הקמה והערכה של מודל מחלת השתלת ורידים חזיריים

Summary

בפרוטוקול זה, השתלת מעקף ורידים חזיר חדשה בוצעה דרך חתך קטן בדופן החזה השמאלית ללא מעקף לב-ריאה. נעשה מחקר פתולוגי לאחר הניתוח, שהראה עיבוי אינטימי.

Abstract

מחלת השתל הוורידי (VGD) היא הגורם המוביל לכשל בהשתלת מעקפים כליליים (CABG). מודלים גדולים של בעלי חיים של CABG-VGD נדרשים לחקירת מנגנוני מחלה ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות.

כדי לבצע את הניתוח, אנו נכנסים לחדר הלב דרך החלל הבין-קוסטלי השלישי ומנתחים בזהירות את וריד החלב הפנימי וטובלים אותו במי מלח רגילים. העורק הכלילי הראשי הימני מטופל לאחר מכן באיסכמיה. כלי המטרה נחתך, תקע שאנט ממוקם, והקצה הדיסטלי של וריד השתל הוא anastomosed. אבי העורקים העולה חסום חלקית, והקצה הפרוקסימלי של וריד השתל הוא אנסטומוזה לאחר ניקוב. וריד השתל נבדק עבור פטנט, ואת העורק הכלילי הימני פרוקסימלי הוא קשור.

ניתוח CABG מבוצע במיני-חזירים כדי לקצור את וריד החלב הפנימי השמאלי לשימושו כשתל כלי דם. בדיקות ביוכימיות בסרום משמשות להערכת המצב הפיזיולוגי של בעלי החיים לאחר הניתוח. בדיקת אולטרסאונד מראה כי הקצה הפרוקסימלי, האמצעי והדיסטלי של כלי השתל אינם חסומים. במודל הניתוחי, זרימת דם סוערת בשתל נצפית בבדיקה היסטולוגית לאחר ניתוח CABG, והיצרות שתל ורידי הקשורה להיפרפלזיה אינטימית נצפית בשתל. המחקר כאן מספק הליכים כירורגיים מפורטים להקמת מודל VGD המושרה על ידי CABG הניתן לחזרה.

Introduction

למרות שהתמותה ממחלות לב כליליות ירדה באופן משמעותי בשנים האחרונות, מחצית מהמבוגרים בגיל העמידה בארצות הברית מפתחים תסמינים איסכמיים הקשורים ללב מדי שנה, ושליש מהמבוגרים מתים ממחלת לב כלילית¹. השתלת מעקף עורקים כליליים (CABG) היא שיטה כירורגית יעילה לשיפור איסכמיה של שריר הלב, וחשוב מכך, זוהי שיטה כירורגית שאין לה תחליף לטיפול במחלת עורקים כליליים רב-כליליים². עם הזמן, עם זאת, שתלים וסקולריים מפתחים דלקת, היפרפלזיה אינטימית וטרשת עורקים מתקדמת, אשר ידועה כמובילה לכשל השתלת ורידים או מחלת השתלת ורידים (VGD)³. בחולים לאחר CABG, אם רסטנוזיס מתרחשת, רק כלי הדם החולה יכול להיות מוחלף במקרים מסוימים². חולים מבוגרים יותר ותחלואה נלווית נוספת הופכים את ביצוע מחדש של השתלת מעקפים כליליים למאתגרת למדי. עיכוב או שליטה בבעיות הפתולוגיות הקשורות לכלי דם מושתלים היא בעיה דחופה שיש לפתור. מודלים גדולים של בעלי חיים של CABG-VGD נדרשים לחקירת מנגנוני מחלה ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות. חוקרים ביססו בהצלחה מודלים של VGD בבעלי חיים קטנים וגדולים כגון עכברים⁴, חולדות⁵, ארנבים⁶ וחזירים⁷. בהשוואה לבעלי חיים קטנים, לבעלי חיים גדולים כמו חזירים יש מבנים אנטומיים ומאפיינים פיזיולוגיים דומים לבני אדם ויש להם תוחלת חיים ארוכה יותר ^8,9. לפיכך, בעלי חיים גדולים מתאימים יותר לחקר שינויים פתולוגיים ארוכי טווח במחלת השתל הוורידי ולבדיקות פרה-קליניות של תרופות או מכשירים. אנו והצוות המשותף שלנו יישמנו בהצלחה טכניקות כירורגיות כדי לבסס מודל אי ספיקת לב חזירית ותיארנו את השינויים הפתולוגיים הלבביים במודל זה¹⁰.

ניתוח CABG עבר סטנדרטיזציה בפרקטיקה הקלינית, אך כאשר הוא מיושם בהקמת מודלים של בעלי חיים VGD, ההבדלים בין המינים, רכישת ציוד ומתקנים לבעלי חיים, פעולות כירורגיות לבעלי חיים והאכלה וסיעוד של בעלי חיים הם אתגרים עצומים לחוקרים. כמו בפרקטיקה הקלינית, הגישות לניתוח CABG המשמשות להקמת מודלים של בעלי חיים VGD כוללות סטרנטומיה בקו האמצע¹¹ ובית החזה השמאלי הצידי¹². סטרנטומיה בקו האמצע נפוצה יותר^13,14. עם זאת, גישה זו טומנת בחובה סיכונים גבוהים הן לבני אדם והן לבעלי חיים. במחקר שדווח על ידי Thankam et al., שניים מתוך ששת החזירים ששימשו לדוגמנות מתו במהלך ניתוח¹⁵. תמותה במודל גבוה מגדילה את עלויות המחקר ומשפיעה על דיוק התוצאות. מחקר הראה מוקדם יותר כי חתך בדופן בית החזה השמאלי היה אפשרי כדי לבסס VGD המושרה על ידי CABG בחזירים¹¹. כאן, מחקר זה נועד לתאר פרוטוקול שלב אחר שלב לביסוס ניתוח הניתן לשחזור עבור מודל VGD המושרה על ידי CABG במיני-חזירים ולהעריך את הפנוטיפ של מודל זה. פרוטוקול הניסוי תוכנן במשותף על ידי צוותי ניתוחי הלב וההרדמה. הגישה הניתוחית לחלל הבין-קוסטלי השלישי השמאלי נקבעה על פי גופות של מיני-חזירים אחרים במעבדה לפני הניתוח, ושיטת ההרדמה בוצעה על פי השיטה הנהוגה במרכז¹⁶. בדיקות ביוכימיות בדם, בדיקה קולית ובדיקה היסטולוגית נערכו כדי להעריך מודלים של בעלי חיים.

Protocol

הנהלים לטיפול ולשימוש בחיות מעבדה אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של המכון לניטור חיות מעבדה בגואנגדונג. כל הניסויים נערכו בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (מהדורה 8, 2011, המועצה הלאומית למחקר, ארה"ב). ההליך הכירורגי מוצג באיור 1.

1. הכנה טרום ניתוחית של בעלי חיים

1. חלקו באופן אקראי 10 מיני-חזירים זכרים בני 3 חודשים במשקל 30-35 ק"ג לקבוצת דמה (n = 5) וקבוצת VGD (n = 5).
2. להעריך את התנאים הבריאותיים לפני הניתוח ולאחר הניתוח של חזירים באמצעות מדד מסת הגוף (BMI). חשב את ה- BMI כדלקמן:
   BMI = משקל גוף (ק"ג)/(אורך גוף [cm] × אורך גוף [cm])
   הערה: אורך הגוף נמדד מאפו של החזיר ועד לבסיס הזנב.
3. צום את בעלי החיים במשך 12 שעות לפני הניתוח כדי למנוע שאיפה לאחר הרדמה. הכינו מכשירי הרדמה וכלי ניתוח, לרבות מכונת הרדמה, גז, תרופות הרדמה, צינור הרדמה, לרינגוסקופ מיוחד, כלי ניתוח, משענת צלעות, תפרים, מחזיר בלוטת התריס, מלקחיים כירורגיים ועוד. לעקר את כל המכשירים שישמשו בניתוח.

2. הכנת בעלי החיים לניתוח

1. לשקול את החיות ולחשב את מינון ההרדמה. יש לתת תוך שרירית את תערובת ההרדמה הכוללת 2 מ"ג/ק"ג של 1:1 טילטמין וזולאזפם, 0.2 מ"ג/ק"ג דיאזפם ו-0.02 מ"ג/ק"ג אטרופין¹⁷. השתמש פנטניל (50 מ"ג / ק"ג) להקלה על כאב תוך ניתוחי³⁰.
2. יש לוודא כי מושגת רמת הרדמה מתאימה ולהחדיר צנתר ורידי (20G) לווריד האוזן השולית כדי ליצור גישה לאוזן. מעבירים את החזיר על שולחן הניתוחים ומניחים אותו במצב שכיבה. לשתק את הגפיים עם תחבושות להרים את הראש עם drape סטרילי.
   הערה: מצב ההרדמה נוטר על ידי קיבוע מרכזי של גלגל העין, מיוזה, אובדן רפלקס אישונים, ואובדן רפלקס כאב.  קצב הלב ולחץ הדם נשמרו ברמה נמוכה יותר מקו הבסיס. המנתח צריך לעקוב אחר HR, BP ופרמטרים אחרים תחת שיתוק ולהגדיל את מינון ההרדמה אם HR עולה > -20% מעל קו הבסיס.
3. לחשוף את epiglottis ו glottis באמצעות laryngoscope וטרינרי. בצע אינטובציה בקנה הנשימה עם צינור 7.0-7.5Fr וחבר אותו למעגל הנשימה של ההרדמה.
   הערה: מכונת ההנשמה משמשת לאוורור לחץ חיובי מתמשך עם נפח גאות ושפל 280 מ"ל, יחס השראה/תפוגה 1:2, קצב נשימה 20 פעמים לדקה ולחץ חיובי בסוף (5 ס"מ H₂O).
4. הזרקה תוך ורידית של וקורוניום ברומיד (0.1 מ"ג/ק"ג) להרפיית השרירים במהלך ההליכים הכירורגיים ושימוש באיזופלורן 2% לשמירה על הרדמה בקצב נשימה של 16-20 פעימות לדקה ובנפח גאות של 10 מ"ל/ק"ג.
   הערה: Vecuronium ניתן כדי להבטיח עומק מספיק של הרדמה בבעלי חיים משותקים, במיוחד מאז המינון של תרופת אינדוקציה ו isoflurane הוא בקצה התחתון של מומלץ.
5. יש להשתמש במשחה וטרינרית על עיני החזיר כדי למנוע יובש בזמן הרדמה. השתמש שמיכות חשמליות כדי לשמור על טמפרטורת הגוף של החזיר ב 38 °C ± 5 °C (75 °F).
6. השתמש באלקטרוקרדיוגרמה כדי לפקח על קצב הלב, רמות החמצן בדם וטמפרטורת הגוף.

3. הליכים כירורגיים

1. יש לגלח את דופן בית החזה השמאלי ולמרוח שלושה סיבובים לסירוגין של 0.7% יוד ו-75% אלכוהול כדי להכין את אזור הניתוח עד לזווית המנדיבולרית השמאלית, עד חבל הטבור, משמאל לקו בית השחי האחורי ומימין לחזית בית השחי. הניחו וילון כירורגי סטרילי סביב אזור הניתוח.
2. בצעו חתך רוחבי בקוטר 7-10 ס"מ בעזרת סכין חשמלית בחלל הבין-קוסטלי השמאלי השלישי והפרידו את הרקמות התת עוריות שכבה אחר שכבה (איור 2A). הסירו קטע של 5-6 ס"מ מהצלע השלישית בעזרת מספריים לעצם וחשפו את וריד החלב הפנימי באמצעות מפרק נסוג לאחר חשיפת מפרק הצלע-עצם החזה השלישי (איור 2B).
3. אתר את וריד החלב הפנימי יחד עם עורק החלב הפנימי השמאלי בצד שמאל של עצם החזה. בצע דיסקציה קהה של וריד החלב הפנימי עם מלקחיים וסקולריים.
4. בצע hemostasis על ידי electrocoagulation של ענפי וריד החלב הפנימי השמאלי עם סכין חשמלית. אם המוסטאזיס אינו שלם, השתמש בקשירת חוטי כותנה עבור המוסטאזיס. לקשור ולסמן את שני קצוות הווריד בזמן הקציר (איור 2C).
5. הכינו מי מלח רגילים של הפרין על ידי הוספת 2 מ"ל של תמיסת נתרן הפרין ו-98 מ"ל של מי מלח רגילים. לאחר הסרת הווריד, הזריקו לווריד מי מלח רגילים של הפרין לצורך טיפול מקדים (איור 2D). לאחר מכן, הכניסו את הווריד לתמיסת מלח רגילה ושמרו אותו לגיבוי.
6. בצע חתך דומה כמתואר לעיל והסר את וריד החלב הפנימי בקבוצת הדמה. פתח את קרום הלב, ולאחר מכן סגור את קיר החזה בקבוצת דמה. השתמש בווריד החלב הפנימי של קבוצת הדמה לשליטה פתולוגית ללא השתלת מעקף עורקים כליליים.
7. בצע חתך ~ 7 ס"מ עם סכין חשמלית על קרום הלב כדי לחשוף את תא המטען של העורק הכלילי הימני. השהו את קרום הלב ותפרו על העור בצד האיפסילטרלי עם התפרים הכירורגיים 1-0 (איור 2E). הפרידו את גזע העורק הכלילי הימני מהרקמות הסובבות אותו (איור 2E).
8. עקפו את הרצועה החוסמת מתחת לקצה הפרוקסימלי של העורק הכלילי הימני המבודד ליד אבי העורקים בעזרת וו תיל וטפלו בשריר הלב בשלושה מחזורים של 2 דקות איסכמיה ורפרפוזיה של 5 דקות על ידי הידוק והרפיה של הרצועה החוסמת (איור 2F). עקבו אחר הפעילות החשמלית של הלב באמצעות מוניטור אלקטרוקרדיוגרמה במהלך ההתניה המוקדמת של איסכמיה/רפרפוזיה (איור 2G).
   הערה: כאשר העורק הכלילי הימני חסום, האק"ג מראה קצב לב מוגבר ועלייה במקטע ST.
9. הדקו את הרצועה כדי לחסום את זרימת הדם הכלילית הימנית. חותכים את האפיקרדיום המכסה את כלי הדם. לחשוף את דופן העורק הכלילי, לחתוך לאורך עם קצה של להב כירורגי נגד מרכז הקיר הקדמי של כלי הדם.
10. לאחר חיתוך הלומן, הגדילו את החתך במספריים והניחו שאנט כלילי. הכנס קצה אחד של השאנט עם סליל לעורק הכלילי הדיסטלי דרך הקרע. שאנט את הדם בעורקים הכליליים לתוך השאנט הכלילי החלול כדי להבטיח שדה ניתוחי ברור (איור 2H).
11. בצעו תפר רציף מקצה לקצה בין וריד החלב הפנימי לבין תא המטען הכלילי הימני עם תפר פוליפרופילן 7-0 (איור 2I). באמצע אבי העורקים העולה, חוסמים את הקיר האנטרולטרלי השמאלי של אבי העורקים העולה עם מהדק חצי חסימה.
12. השתמש בלהב כירורגי כדי לבצע חתך קטן בדופן אבי העורקים שבו נחתך האדוונטיציה, הכנס את קצה הראש של מוט ההזזה בקצה הראש של האגרוף לתוך חלל אבי העורקים דרך חתך זה, כווץ את מוט ההזזה כלפי חוץ, והסכין העגולה שמעליו חותכת חתיכה מדופן העורק. קוטר גוש הרקמה שנחתך על-ידי האגרוף הוא כ-3 מ"מ (איור 2J).
13. שלפו את השאנט. בצעו תפר רציף מקצה לקצה בין וריד החלב הפנימי לבין דופן אבי העורקים עם תפר פוליפרופילן 6-0 (איור 2K). פתח את מהדק החסימה למחצה.
14. רשום את זרימת המעקף של גזע העורק הכלילי הימני פרוקסימלי לאתר האנסטומוזה באמצעות אולטרסאונד. עקבו אחר הפעילות החשמלית של הלב באמצעות אלקטרוקרדיוגרמה (איור 2L).
15. הכניסו צינור ניקוז זמני (Fr: 16) לחלל החזה כדי לאפשר לדם ולנוזלים להתנקז. תופרים את חתך קרום הלב באמצעות חוט כותנה 1-0 וסוגרים את החזה שכבה אחר שכבה (מבפנים לחוץ: שכבת הצדר, שכבת שריר, שכבת רקמה תת עורית, שכבת עור) תוך הנחת אבקת פניצילין (כ-0.5 גרם) על כל שכבה. יש להסיר את צינור הניקוז לאחר תפירת חתך העור באמצעות חוט כותנה 1-0.

4. טיפול לאחר הניתוח

1. הסר את הצינור האנדוטרכאלי לאחר שהחיות חזרו לנשימה ספונטנית. הרופא המרדים צריך להעריך את החיוניות של בעל החיים (למשל, קצב נשימה, קצב לב, רוויון חמצן וכו ') ולהסיר את האק"ג לאחר שהחיה מתעוררת וחוזרת לפעילות ספונטנית. שלח את החיות בחזרה לחדר ההאכלה והנח את החיות המזויפות במכלאה אחרת בחדר הרבייה. שמרו על חום בעלי החיים בעזרת שמיכה חשמלית. יש להתבונן בבעלי החיים כל שעה לאחר הניתוח (לפחות 4 פעמים).
2. להאכיל את החיה יום לאחר הניתוח. הוסף אספירין (200 מ"ג) פעמיים ביום במשך 7 ימים למזון לבעלי חיים כדי למנוע פקקת לאחר הניתוח ולהפחית כאבי פצעים.
   הערה: הימנע מהאכלת בעלי חיים ביום הניתוח כדי למנוע שאיפה.
3. לנהל את החיה עם זריקה תוך שרירית של פניצילין 1x מדי יום במשך 7 ימים רצופים כדי למנוע זיהום לאחר הניתוח (14,000 יחידות לק"ג).

5. בדיקה קולית

1. לאחר ניתוח CABG, השתמש בשרוול בדיקה על-קולי סטרילי כדי לעטוף את בדיקת המערך הליניארי בתדר גבוה. הניחו את הבדיקה על פני השטח של השתל הוורידי.
2. הצג את קווי המתאר של השתל במצב אולטרסאונד דו-ממדי, ולאחר מכן עבור למצב דופלר צבע כדי לזהות את זרימת הדם בשתל.

6. איסוף רקמת שתל ורידי

1. לאסוף 10 מ"ל של דגימת דם מן המעגל ורידי של וריד האוזן לבדיקה ביוכימית. (טבלה 1). צנטריפוגה את דגימת הדם ב 1,000 x גרם במשך 5 דקות ולבצע בדיקות ביוכימיות עם אנלייזר ביוכימי אוטומטי.
2. מרדימים את בעל החיים כפי שתואר קודם לכן. עם אישור עומק ההרדמה, יש להזריק 10% אשלגן כלורי 0.5 מ"ל/ק"ג משקל גוף מהווריד השולי באוזן או מווריד הגפיים הקדמיות. לאחר מכן, בצע חתך עצם החזה החציוני של 10 ס"מ עם סכין חשמלית כדי לקצור את שתל הווריד 30 יום לאחר הניתוח. תקן את תנוחת הגוף כמו בשלב 2.2., ולאחר עיקור ומיקום של שקוע, בצע חתך עצם החזה החציוני כדי לפצל את עצם החזה. במהלך ההפרדה, הימנעו מכלי הדם העיקריים ומהלב, והפרידו את כלי הדם המושתלים שכבה אחר שכבה.
3. נתקו במהירות את כלי הדם הגדולים המתחברים ללב, הניחו את הלב ואת אבי העורקים העולה על שבבי קרח, והוציאו את גשר כלי הדם של השתל, אבי העורקים המחובר והעורק הכלילי הימני. יש לשטוף את כל הדגימות במי מלח רגילים ב-4°C.
4. לוקחים את כל כלי השתל בגודל של כ 3-4 ס"מ, מחלקים אותו ל 4-5 חלקים שווים, ומעבירים לצינורות הקפאה. הכניסו במהירות את הצינורות לחנקן נוזלי כדי להקפיא במהירות ולעבור למקפיא בטמפרטורה אולטרה נמוכה של -80 מעלות צלזיוס לאחסון.
5. לניתוח, שטפו את השתל במי מלח קרים כקרח 0.9% וקבעו אותו בתמיסת פרפורמאלדהיד 4%. שמור על יחס בין גודל בלוק הרקמה לתמיסה מקבעת של 1:10 וקבע את הרקמה במשך יותר מ -12 שעות.
6. מכתימים את הקטעים ב 50 מ"ל של תמיסה מימית של hematoxylin במשך 3 דקות. להפריד את החלקים על ידי שטיפה עם 50 מ"ל של 0.5% אתנול חומצה הידרוכלורית ו 50 מ"ל של 0.2% מי אמוניה במשך 10 שניות כל אחד.
7. יש לשטוף במים זורמים במשך שעה ולאחר מכן לנקות במים מזוקקים על ידי השריה למשך 3 דקות. יש לייבש באתנול 70% ו-90% למשך 10 דקות כל אחד. מניחים ב-50 מ"ל של תמיסת צביעת אאוזין 0.5% אלכוהול למשך 2-3 דקות.
8. יש לייבש את החלקים המוכתמים באתנול טהור למשך 10 דקות ולאחר מכן להשרות בקסילן טהור למשך 10 דקות כדי להפוך את הדגימות לשקופות. מטפטפים את החלקים השקופים בדבק נייטרלי ומכסים בכיסוי. התבוננו בקטעים פתולוגיים תחת מיקרוסקופ אור בהגדלה של פי 40.

תוצאות

מדדי BMI וסרום ביוכימיים
ה-BMI בין קבוצות הדמה וה-VGD לא היה שונה באופן משמעותי (sham לעומת VGD, 22.05 ק"ג/ס"מ 2 ± 0.46 ק"ג/ס"מ 2 לעומת 21.14 ק"ג/ס"מ 2 ± 0.39 ק"ג/ס"מ ², p = 0.46). התוצאות הביוכימיות של הסרום מפורטות בטבלה 1. שינויים מובהקים סטטיסטית בין הקבוצות נמצאו בארבע?...

Discussion

במחקר זה, תיארנו בפירוט את הפרוטוקול לבחירת בעלי חיים, הכנת מכשירים, הליכים כירורגיים והערכה לאחר ניתוח בעת פיתוח מודל VGD המושרה על ידי CABG. ביצענו בדיקה אולטראסונית של השתל הוורידי לפני ואחרי ניתוח CABG ובדיקה היסטולוגית של השתל 30 יום לאחר הניתוח. זרימת הדם בווריד החלב הפנימי הייתה תקינה לפנ?...

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Aortic Punch	Medtronic Inc. , America	3.0mm, 3.5mm, 4.0mm	Used for proximal coronary bridge anastomosis
Automatic biochemical analyzer	IDEXX Laboratories, Inc. America	Catalyst One
Cardiac coronary artery bypass grafting instrument kit	LANDANGER, France
Cardiogram monitor	Shenzhen Mindray Bio-Medical Electronics Co, Ltd	MEC-1000
Coronary Shunt	AXIUS	OF-1500, OF-2500, OF-3000	The product temporarily blocks the coronary artery during arteriotomy to reduce the amount of bleeding in the surgical field and provide blood flow to the distal end during anastomosis.  The Axius shunt plug is not an implant and should be removed prior to completion of the anastomosis.
Defibrillator	MEDIANA	Mediana D500
Diazepam	Nanguo pharmaceutical Co. LTD, Guangdong, China	H37023039	Narcotic inducer
Disposable manual electric knife	Covidien, America	E2516H
Electric negative pressure suction machine	Shanghai Baojia Medical Instrument Co, Ltd	YX932D
Esmolol	Guangzhou Wanzheng Pharmaceutical Co. LTD	H20055990	Emergency drugs
Ice machine	Local suppliers, Guangzhou, China
Lidocaine	Chengdu First Pharmaceutical Co. LTD	H51021662	Emergency drugs
Luxtec headlight system	Luxtec, America	AX-1375-BIF	Used for lighting fine parts during operation
Medical operation magnifier (glasses)	Germany Lista co, LTD	SuperVu Galilean 3.5×	Used for fine site operation during operation
Multi-function high-frequency electrotome	Shanghai Hutong Electronics Co, Ltd	GD350-B
Nitrogen canister	Local suppliers, Guangzhou, China
Nonabsorbable surgical suture (polypropylene suture)	Johnson & Johnson, America	6-0, 7-0	Used to suture blood vessels.
Nonabsorbable suture (cotton thread)	Covidien, America	1-0	Used for skin and muscle tissue tugging
Open heart surgery instrument kit	Shanghai Medical Instrument (Group) Co., LTD
Propofol injection	Xi 'an Libang Pharmaceutical Co. LTD	H19990282	Anesthetic sedative
Refrigerator	Local suppliers, Guangzhou, China
Respiratory anesthesia machine for animal	Shenzhen Reward Life Technology Co, Ltd, China	R620-S1
Semi-occlusion clamp	Xinhua Surgical Instrument Co., Ltd.	ZL1701RB	Temporarily cut off the aortic flow
vecuronium bromide	Richter, Hungary	JX20090127	Muscle relaxant
Veterinary ultrasound system	Royal Philips, Netherlands	CX50
Zoletil	Virbac, France	Zoletil 50	Animal narcotic