS115817 (G.P.). يتم دعم G.P. جزئيا من قبل المعاهد القومية للصحة منح R01NS072171 و R01NS098231. نود أن نشكر باتريك زاكرزيكي ومحمد فرهود من شركة "تنبعث منها" على المساعدة والدعم في جمع وتصور البيانات على منصة صور Xerra. MSU لديها اتفاق بحثي مع بروكر Biospin.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
1-3/4 in. Drill Bit | Home Depot | 204074205 | Glass cutting tool Part number:1 |
1" flow sensors | Neptune Systems | Local Dealer | Pipe with sensor to measure water flow Part number:2 |
1" Slip Bulkhead Strainer | Bulk Reef Supply | 207113 | Strainer for water leaving tank Part number:3 |
10 gallon tank | Pruss Pets | Local Dealer | Fiddler crab holding tank Part number:4 |
4 inch X 12 inch 200 Micron Nylon Monofiliment Mesh Filter Sock w/ Plastic Ring | AQUAMAXX | UJ41171 | Filter for large organic matter in sump Part number:5 |
40 gallon aquarium | Pruss Pets | Local Dealer | 4 Food aquarium tanks Part number:6 |
60g poly tanks - rectangle | Pruss Pets | Local Dealer | 2 Water Storage (salt and freshwater) Part number:7 |
Active Aqua 1/10th HP Hydroponic or Aquarium Chiller 2018 Model | WayWe | 719574198463 | For cooling water continuously Part number:8 |
ALAZCO 2 Soft-Grip Handle Heavy-Duty Tile Grout Brush | ALAZCO | B06W2FT5V5 | Tank Cleaning Part number:9 |
Ammonia Testing Kit | Aquarium Pharmaceuticals | 33D | For water testing Part number:10 |
Apex system WiFi | Neptune Systems | Local Dealer | System connection for off site monitoring Part number:11 |
API Aquarium Test Kit | Amazon | B001EUE808 | For water testing Part number:12 |
API Copper Test Kit | Amazon | B0006JDWH8 | For water testing Part number:13 |
Aqua Ultraviolet Classic UV 25 Watt Series Units | Aqua Ultraviolet | A00028 | For removing bacteria leaving sump system Part number:14 |
AquaClear 50 Foam Filter Inserts, 3 pack | Aquaclear | A1394 | Food Tank Carbon Filter Inserts Part number:15 |
Aqueon QuietFlow LED PRO Aquarium Power Filter 30 | Aqueon | 100106082 | Food tank filtering units Part number:16 |
Auto Top Off Kit (ATK) (Each includes 1 FMM module, 2 optical sensors and 1 float) | Neptune Systems | Local Dealer | For freshwater tank Part number:17 |
Automatic top off from RODI (LLC) | Neptune Systems | Local Dealer | From water storage to octopus tanks Part number:18 |
Banded Trochus Snail | LiveAquaria | CN-112080 | For algae bin Part number:19 |
Chaetomorpha Algae, Aquacultured | LiveAquaria | BVJ-76354 | For algae bin Part number:20 |
Clams - Live, Hard Shell, Cherrystone, Wild, USA Dozen | Fulton Fish Market | N/A | Live food Part number:21 |
Classic Sea Salt Mix - Tropic Marin | Bulk Reef Supply | 211813 | Salt for tank water Part number:22 |
Clear Masterkleer Soft PVC Plastic Tubing, for Air and Water, 3/4" ID, 1" OD | McMaster | 5233K71 | Cleaning tool Part number:23 |
Continuum Aquablade-P Acrylic Safe Algae Scraper W/ Plastic Blade - 15 Inch | Marine Depot | 4C31001 | Cleaning tool Part number:24 |
Copper Testing Kit | Aquarium Pharmaceuticals | 65L | For water testing Part number:25 |
Curve Refugium CREE LED Aquarium Light | Eshopps | 6500K | Algae bin light Part number:26 |
Eheim 1262 return pumps | EHEIM | 1250219 | Pump for storage tanks Part number:27 |
Eshopps R-100 Refugium Sump GEN 3 | Eshopps | 15000 | Sump system Part number:28 |
Ethyl Alcohol, 200 Proof | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | Anesthesia Part number:29 |
Extech DO600 ExStik II Dissolved Oxygen Meter | Extech | DO600 | Oxygen measurment Part number:30 |
Fiddler Crabs; live; dozen | NORTHEAST BRINE SHRIMP | N/A | Live food Part number:31 |
Filter Cartrages | Aqueon | 100106087 | Food tank filters Part number:32 |
Florida Crushed Coral Dry Sand - CaribSea | Bulk Reef Supply | 212959 | Sedimate for bottom of tank Part number:33 |
FMM module | Neptune Systems | Local Dealer | Controller for apex system Part number:34 |
Fritz-Zyme TurboStart 900 - Fritz | Bulk Reef Supply | 213036 | Bacteria start Part number:35 |
Hand Operated Drum Pump, Siphon, Basic Pump with Spout, For Container Type Bucket, Pail | Granger | 38Y789 | Water Hand Pump Part number:36 |
High pH Testing Kit | Aquarium Pharmaceuticals | 27 | For water testing Part number:37 |
Imagitarium Fine Mesh Net for Shrimp | Petco | 2580993 | Shrimp and fish transfer net Part number:38 |
Leak Detection Kit (LDK) - Includes FMM module plus 2 ALD sensors | Neptune Systems | Local Dealer | Placed on floor to detect water Part number:39 |
Lee`S Algae Scrubber Pad Jumbo - Glass | Marine Depot | LE12007 | Cleaning tool Part number:40 |
Live rocks | Pruss Pets | Local Dealer | Habitat for octopus Part number:41 |
Long Bottle Cleaning Brush 17" Extra Long | Haomaomao | B07FS7J7PN | Tank Cleaning Part number:42 |
Magnesium chloride | Sigma-Aldrich | M1028-100ML | Euthanasia Part number:43 |
Magnetic Probe Rack | Neptune Systems | Local Dealer | For holding apex sensor probes Part number:44 |
Marine Ghost Shrimp | NORTHEAST BRINE SHRIMP | N/A | Live food Part number:45 |
Marineland C-Series Canister Carbon Bags Filter Media, 2 count | Chewy | 98331 | For elevated copper levels Part number:46 |
Nitra-Zorb Bag | Aquarium Pharmaceuticals | AP2213 | Absorbes nirtogen compounds Part number:47 |
Nitrate Testing Kit | Aquarium Pharmaceuticals | LR1800 | For water testing Part number:48 |
Nitrite Testing Kit | Aquarium Pharmaceuticals | 26 | For water testing Part number:49 |
Pawfly 2 Inch Air Stones Cylinder 6 PCS Bubble Diffuser Airstones for Aquarium Fish Tank Pump Blue | Amazon | B076S56XWX | Aierating water Part number:50 |
Penn Plax Airline Tubing for Aquariums –Clear and Flexible Resists Kinking, 8 Feet Standard | Amazon | B0002563MM | Tubing for connecting air pump to air stone Part number:51 |
Plumbing with unions/valves plus 3/4" flex hose | Pruss Pets | Local Dealer | Water transport Part number:52 |
PM1 module | Neptune Systems | Local Dealer | Power control module for apex Part number:53 |
Protein skimmer | Reef Octopus | AC20284 | Removes biowaste from system Part number:54 |
PVC Apex Mounting board, grommets, wire mounts | Neptune Systems | Local Dealer | Helps ensure organization for wires and tubing within system Part number:55 |
PVC Regular Cement and 4-Ounce NSF Purple Primer | Amazon | Oatey - 30246 | For connecting PVC pipes Part number:56 |
RODI unit | Neptune Systems | Local Dealer | RO Water Part number:57 |
Salinity Probes | HANNA probes | HI98319 | Measures salinity of water Part number:58 |
Seachem Pristine Aquarium Treatment | Sea Chem | 1438 | Provides bacteria that break down excess food, waste and detritus Part number:59 |
Seachem Stability Fish Tank Stabilizer | Sea Chem | 116012607 | Seachem Stability will rapidly and safely establish the aquarium biofilter in freshwater and marine systems Part number:60 |
Set of lexan tops | Pruss Pets | Local Dealer | Aquarium tank lids Part number:61 |
Set of Various extended length aquabus cables | Neptune Systems | Local Dealer | Cables for Apex system Part number:62 |
SLSON Aquarium Algae Scraper Double Sided Sponge Brush Cleaner Long Handle Fish Tank Scrubber for Glass Aquariums | Amazon | B07DC2TZCJ | Cleaning tool Part number:63 |
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, 45 Degree Elbow Adapter, 3/4 Socket Female x 3/4 Socket Male | McMaster | 4880K189 | PVC pipe Part number:64 |
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, 90 Degree Elbow Adapter, 1 Socket Female x 1 Socket Male | McMaster | 4880K773 | PVC pipe Part number:65 |
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, Adapter, 1 Socket-Connect Female x 1 Barbed Male | McMaster | 4880K415 | PVC pipe Part number:66 |
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, Straight Reducer, 2 Socket Female x 3/4 Socket Female | McMaster | 4880K008 | PVC pipe Part number:67 |
Standard-Wall PVC Pipe Fitting for Water, Tee Connector, White, 1 Size Socket-Connect Female | McMaster | 4880K43 | PVC pipe Part number:68 |
Standard-Wall Unthreaded Rigid PVC Pipe for Water, 1 Pipe Size, 10 Feet Long | McMaster | 48925K13 | PVC pipe Part number:69 |
Standard-Wall Unthreaded Rigid PVC Pipe for Water, 3/4 Pipe Size, 5 Feet Long | McMaster | 48925K92 | PVC pipe Part number:70 |
Structural FRP Fiberglass Sheet, 48" Wide x 96" Long, 1/4" Thick | McMaster | 8537K15 | Table top material Part number:71 |
Structural FRP Fiberglass Square Tube, 10 Feet Long, 2" Wide x 2" High Outside, 1/8" Wall Thickness | McMaster | 8548K33 | Structural table materal Part number:72 |
Tank Sediment | TopDawg Pet Supply | 8479001207 | Sediment for bottom of fiddler crab tank Part number:73 |
Temperature probe | Neptune Systems | Local Dealer | Temperature probe for tanks Part number:74 |
Tetra TetraMarine Large Saltwater Flakes for all Marine Fish | Amazon | B00025K0US | Fish, shrimp, and crab food Part number:75 |
Tetra Whisper Aquarium Air Pump for 10 gallon Aquariums | Petco | 2335234 | Air pump for smaller tanks Part number:76 |
Thick-Wall Through-Wall Pipe Fitting, for Water, PVC Connector, 1 Socket-Connect Female | McMaster | 36895K843 | PVC pipe Part number:77 |
Vectra s2 pump | Bulk Reef Supply | 212141 | Aquarium Pump Part number:78 |
Water Pump | TACKLIFE | GHWP1A | Pump for cleaning tanks Part number:79 |
Wyze Cam v2 1080p HD Indoor WiFi Smart Home Camera with Night Vision | Amazon | B076H3SRXG | DeepLabCut Recording Part number:80 |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved