إنشاء وتقييم نموذج مرض الكسب غير المشروع في الوريد الخنزير

Summary

في هذا البروتوكول ، تم إجراء تطعيم مجازة وريد الخنزير الجديد من خلال شق صغير في جدار الصدر الأيسر دون المجازة القلبية الرئوية. تم إجراء دراسة علم الأمراض بعد العملية الجراحية ، والتي أظهرت سماكة intimal.

Abstract

مرض الكسب غير المشروع الوريدي (VGD) هو السبب الرئيسي لفشل ترقيع مجازة الشريان التاجي (CABG). هناك حاجة إلى نماذج حيوانية كبيرة من CABG-VGD للتحقيق في آليات المرض وتطوير الاستراتيجيات العلاجية.

لإجراء الجراحة ، ندخل غرفة القلب من خلال الفضاء الوربي الثالث ونقوم بتشريح الوريد الثديي الداخلي بعناية ونغمره في محلول ملحي طبيعي. ثم يتم علاج الشريان التاجي الرئيسي الأيمن لنقص التروية. يتم شق الوعاء المستهدف ، ويتم وضع سدادة تحويلة ، ويتم مفاغرة الطرف البعيد من الوريد الكسب غير المشروع. يتم حظر الشريان الأورطي الصاعد جزئيا ، ويتم مفاغرة الطرف القريب من الوريد الكسب غير المشروع بعد الانثقاب. يتم فحص الوريد الكسب غير المشروع بحثا عن المباح ، ويتم ربط الشريان التاجي الأيمن القريب.

يتم إجراء جراحة تحويل مسار الشريان التاجي في الخنازير الصغيرة لحصاد الوريد الثديي الداخلي الأيسر لاستخدامه كطعم وعائي. تستخدم اختبارات المصل البيوكيميائية لتقييم الحالة الفسيولوجية للحيوانات بعد الجراحة. يظهر الفحص بالموجات فوق الصوتية أن الطرف القريب والأوسط والبعيد لوعاء الكسب غير المشروع لا يعوقه. في النموذج الجراحي ، لوحظ تدفق الدم المضطرب في الكسب غير المشروع عند الفحص النسيجي بعد جراحة تحويل مسار الشريان التاجي ، ولوحظ تضيق الكسب غير المشروع الوريدي المرتبط بتضخم الدم الداخلي في الكسب غير المشروع. توفر الدراسة هنا إجراءات جراحية مفصلة لإنشاء نموذج VGD الناجم عن تحويل مسار الشريان التاجي القابل للتكرار.

Introduction

على الرغم من انخفاض معدل وفيات أمراض القلب التاجية بشكل كبير في السنوات الأخيرة ، إلا أن نصف البالغين في منتصف العمر في الولايات المتحدة يصابون بأعراض مرتبطة بالقلب الإقفاري كل عام ، ويموت ثلث كبار السن بسبب أمراض القلب التاجية¹. تطعيم مجازة الشريان التاجي (CABG) هو طريقة جراحية فعالة لتحسين نقص تروية عضلة القلب ، والأهم من ذلك ، أنها طريقة جراحية لا يمكن الاستغناء عنها لعلاج مرض الشريان التاجي متعدد الأوعية². ومع ذلك ، بمرور الوقت ، تتطور الطعوم الوعائية إلى التهاب وتضخم داخلي وتصلب الشرايين التدريجي ، والذي من المعروف أنه يؤدي إلى فشل ترقيع الوريد أو مرض ترقيع الوريد (VGD) ³. في المرضى بعد تحويل مسار الشريان التاجي ، إذا حدث عودة التضيق ، يمكن استبدال الأوعية الدموية المريضة فقط في بعض الحالات². المرضى الأكبر سنا والأمراض المصاحبة المضافة تجعل إعادة تطعيم مجازة الشريان التاجي أمرا صعبا للغاية. يعد تأخير أو السيطرة على المشاكل المرضية المرتبطة بالأوعية الدموية المطعمة مشكلة ملحة يجب حلها. هناك حاجة إلى نماذج حيوانية كبيرة من CABG-VGD للتحقيق في آليات المرض وتطوير الاستراتيجيات العلاجية. نجح الباحثون في إنشاء نماذج VGD الحيوانية في الحيوانات الصغيرة والكبيرة مثل الفئران⁴ والجرذان⁵ والأرانب⁶ والخنازير⁷. بالمقارنة مع الحيوانات الصغيرة ، فإن الحيوانات الكبيرة مثل الخنازير لها هياكل تشريحية وخصائص فسيولوجية مشابهة للبشر ولها عمر أطول ^8,9. وبالتالي ، فإن الحيوانات الكبيرة أكثر ملاءمة لاستكشاف التغيرات المرضية طويلة الأجل في مرض الكسب غير المشروع الوريدي وللاختبار قبل السريري للأدوية أو الأجهزة. لقد طبقنا نحن وفريقنا المتعاون بنجاح التقنيات الجراحية لإنشاء نموذج قصور القلب الخنازير ووصفنا التغيرات المرضية القلبية في هذا النموذج¹⁰.

تم توحيد جراحة تحويل مسار الشريان التاجي في الممارسة السريرية ، ولكن عندما يتم تطبيقها على إنشاء نماذج حيوانية VGD ، فإن الاختلافات بين الأنواع ، واقتناء المعدات والمرافق الحيوانية ، والعمليات الجراحية للحيوانات ، وتغذية الحيوانات والتمريض تشكل تحديات كبيرة للباحثين. كما هو الحال في الممارسة السريرية ، فإن مناهج جراحة تحويل مسار الشريان التاجي المستخدمة لإنشاء نماذج حيوانية VGD تشمل بضع القص في خط الوسط¹¹ وبضع الصدر الجانبي الأيسر¹². يستخدم بضع القص في خط الوسط بشكل أكثر شيوعا^13,14. ومع ذلك ، فإن هذا النهج ينطوي على مخاطر عالية لكل من البشر والحيوانات. في الدراسة التي أبلغ عنها ثانكام وآخرون ، توفي اثنان من الخنازير الستة المستخدمة في النمذجة أثناء الجراحة¹⁵. ارتفاع معدل وفيات النموذج يزيد من تكاليف الدراسة ويؤثر على دقة النتائج. أظهرت دراسة في وقت سابق أن شق جدار الصدر الأيسر كان ممكنا لإنشاء VGD الناجم عن تحويل مسار الشريان التاجي في الخنازير¹¹. هنا ، تهدف هذه الدراسة إلى وصف بروتوكول خطوة بخطوة لإنشاء جراحة قابلة للتكرار لنموذج VGD الناجم عن تحويل مسار الشريان التاجي في الخنازير الصغيرة وتقييم النمط الظاهري لهذا النموذج. تم تصميم البروتوكول التجريبي بشكل مشترك من قبل فرق جراحة القلب والتخدير. تم تحديد النهج الجراحي للمساحة الوربية الثالثة اليسرى وفقا لجثث الخنازير الصغيرة الأخرى في المختبر قبل الجراحة ، وتم إجراء طريقة التخدير وفقا للطريقة المستخدمة في المركز¹⁶. تم إجراء اختبارات الكيمياء الحيوية في الدم والفحص بالموجات فوق الصوتية وفحص الأنسجة لتقييم النماذج الحيوانية.

Protocol

تمت الموافقة على إجراءات رعاية واستخدام المختبر من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات التابعة لمعهد مراقبة المختبر في قوانغدونغ. أجريت جميع التجارب وفقا لدليل رعاية واستخدام المختبر (الطبعة 8 ، 2011 ، المجلس القومي للبحوث ، الولايات المتحدة الأمريكية). يوضح الشكل 1 الإجراء الجراحي.

1. إعداد الحيوانات قبل الجراحة

1. قسم عشوائيا 10 خنازير صغيرة تبلغ من العمر 3 أشهر تزن 30-35 كجم إلى مجموعة وهمية (ن = 5) ومجموعة VGD (ن = 5).
2. تقييم الظروف الصحية قبل الجراحة وبعد العملية الجراحية للخنازير باستخدام مؤشر كتلة الجسم (BMI). احسب مؤشر كتلة الجسم على النحو التالي:
   مؤشر كتلة الجسم = وزن الجسم (كجم) / (طول الجسم [سم] × طول الجسم [سم])
   ملاحظة: يتم قياس طول الجسم من أنف الخنزير إلى قاعدة الذيل.
3. صوم الحيوانات لمدة 12 ساعة قبل الجراحة لتجنب الشفط بعد التخدير. قم بإعداد أجهزة التخدير والأدوات الجراحية ، بما في ذلك آلة التخدير ، والغاز ، وأدوية التخدير ، وخط أنابيب التخدير ، ومنظار الحنجرة الخاص ، والأدوات الجراحية ، ومثبت الضلع ، والخيوط الجراحية ، والغدة الدرقية ، والملقط الجراحي ، إلخ. تعقيم جميع الأدوات لاستخدامها في الجراحة.

2. إعداد الحيوانات للجراحة

1. وزن الحيوانات وحساب جرعة التخدير. يتم تطبيق الخليط المخدر المكون من 2 ملغ/ كغ من 1:1 تيلتامين وزولازيبام، 0.2 ملغ/كغ ديازيبام، 0.02 ملغ/كغ أتروبين¹⁷. استخدم الفنتانيل (50 مجم / كجم) لتخفيف الألم أثناء العملية³⁰.
2. تأكد من تحقيق مستوى مخدر مناسب وأدخل قسطرة وريدية ساكنة (20G) في وريد الأذن الهامشي لإنشاء وصول الأذن. نقل الخنزير على طاولة العمليات ووضعه في وضع ضعيف. شل حركة الأطراف بالضمادات وارفع الرأس بستارة معقمة.
   ملاحظة: تمت مراقبة حالة التخدير عن طريق التثبيت المركزي لمقلة العين ، والحدقة ، وفقدان منعكس الحدقة ، وفقدان منعكس الألم.  تم الحفاظ على معدل ضربات القلب وضغط الدم عند مستوى أقل من خط الأساس. يجب على الجراح مراقبة HR و BP والمعلمات الأخرى تحت الشلل وزيادة جرعة التخدير إذا زادت الموارد البشرية > 20٪ فوق خط الأساس.
3. فضح لسان المزمار والمزمار باستخدام منظار الحنجرة البيطري. إجراء التنبيب الرغامي مع أنبوب 7.0-7.5Fr وتوصيله إلى دائرة التنفس التخدير.
   ملاحظة: يستخدم جهاز التنفس الصناعي للتهوية المستمرة بالضغط الإيجابي مع حجم المد والجزر 280 مل ، ونسبة الشهيق / الزفير 1: 2 ، ومعدل التنفس 20 مرة / دقيقة ، وضغط الزفير النهائي الإيجابي (5 سم H₂O).
4. حقن بروميد الفيكورونيوم عن طريق الوريد (0.1 ملغم / كغم) لإرخاء العضلات أثناء العمليات الجراحية واستخدام 2٪ إيزوفلوران للحفاظ على التخدير بمعدل تنفس 16-20 نبضة في الدقيقة وحجم المد والجزر 10 مل / كغ.
   ملاحظة: يتم إعطاء Vecuronium لضمان عمق كاف للتخدير في الحيوانات المشلولة ، خاصة وأن جرعة الدواء التعريفي والإيزوفلوران في الطرف الأدنى من الموصى بها.
5. استخدم مرهم الطبيب البيطري على عيون الخنزير لمنع الجفاف أثناء التخدير. استخدم البطانيات الكهربائية للحفاظ على درجة حرارة جسم الخنزير عند 38 درجة مئوية ± 5 درجات مئوية.
6. استخدم مخطط كهربية القلب لمراقبة معدل ضربات القلب ومستويات الأكسجين في الدم ودرجة حرارة الجسم.

3. العمليات الجراحية

1. حلق جدار الصدر الأيسر وتطبيق ثلاث جولات متناوبة من 0.7 ٪ من اليود و 75 ٪ من الكحول لإعداد المنطقة الجراحية بشكل معقم حتى زاوية الفك السفلي الأيسر ، وصولا إلى الحبل السري ، واليسار إلى الخط الإبطي الخلفي ، واليمين إلى الجبهة الإبطية. ضع ستارة جراحية معقمة حول المنطقة الجراحية.
2. قم بعمل شق عرضي 7-10 سم بسكين كهربائي في الفضاء الوربي الأيسر الثالث وافصل الأنسجة تحت الجلد طبقة تلو الأخرى (الشكل 2 أ). قم بإزالة جزء 5-6 سم من الضلع الثالث بمقص عظمي وفضح الوريد الثديي الداخلي بواسطة ضامد بعد تعريض المفصل الضلعي القصي الثالث (الشكل 2 ب).
3. حدد موقع الوريد الثديي الداخلي جنبا إلى جنب مع الشريان الثديي الداخلي الأيسر على الجانب الأيسر من القص. إجراء تشريح حاد للوريد الثديي الداخلي مع ملقط الأوعية الدموية.
4. أداء الارقاء عن طريق التخثير الكهربائي لفروع الوريد الثديي الداخلي الأيسر بسكين كهربائي. إذا كان الإرقاء غير مكتمل ، فاستخدم ربط خيوط القطن للإرقاء. ربط طرفي الوريد ووضع علامة عليهما أثناء حصاده (الشكل 2 ج).
5. تحضير محلول ملحي عادي للهيبارين بإضافة 2 مل من محلول الهيبارين الصوديوم و 98 مل من محلول ملحي عادي. بعد إزالة الوريد ، قم بحقن محلول ملحي طبيعي من الهيبارين في الوريد للمعالجة المسبقة (الشكل 2 د). ثم ضع الوريد في محلول ملحي طبيعي واحتفظ به للنسخ الاحتياطي.
6. قم بعمل شق مماثل كما هو موضح أعلاه وقم بإزالة الوريد الثديي الداخلي في المجموعة الوهمية. افتح التامور ، ثم أغلق جدار الصدر في المجموعة الوهمية. استخدم الوريد الثديي الداخلي للمجموعة الوهمية للسيطرة المرضية دون تطعيم مجازة الشريان التاجي.
7. قم بعمل شق ~ 7 سم بسكين كهربائي على التامور لفضح جذع الشريان التاجي الأيمن. تعليق التامور وخياطة على الجلد على الجانب المماثل مع الغرز الجراحية 1-0 (الشكل 2E). افصل جذع الشريان التاجي الأيمن عن الأنسجة المحيطة (الشكل 2E).
8. تجاوز الشريط المانع تحت الطرف القريب من الشريان التاجي الأيمن المعزول بالقرب من الشريان الأورطي بخطاف سلكي وعالج عضلة القلب بثلاث دورات من نقص التروية لمدة دقيقتين و 5 دقائق من إعادة التروية عن طريق شد وتخفيف الشريط المانع (الشكل 2F). راقب النشاط الكهربائي للقلب باستخدام جهاز تخطيط كهربية القلب أثناء التكييف المسبق لنقص التروية / إعادة التروية (الشكل 2G).
   ملاحظة: عندما يتم حظر الشريان التاجي الأيمن ، يظهر مخطط كهربية القلب زيادة في معدل ضربات القلب وارتفاع الجزء ST.
9. شد الرباط لمنع تدفق الدم التاجي الأيمن. قطع النخاب الذي يغطي الأوعية الدموية. كشف جدار الشريان التاجي ، وقطع طوليا مع طرف شفرة جراحية ضد مركز الجدار الأمامي للأوعية الدموية.
10. بعد قطع التجويف ، قم بتكبير الشق بالمقص وضع تحويلة تاجية. أدخل أحد طرفي التحويلة بملف في الشريان التاجي البعيد من خلال التمزق. قم بتحويل الدم في الشرايين التاجية إلى التحويلة التاجية المجوفة لضمان مجال جراحي واضح (الشكل 2H).
11. قم بإجراء خياطة مستمرة من طرف إلى جانب بين الوريد الثديي الداخلي والجذع التاجي الأيمن باستخدام خياطة البولي بروبلين 7-0 (الشكل 2I). في منتصف الشريان الأورطي الصاعد ، اسد الجدار الأمامي الجانبي الأيسر للشريان الأورطي الصاعد بمشبك شبه انسداد.
12. استخدم شفرة جراحية لعمل شق صغير في جدار الأبهر حيث تم قطع adventitia ، وأدخل نهاية رأس العمود المنزلق في نهاية رأس الثقب في تجويف الأبهر من خلال هذا الشق ، واقبض العمود المنزلق للخارج ، وقطع السكين الدائري فوقه قطعة من جدار الشرايين. يبلغ قطر كتلة الأنسجة المقطوعة بواسطة الثقب حوالي 3 مم (الشكل 2J).
13. اسحب التحويلة. قم بإجراء خياطة مستمرة من طرف إلى جانب بين الوريد الثديي الداخلي وجدار الأبهر باستخدام خياطة البولي بروبلين 6-0 (الشكل 2K). افتح مشبك شبه الانسداد.
14. سجل التدفق الجانبي لجذع الشريان التاجي الأيمن القريب من موقع المفاغرة باستخدام الموجات فوق الصوتية. راقب النشاط الكهربائي للقلب باستخدام مخطط كهربية القلب (الشكل 2L).
15. أدخل أنبوب تصريف مؤقت (Fr: 16) في تجويف الصدر للسماح بتصريف الدم والسوائل. قم بخياطة شق التامور باستخدام خيط قطني 1-0 وأغلق طبقة الصدر بطبقة (من الداخل إلى الخارج: طبقة غشاء الجنب ، طبقة العضلات ، طبقة الأنسجة تحت الجلد ، طبقة الجلد) أثناء وضع مسحوق البنسلين (حوالي 0.5 جم) على كل طبقة. قم بإزالة أنبوب التصريف بعد خياطة شق الجلد باستخدام خيط قطني 1-0.

4. رعاية ما بعد الجراحة

1. قم بإزالة الأنبوب الرغامي بعد عودة الحيوانات إلى التنفس التلقائي. يجب على طبيب التخدير تقييم العناصر الحيوية للحيوان (على سبيل المثال ، معدل التنفس ، ومعدل ضربات القلب ، وتشبع الأكسجين ، وما إلى ذلك) وإزالة تخطيط القلب بعد استيقاظ الحيوانات والعودة إلى النشاط التلقائي. أرسل الحيوانات مرة أخرى إلى غرفة التغذية وضع الحيوانات الزائفة في حظيرة أخرى في غرفة التكاثر. حافظ على دفء الحيوانات ببطانية كهربائية. مراقبة الحيوانات كل ساعة بعد الجراحة (على الأقل 4 مرات).
2. إطعام الحيوان في اليوم التالي للجراحة. أضف الأسبرين (200 مجم) 2x يوميا لمدة 7 أيام إلى علف الحيوان لمنع تجلط الدم بعد الجراحة وتقليل آلام الجرح.
   ملاحظة: تجنب إطعام الحيوانات في يوم الجراحة لمنع الشفط.
3. تطبيق الحيوان بالحقن العضلي للبنسلين 1x يوميا لمدة 7 أيام متتالية لمنع العدوى بعد الجراحة (14000 وحدة لكل كيلوغرام).

5. الفحص بالموجات فوق الصوتية

1. بعد جراحة تحويل مسار الشريان التاجي ، استخدم غلاف مسبار معقم بالموجات فوق الصوتية للف مسبار الصفيف الخطي عالي التردد. ضع المسبار على سطح الكسب غير المشروع الوريدي.
2. اعرض الخطوط العريضة للكسب غير المشروع في وضع الموجات فوق الصوتية ثنائي الأبعاد ، ثم انتقل إلى وضع دوبلر الملون للكشف عن تدفق الدم في الكسب غير المشروع.

6. جمع أنسجة الكسب غير المشروع الوريدي

1. اجمع 10 مل من عينة الدم من الدائرة الوريدية لوريد الأذن لإجراء الاختبارات الكيميائية الحيوية. (الجدول 1). أجهزة الطرد المركزي عينة الدم عند 1000 × غرام لمدة 5 دقائق وإجراء اختبارات كيميائية حيوية باستخدام محلل كيميائي حيوي أوتوماتيكي.
2. تخدير الحيوان كما هو موضح سابقا. عند التأكد من عمق التخدير، يتم حقن 10٪ كلوريد البوتاسيوم 0.5 مل/كغ من وزن الجسم من الوريد الهامشي للأذن أو الوريد الأمامي. بعد ذلك ، قم بعمل شق قصي متوسط 10 سم بسكين كهربائي لحصاد الكسب غير المشروع الوريدي بعد 30 يوما من الجراحة. ثبت وضع الجسم كما في الخطوة 2.2 ، وبعد التعقيم ووضع الستارة ، قم بعمل شق القص المتوسط لتقسيم القص. أثناء الفصل ، تجنب الأوعية الدموية الرئيسية والقلب ، وافصل الأوعية الدموية المطعمة طبقة تلو الأخرى.
3. قطع الأوعية الدموية الكبيرة المتصلة بالقلب بسرعة ، ووضع القلب والشريان الأورطي الصاعد على رقائق الثلج ، وإزالة الجسر الوعائي الطعم ، والشريان الأورطي المتصل ، والشريان التاجي الأيمن. اشطف جميع العينات بمحلول ملحي عادي عند 4 درجات مئوية.
4. خذ وعاء الكسب غير المشروع بالكامل الذي يبلغ حجمه حوالي 3-4 سم ، وقسمه إلى 4-5 أجزاء متساوية ، وانقله إلى أنابيب الحفظ بالتبريد. ضع الأنابيب بسرعة في النيتروجين السائل للتجميد السريع والانتقال إلى فريزر بدرجة حرارة منخفضة للغاية -80 درجة مئوية للتخزين.
5. للتحليل ، شطف الكسب غير المشروع مع الجليد البارد 0.9 ٪ المالحة وإصلاحه في محلول بارافورمالدهايد 4 ٪. الحفاظ على نسبة حجم كتلة الأنسجة إلى محلول مثبت من 1:10 وإصلاح الأنسجة لأكثر من 12 ساعة.
6. وصمة عار المقاطع في 50 مل من محلول مائي من الهيماتوكسيلين لمدة 3 دقائق. افصل الأقسام عن طريق الغسيل ب 50 مل من الإيثانول حمض الهيدروكلوريك 0.5٪ و 50 مل من ماء الأمونيا 0.2٪ لمدة 10 ثوان لكل منهما.
7. شطف بالماء الجاري لمدة 1 ساعة ثم ينظف في الماء المقطر عن طريق النقع لمدة 3 دقائق. يجفف في 70٪ و 90٪ إيثانول لمدة 10 دقائق لكل منهما. ضع في 50 مل من محلول تلطيخ الكحول يوزين 0.5٪ لمدة 2-3 دقائق.
8. قم بتجفيف الأجزاء الملطخة بالإيثانول النقي لمدة 10 دقائق ثم انقعها في الزيلين النقي لمدة 10 دقائق لجعل العينات شفافة. تقطر المقاطع الشفافة بالغراء المحايد والغطاء بغطاء. مراقبة الأقسام المرضية تحت المجهر الضوئي عند تكبير 40x.

النتائج

مؤشر كتلة الجسم ومؤشرات الكيمياء الحيوية في الدم
لم يكن مؤشر كتلة الجسم بين المجموعتين الوهمية و VGD مختلفا بشكل كبير (الوهمية مقابل VGD ، 22.05 كجم / سم 2 ± 0.46 كجم / سم 2 مقابل 21.14 كجم / سم 2 ± 0.39 كجم / سم ² ، p = 0.46). يتم سرد نتائج الكيمياء الحيوية في المصل في ال...

Discussion

في هذه الدراسة ، وصفنا بالتفصيل بروتوكول اختيار الحيوانات ، وإعداد الأدوات ، والإجراءات الجراحية ، وتقييم ما بعد الجراحة عند تطوير نموذج VGD الناجم عن تحويل مسار الشريان التاجي. أجرينا فحصا بالموجات فوق الصوتية للطعم الوريدي قبل وبعد جراحة تحويل مسار الشريان التاجي والفحص النسيجي للكسب غ?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Aortic Punch	Medtronic Inc. , America	3.0mm, 3.5mm, 4.0mm	Used for proximal coronary bridge anastomosis
Automatic biochemical analyzer	IDEXX Laboratories, Inc. America	Catalyst One
Cardiac coronary artery bypass grafting instrument kit	LANDANGER, France
Cardiogram monitor	Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co, Ltd	MEC-1000
Coronary Shunt	AXIUS	OF-1500, OF-2500, OF-3000	The product temporarily blocks the coronary artery during arteriotomy to reduce the amount of bleeding in the surgical field and provide blood flow to the distal end during anastomosis.  The Axius shunt plug is not an implant and should be removed prior to completion of the anastomosis.
Defibrillator	MEDIANA	Mediana D500
Diazepam	Nanguo pharmaceutical Co. LTD, Guangdong, China	H37023039	Narcotic inducer
Disposable manual electric knife	Covidien, America	E2516H
Electric negative pressure suction machine	Shanghai Baojia Medical Instrument Co, Ltd	YX932D
Esmolol	Guangzhou Wanzheng Pharmaceutical Co. LTD	H20055990	Emergency drugs
Ice machine	Local suppliers, Guangzhou, China
Lidocaine	Chengdu First Pharmaceutical Co. LTD	H51021662	Emergency drugs
Luxtec headlight system	Luxtec, America	AX-1375-BIF	Used for lighting fine parts during operation
Medical operation magnifier (glasses)	Germany Lista co, LTD	SuperVu Galilean 3.5×	Used for fine site operation during operation
Multi-function high-frequency electrotome	Shanghai Hutong Electronics Co, Ltd	GD350-B
Nitrogen canister	Local suppliers, Guangzhou, China
Nonabsorbable surgical suture (polypropylene suture)	Johnson & Johnson, America	6-0, 7-0	Used to suture blood vessels.
Nonabsorbable suture (cotton thread)	Covidien, America	1-0	Used for skin and muscle tissue tugging
Open heart surgery instrument kit	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., LTD
Propofol injection	Xi 'an Libang Pharmaceutical Co. LTD	H19990282	Anesthetic sedative
Refrigerator	Local suppliers, Guangzhou, China
Respiratory anesthesia machine for animal	Shenzhen Reward Life Technology Co, Ltd, China	R620-S1
Semi-occlusion clamp	Xinhua Surgical Instrument Co., Ltd.	ZL1701RB	Temporarily cut off the aortic flow
vecuronium bromide	Richter, Hungary	JX20090127	Muscle relaxant
Veterinary ultrasound system	Royal Philips, Netherlands	CX50
Zoletil	Virbac, France	Zoletil 50	Animal narcotic