Сосудистая реконструкция с помощью манжеты при ортотопической трансплантации печени мышей

Резюме

Этот протокол предоставляет техническую информацию о реконструкции сосудов с использованием метода манжеты при ортотопической трансплантации печени мышей.

Аннотация

Ортотопическая трансплантация печени мышей является эффективной методологией исследования основных механизмов ишемии печени и реперфузионного повреждения. Однако технические проблемы создают препятствие для использования этой ценной экспериментальной модели и передачи этих навыков следующему поколению. Наиболее сложным аспектом этой процедуры является реконструкция сосудов, включая воротную вену (ЛВ), подпеченочную нижнюю полую вену (IHIVC) и надпеченочную нижнюю полую вену. Использование пластиковых манжет, а не швов, позволяет проводить более гладкую реконструкцию PV и IHIVC. Сосуды реконструируются путем прикрепления манжеты, изготовленной из внутривенного катетера, к кончику сосуда трансплантата и введения манжеты в сосуд-реципиент. Два наиболее важных аспекта - это правильная визуализация внутреннего просвета сосуда и избегание чрезмерного применения силы. Наша цель - предоставить технический обзор сосудистых реконструкций с использованием техники манжеты в хирургии реципиента. Ожидается, что эти технические советы по технике манжеты помогут микрохирургам облегчить реконструкцию сосудов и продвинуть свои исследования.

Введение

Ортотопическая трансплантация печени мышей (МОЛТ) является эффективным экспериментальным методом, впервые описанным в 1991^году. Эта экспериментальная модель, в которой используются генетически модифицированные мыши и различные исследовательские реагенты, сыграла ключевую роль в исследовании теплой и холодной ишемии и реперфузионных повреждений. Однако высокая техническая сложность модели препятствовала развитию фундаментальной медицины для трансплантации печени². MOLT включает в себя три основных этапа: (1) извлечение печени у мыши-донора, (2) операция на спинном столе и (3) имплантация печени реципиенту. Среди этих реци....

протокол

Протокол эксперимента был одобрен Комитетом по экспериментам на животных в Киотском университете. В исследовании использовались мыши C57BL/6 в возрасте более 10 недель и массой от 25 г до 30 г, полученные из коммерческого источника (см. Таблицу материалов). Все животные были обезболены 2,5% изофлураном (в соответствии с институционально утвержденными протоколами), содержались в определенных условиях, свободных от патогенов, и все экспериментальные процедуры проводились в соответствии с Правилами экспериментов на животных Киотского университета. Соответствующие инструменты, использованные для исследования, перечислены в таблице материалов

Результаты

Реконструкция ЛВ успешна, когда при разжатии воротной вены нет извитости, а печень равномерно перфузируется. Внутрипеченочное время должно быть менее 20 минут, так как печеночное время, превышающее 25 минут, увеличивает риск смертности мышей. Реконструкция IHIVC считается успешной, если не.......

Обсуждение

Изучение сосудистой реконструкции является наиболее сложным аспектом достижения успешного MOLT. Качество манжеты существенно влияет на сложность реконструкции, учитывая небольшой размер мышей⁵. В этой статье представлен подробный протокол подготовки, прикрепления и реко?.......

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
16 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF2032	IHIVC cuff
20 G intravenous catheter	TERUMO	SR-FF1651	PV cuff
8-0 braid silk	Natsume Seisakusho	CR9-80B2	8-0 silk
Belzer UW Cold Storage Solution	Astellas		Organ preservation fluid
Bulldog clamp	B BRAUN	FB329R	Bulldog clamp
C57BL/6 mice	Oriental Bio Service
Isoflurane inhalation solution	Viatris		Anesthesic
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm	F.S.T	11253-20	Straight microforceps
Micro Serrefine Clamp Applicator with Lock	F.S.T	18056-14	Vessel clip applicator
Micro Serrefines	F.S.T	18055-4	Vessel clip
No.11 Spare Blades	FEATHER Safety Razor	11	Blades
Ophthalmic scissor, round handle	B BRAUN	FD103R	Microscissor
Plastic rectangular-shaped container	Daiso		10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high
SuperGrip Tips	F.S.T	00649-11	Curved microforceps
SZX7	Olympus	SZX7	Microscope