إعادة بناء الأوعية الدموية بتقنية الكفة في زراعة الكبد التقويمية للفأر

Summary

يوفر هذا البروتوكول معلومات فنية لإعادة بناء الأوعية باستخدام تقنية الكفة في زراعة الكبد التقويمية للفئران.

Abstract

زرع الكبد التقويمي للفأر هو منهجية فعالة للتحقيق في الآليات الكامنة وراء نقص تروية الكبد وإصابة التروية. ومع ذلك ، فإن التحديات التقنية تشكل عائقا أمام استخدام هذا النموذج التجريبي القيم ونقل هذه المهارات إلى الجيل التالي. الجانب الأكثر تحديا في هذا الإجراء هو إعادة بناء الأوعية الدموية ، بما في ذلك الوريد البابي (PV) ، والوريد الأجوف السفلي تحت الكبدي (IHIVC) ، والوريد الأجوف السفلي فوق الكبدي. يسمح استخدام الأصفاد البلاستيكية ، بدلا من الغرز ، بإعادة بناء PV و IHIVC بشكل أكثر سلاسة. يتم إعادة بناء الأوعية عن طريق ربط الكفة المصنوعة من قسطرة وريدية بطرف وعاء الكسب غير المشروع وإدخال الكفة في الوعاء المتلقي. الجانبان الأكثر أهمية هما تصور التجويف الداخلي للسفينة بشكل صحيح وتجنب استخدام القوة المفرطة. هدفنا هو تقديم نظرة عامة فنية على إعادة بناء الأوعية الدموية باستخدام تقنية الكفة في جراحة المتلقي. من المتوقع أن تساعد هذه النصائح الفنية لتقنية الكفة الجراحين المجهريين على تسهيل إعادة بناء الأوعية الدموية وتطوير أبحاثهم.

Introduction

زرع الكبد التقويمي للفأر (MOLT) هو طريقة تجريبية فعالة تم الإبلاغ عنها لأول مرة في عام 1991¹. لعب هذا النموذج التجريبي ، الذي يستخدم الفئران المعدلة وراثيا وكواشف الأبحاث المختلفة ، دورا محوريا في التحقيق في نقص التروية الدافئ والبارد وإصابات التروية. ومع ذلك ، فإن التعقيد التقني العالي للنموذج قد أعاق تطوير الطب الأساسي لزراعة الكبد². يتضمن MOLT ثلاث خطوات رئيسية: (1) استرجاع الكبد من فأر المتبرع ، (2) جراحة الطاولة الخلفية ، و (3) زرع الكبد في المتلقي. من بين هذه الإجراءات المتلقية ، تشكل مفاغرة الأوعية الدموية التحدي الأكبر. في حين أن مفاغرة الوريد الأجوف السفلي فوق الكبدي تكتمل عادة عن طريق خياطة اليد

Protocol

تمت الموافقة على البروتوكول التجريبي من قبل لجنة التجارب على في جامعة كيوتو. استخدمت الدراسة الفئران C57BL / 6 ، التي يزيد عمرها عن 10 أسابيع وتزن ما بين 25 جم و 30 جم ، والتي تم الحصول عليها من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم تخدير جميع بنسبة 2.5٪ إيزوفلوران (وفقا للبروتوكولات المعتمدة مؤسسيا) ، وتم الحفاظ عليها في ظل ظروف محددة خالية من مسببات الأمراض ، وتم إجراء جميع الإجراءات التجريبية وفقا للوائح جامعة كيوتو بشأن التجارب على. الأدوات المناسبة المستخدمة للدراسة مدرجة في جدول المواد والموضحة في الشكل 1 والشكل 2.

1. اختيار

النتائج

تنجح إعادة البناء الكهروضوئية عندما لا يكون هناك تعرج عند فك الوريد البابي ، ويتم ترشيح الكبد بشكل موحد. يجب أن يكون وقت الكبد أقل من 20 دقيقة ، لأن الأوقات الكبدية التي تتجاوز 25 دقيقة تزيد من خطر وفاة الفئران. تعتبر إعادة بناء IHIVC ناجحة إذا لم يكن هناك قلس دم من الكسب غير المشروع.

Discussion

تعلم إعادة بناء الأوعية الدموية هو الجانب الأكثر تحديا لتحقيق نجاح MOLT. تؤثر جودة الكفة بشكل كبير على صعوبة إعادة الإعمار ، نظرا لصغر حجم الفئران⁵. توفر هذه المقالة بروتوكولا مفصلا لإعداد الكفة وتعلقها وإعادة بنائها.

على الرغم من عدم وجود اختلافات كبيرة عن التقا.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
16 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF2032	IHIVC cuff
20 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF1651	PV cuff
8-0 braid silk	Natsume Seisakusho	CR9-80B2	8-0 silk
Belzer UW Cold Storage Solution	Astellas		Organ preservation fluid
Bulldog clamp	B BRAUN	FB329R	Bulldog clamp
C57BL/6 mice	Oriental Bio Service
Isoflurane inhalation solution	Viatris		Anesthesic
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm	F.S.T	11253-20	Straight microforceps
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock	F.S.T	18056-14	Vessel clip applicator
Micro Serrefines	F.S.T	18055-4	Vessel clip
No.11 Spare Blades	FEATHER Safety Razor	11	Blades
Ophthalmic scissor, round handle	B BRAUN	FD103R	Microscissor
Plastic rectangular-shaped container	Daiso		10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high
SuperGrip Tips	F.S.T	00649-11	Curved microforceps
SZX7	Olympus	SZX7	Microscope