Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Temsili Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Bu protokol, fare ortotopik karaciğer transplantasyonunda manşet tekniği kullanılarak damar rekonstrüksiyonu için teknik bilgi sağlar.

Özet

Fare ortotopik karaciğer transplantasyonu, karaciğer iskemisi ve reperfüzyon hasarının altında yatan mekanizmaları araştırmak için etkili bir metodolojidir. Bununla birlikte, teknik zorluklar, bu değerli deneysel modelin kullanılmasının ve bu becerilerin gelecek nesillere aktarılmasının önünde bir engel teşkil etmektedir. Bu prosedürün en zorlu yönü, portal ven (PV), infrahepatik inferior vena kava (IHIVC) ve suprahepatik inferior vena kava dahil olmak üzere vasküler rekonstrüksiyondur. Sütürler yerine plastik manşetlerin kullanılması, daha düzgün PV ve IHIVC rekonstrüksiyonuna izin verir. Greft damarının ucuna intravenöz bir kateterden yapılmış bir manşet takılarak ve manşetin alıcı damara yerleştirilmesiyle damarlar yeniden yapılandırılır. En önemli iki husus, geminin iç lümenini düzgün bir şekilde görselleştirmek ve aşırı güç kullanımından kaçınmaktır. Amacımız, alıcı cerrahisinde manşet tekniği kullanılarak yapılan vasküler rekonstrüksiyonlara teknik bir bakış sağlamaktır. Manşet tekniği için bu teknik ipuçlarının, mikro cerrahların vasküler rekonstrüksiyonu kolaylaştırmasına ve araştırmalarını ilerletmesine yardımcı olması bekleniyor.

Giriş

Fare ortotopik karaciğer nakli (MOLT) ilk olarak 1991 yılında bildirilen etkili bir deneysel yöntemdir1. Genetik olarak modifiye edilmiş fareler ve çeşitli araştırma reaktifleri kullanan bu deneysel model, sıcak ve soğuk iskemi ve reperfüzyon yaralanmalarının araştırılmasında çok önemli bir rol oynamıştır. Bununla birlikte, modelin yüksek teknik karmaşıklığı, karaciğer nakli için temel tıbbın geliştirilmesini engellemiştir2. MOLT üç ana adımı içerir: (1) karaciğerin donör fareden alınması, (2) arka masa cerrahisi ve (3) karaciğerin alıcıya implantasyonu. Bu alıcı prosedürler arasında vasküler anastomoz en büyük zorluğu o....

Protokol

Deney protokolü, Kyoto Üniversitesi Hayvan Deneyleri Komitesi tarafından onaylandı. Çalışmada, ticari bir kaynaktan elde edilen, 10 haftadan büyük ve 25 g ile 30 g arasında ağırlığa sahip C57BL / 6 fareleri kullanıldı (bkz. Tüm hayvanlar% 2.5 izofluran ile uyuşturuldu (kurumsal olarak onaylanmış protokoller izlenerek), belirli patojen içermeyen koşullar altında tutuldu ve tüm deneysel prosedürler Kyoto Üniversitesi'nin Hayvan Deneyleri Yönetmeliğine uygun olarak yürütüldü. Çalışma için kullanılan uygun araçlar Malzeme Tablosunda listelenmiştir ve Şekil 1 ve Şekil 2'de gösteri....

Temsili Sonuçlar

PV rekonstrüksiyonu, portal venin klempini açtıktan sonra kıvrımlılık olmadığında ve karaciğer düzgün bir şekilde perfüze edildiğinde başarılıdır. Anhepatik süre 20 dakikanın altında olmalıdır, çünkü 25 dakikayı aşan anhepatik zamanlar fare ölüm riskini artırır. Greftten kan yetersizliği yoksa IHIVC rekonstrüksiyonu başarılı kabul edilir.

Greftin organ koruma solüsyonu kullanılarak 1 saat soğuk sıcaklıklarda saklanması, reperfüzyondan 6 saat sonra .......

Tartışmalar

Vasküler rekonstrüksiyonu öğrenmek, başarılı MOLT'a ulaşmanın en zorlu yönüdür. Manşetin kalitesi, farelerin küçük boyutu göz önüne alındığında, rekonstrüksiyonun zorluğunu önemli ölçüde etkiler5. Bu makale, manşet hazırlığı, takılması ve rekonstrüksiyonu için ayrıntılı bir protokol sağlar.

Manşet hazırlığı ve bağlantı 2,5 ile ilgili önceki raporlardan büyük fa.......

Açıklamalar

Hiçbir yazarın açıklanacak herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Bu çalışma, 2022 JST temel araştırması (Japon Organ Nakli Derneği) tarafından desteklenmiştir.

....

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
16 G intravenous catheterTERUMOSR-FF2032IHIVC cuff
20 G intravenous catheterTERUMOSR-FF1651PV cuff
8-0 braid silkNatsume SeisakushoCR9-80B28-0 silk
Belzer UW Cold Storage Solution AstellasOrgan preservation fluid
Bulldog clampB BRAUNFB329RBulldog clamp
C57BL/6 mice  Oriental Bio Service
Isoflurane inhalation solutionViatrisAnesthesic
Micro Blunted Tips 0.1 mm x 0.06 mm F.S.T11253-20Straight microforceps
Micro Serrefine Clamp Applicator with LockF.S.T18056-14Vessel clip applicator
Micro Serrefines F.S.T18055-4Vessel clip
No.11 Spare BladesFEATHER Safety Razor11Blades
Ophthalmic scissor, round handleB BRAUNFD103RMicroscissor
Plastic rectangular-shaped container  Daiso10 cm long, 15 cm wide and 6 cm high
SuperGrip TipsF.S.T00649-11 Curved microforceps
SZX7OlympusSZX7Microscope

Referanslar

  1. Qian, S. G., Fung, J. J., Demetris, A. V., Ildstad, S. T., Starzl, T. E. Orthotopic liver transplantation in the mouse. Transplantation. 52 (3), 562-564 (1991).
  2. Yokota, S., et al. Orthotopic mouse liver transplantation to....

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 202

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır