A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
تعمل منصة التصوير "The Lifespan Machine" على أتمتة المراقبة مدى الحياة لعدد كبير من السكان. نعرض الخطوات المطلوبة لأداء العمر الافتراضي ، ومقاومة الإجهاد ، والتسبب في المرض ، وفحوصات الشيخوخة السلوكية. تسمح جودة البيانات ونطاقها للباحثين بدراسة التدخلات في الشيخوخة على الرغم من وجود اختلاف بيولوجي وبيئي.
تظهر المتطابقة وراثيا المحفوظة في بيئة ثابتة توزيعا واسعا للأعمار ، مما يعكس جانبا عشوائيا كبيرا غير وراثي للشيخوخة المحفوظة في جميع الكائنات الحية التي تمت دراستها. يعني هذا المكون العشوائي أنه من أجل فهم الشيخوخة وتحديد التدخلات الناجحة التي تطيل العمر أو تحسن الصحة ، يجب على الباحثين مراقبة أعداد كبيرة من التجارب في وقت واحد. يحد تسجيل الوفيات اليدوي التقليدي من الإنتاجية والحجم المطلوبين لاختبار الفرضيات على نطاق واسع ، مما يؤدي إلى تطوير طرق آلية لمقايسات العمر عالي الإنتاجية. آلة Lifespan (LSM) عبارة عن منصة تصوير عالية الإنتاجية تجمع بين الماسحات الضوئية المسطحة المعدلة ومعالجة الصور المخصصة وبرامج التحقق من صحة البيانات لتتبع الديدان الخيطية مدى الحياة. تشكل المنصة تقدما تقنيا كبيرا من خلال توليد بيانات عمر زمنية عالية من مجموعات كبيرة من على نطاق غير مسبوق وبدقة إحصائية ودقة مساوية للفحوصات اليدوية التي يقوم بها باحثون ذوو خبرة. في الآونة الأخيرة ، تم تطوير LSM بشكل أكبر لتحديد التغيرات السلوكية والمورفولوجية التي لوحظت أثناء الشيخوخة وربطها بالعمر. هنا ، نصف كيفية تخطيط وتشغيل وتحليل تجربة العمر الآلي باستخدام LSM. نسلط الضوء كذلك على الخطوات الحاسمة المطلوبة للجمع الناجح للبيانات السلوكية ومنحنيات البقاء عالية الجودة.
الشيخوخة هي عملية معقدة ومتعددة الأوجه تتميز بانخفاض في الوظيفة الفسيولوجية للكائن الحي ، مما يؤدي إلى زيادة خطر الإصابة بالأمراض والموت بمرور الوقت1. العمر ، الذي يقاس بالوقت من الولادة أو بداية مرحلة البلوغ حتى الموت ، يوفر نتيجة لا لبس فيها للشيخوخة2 ووكيل غير مباشر ولكنه كمي صارم لقياس المعدل النسبي للشيخوخة بين السكان3. غالبا ما تعتمد دراسات الشيخوخة على قياسات دقيقة للعمر ، على غرار التجارب السريرية ، لمقارنة النتائج بين مجموعة سكانية واحدة معرضة للتدخل ومجموعة تحكم غير مكشوفة. لسوء الحظ ، تسود مشكلات التكاثر أبحاث الشيخوخة ، ويرجع ذلك أحيانا إلى التجارب الضعيفة إحصائيا4
1. متطلبات البرامج والأجهزة
تمثل قابلية التكاثر التجريبي في مقايسات العمر تحديا وتتطلب ظروفا تجريبية خاضعة لرقابة مشددة وأعدادا كبيرة من السكان لتحقيق دقة إحصائية كافية 4,36. LSM مناسب بشكل فريد لمسح أعداد كبيرة من في بيئة ثابتة ذات دقة زمنية عالية. لإثبات قدرة LSM ، وتسليط الضوء على الخطو.......
هنا ، نقدم بروتوكولا مفصلا يمكن الوصول إليه لإجراء تجربة باستخدام أحدث إصدار من Lifespan Machine. لقد أظهرنا أن الخطوة الحاسمة لتحقيق منحنيات البقاء التي تم حلها جيدا هي الاستبعاد اليدوي للكائنات غير الدودية أثناء الحصول على ما بعد الصورة. التعليق التوضيحي اليدوي لوقت الوفاة له تأثير صغير على ال.......
يعلن أصحاب البلاغ أنه ليس لديهم مصالح متنافسة.
نشكر جوليان سيرون وجيريمي فيسينسيو (IDIBELL Barcelona) على إنتاج أليل rpb-2 (cer135 ). تم تمويل هذا المشروع من قبل مجلس البحوث الأوروبي (ERC) في إطار برنامج البحث والابتكار Horizon 2020 التابع للاتحاد الأوروبي (اتفاقية المنحة رقم 852201) ، ووزارة الاقتصاد والصناعة والقدرة التنافسية الإسبانية (MEIC) لشراكة EMBL ، ومركز التميز Severo Ochoa (CEX2020-001049-S ، MCIN / AEI / 10.13039 / 501100011033) ، وبرنامج CERCA / Generalitat de Catalunya ، وجائزة MEIC Excelencia BFU2017-88615-P ، وجائزة من مؤسسة جلين للأبحاث الطبية.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
1-Naphtaleneacetic acid (Auxin) | Sigma | N0640 | Solubilize Auxin in 1M potassium hydroxide and add into molten agar |
5-fluoro-2-deoxyuridine (FUDR) | Sigma | F0503 | 27.5 μg/mL of FUDR was used to eliminate progeny from populations on UV-inactivated bacteria |
Glass cleaner | Kristal-M | QB-KRISTAL-M125ml | |
Hydrophobic anti-fog glass treatment | Rain-X Scheibenreiniger | C. 059140 | |
Rubber matt | Local crafstman | Cut on a high-strength EPDM rubber sheet stock | |
Scanner glass | Local hardware supplier | 9" x 11.5" inch glass sheet | |
Scanner plates | Life Sciences | 351006 | 50 mm x 9 mm, polystyrene petri dish |
USB Reference Thermometer | USB Brando | ULIFE055500 | For calibrating temperature of scanners |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved