تم قياس إنتاج الجلوكوز الكبدي وتكوين اليوريا وتحلل الدهون باستخدام نموذج كبد الفأر المنحرف

Summary

هنا ، نقدم طريقة قوية للتروية الموضعية لكبد الفأر لدراسة التنظيم الحاد والمباشر لعملية التمثيل الغذائي للكبد دون الإخلال بالبنية الكبدية ولكن في حالة عدم وجود عوامل خارج الكبد.

Abstract

الكبد له وظائف عديدة ، بما في ذلك التمثيل الغذائي للمغذيات. على عكس النماذج الأخرى في المختبر وفي الجسم الحي لأبحاث الكبد ، يسمح الكبد المعزول بدراسة بيولوجيا الكبد والتمثيل الغذائي في الكبد كله ببنية كبدية سليمة ، مفصولة عن تأثير العوامل خارج الكبد. تم تطوير نضح الكبد في الأصل للفئران ، ولكن تم تكييف الطريقة مع الفئران أيضا. هنا نصف بروتوكول التروية في الموقع من كبد الفأر. يتم اختراق الكبد مسبقا عبر الوريد البابي باستخدام عازل بيكربونات كريبس-هنسليت المؤكسج ، ويتم جمع الإخراج من الوريد الأجوف السفلي فوق الكبدي مع تثبيت الوريد الأجوف السفلي تحت الكبدي لإغلاق الدائرة. باستخدام هذه الطريقة ، يمكن تقييم التأثيرات الكبدية المباشرة لمركب الاختبار بدقة زمنية مفصلة. وظائف الكبد وصلاحيتها مستقرة لمدة 3 ساعات على الأقل ، مما يسمح بإدراج الضوابط الداخلية في نفس التجربة. الاحتمالات التجريبية باستخدام هذا النموذج عديدة وقد تستنتج نظرة ثاقبة في فسيولوجيا الكبد وأمراض الكبد.

Introduction

الكبد هو عضو أساسي في عملية التمثيل الغذائي. يلعب دورا رئيسيا في التحكم في توازن طاقة الجسم بالكامل من خلال تنظيم استقلاب الجلوكوز والدهون والأحماض الأمينية. تبرز الزيادة في أمراض الكبد في جميع أنحاء العالم كعبء صحي عالمي كبير ، وهناك حاجة إلى مزيد من المعرفة حول الفيزيولوجيا المرضية وعواقبها على وظائف الكبد.

تم تطوير نماذج مختلفة في المختبر للبحث في الكبد لاستكمال الدراسات في الجسم الحي. تستخدم على نطاق واسع خلايا الكبد الأولية المعزولة والمستزرعة من القوارض والبشر. يمكن فصل الخلايا غير المتنية عن خلايا الكبد باستخدام الطرد المركزي التفاضلي والمتدرج ، كما أن الثقافة المشتركة لأنواع الخلايا المختلفة مفيدة لدراسة الحديث الم....

Protocol

أجريت جميع التجارب على بإذن من مفتشية التجارب الحيوانية الدنماركية ، ووزارة البيئة والأغذية في الدنمارك (تصريح 2018-15-0201-01397) ، ولجنة الأخلاقيات المحلية وفقا لتوجيه الاتحاد الأوروبي 2010/63 / EU ، والمعاهد الوطنية للصحة (المنشور رقم 85-3) واتباع المبادئ التوجيهية للتشريعات الدنماركية التي تحكم التجارب على (1987). هذا إجراء نهائي ، وسبب الوفاة هو استنزاف وانثقاب الحجاب الحاجز تحت التخدير العميق.

1. التجارب

1. الحصول على الفئران من السلالة المطلوبة والعمر والجنس. استخدمت هذه الدراسة ذكور الفئران C57BL / 6JRj الذين تتراوح أعمارهم بين 11-16 أسبوعا. إيواء ما يصل إلى 5 ذكور أو 8 إناث من الفئران لكل قفص مع إمكانية الوص....

النتائج

مطلوب خط أساس ثابت لتحديد ما إذا كان المثير أو الركيزة يؤدي إلى إطلاق الجزيء محل الاهتمام. يوضح الشكل 3 أ مثالا على تجربة ناجحة. يتم قياس إنتاج اليوريا في الكبد المفعم بالثقب على فترات 2 دقيقة ويظهر كمتوسط ± SEM. فترات خط الأساس التي تسبق كل من فترتي التحفيز ث?.......

Discussion

يعد كبد الفأر المعزول أداة بحث قوية لدراسات الديناميات والآليات الجزيئية لعملية التمثيل الغذائي الكبدي. توفر إمكانية جمع العينات من دقيقة إلى دقيقة تقييما مفصلا للتأثير المباشر لمركب الاختبار على الكبد. بالمقارنة مع الدراسات في الجسم الحي ، يسمح لنا الكبد المثقوب بدراسة استقلاب الكبد ب?.......