قياسات الصلابة الدقيقة على الأسنان والعظم السنخي في نماذج أمراض الفم القوارض

Summary

الصلابة الدقيقة هي خاصية ميكانيكية ومعلمة إعلامية لتقييم الفيزيولوجيا المرضية للأنسجة الصلبة. هنا ، نوضح بروتوكولا موحدا (تحضير العينات ، والتلميع ، والسطح المسطح ، ومواقع المسافة البادئة) لتحليل الصلابة الدقيقة في الأسنان والعظام السنخية في نماذج أمراض الفم القوارض ، وهي تسمم الأسنان بالفلور ، وارتشاف عظام اللثة الناجم عن الأربطة.

Abstract

يتم تقييم الخاصية الميكانيكية ، الصلابة الدقيقة ، في مينا الأسنان ، العاج ، والعظام في نماذج أمراض الفم ، بما في ذلك تسمم الأسنان بالفلور والتهاب دواعم السن. يوفر التصوير المقطعي المحوسب الدقيق (μCT) معلومات التصوير 3D (الحجم والكثافة المعدنية) والمسح المجهري الإلكتروني (SEM) ينتج صورا مجهرية (منشور المينا وقناة ثغرة العظام). بالتكامل مع التحليل الهيكلي بواسطة μCT و SEM ، تعد الصلابة الدقيقة واحدة من المعلمات الإعلامية لتقييم كيفية تغيير التغييرات الهيكلية للخصائص الميكانيكية. على الرغم من كونها معلمة مفيدة ، إلا أن الدراسات حول الصلابة الدقيقة للعظام السنخية في أمراض الفم محدودة. حتى الآن ، تم الإبلاغ عن طرق قياس الصلابة الدقيقة المتباينة. نظرا لأن قيم الصلابة الدقيقة تختلف اعتمادا على تحضير العينة (التلميع والسطح المستوي) ومواقع المسافة البادئة ، يمكن أن تسبب البروتوكولات المتنوعة تناقضات بين الدراسات. يعد توحيد بروتوكول الصلابة الدقيقة أمرا ضروريا للتقييم المتسق والدقيق في نماذج أمراض الفم. في هذه الدراسة ، نوضح بروتوكولا موحدا لتحليل الصلابة الدقيقة في الأسنان والعظام السنخية. العينات المستخدمة هي كما يلي: بالنسبة لنموذج التسمم بالفلور السني ، تم جمع القواطع من الفئران المعالجة بالمياه المحتوية على الفلورايد / بدونها لمدة 6 أسابيع. بالنسبة لنموذج ارتشاف عظم اللثة الناجم عن الرباط (L-PBR) ، تم جمع العظام السنخية مع ارتشاف عظم اللثة من الفئران المربوطة^{على ضرس} الفك العلوي 2. في 2 أسابيع بعد الربط ، تم جمع الفك العلوي. تم تحليل صلابة فيكرز في هذه العينات وفقا للبروتوكول الموحد. يوفر البروتوكول مواد وطرق مفصلة لتضمين الراتنج والتلميع التسلسلي ومواقع المسافة البادئة للقواطع والسنخية. على حد علمنا ، هذا هو أول بروتوكول صلابة دقيقة موحد لتقييم الخواص الميكانيكية للأسنان والعظام السنخية في نماذج أمراض الفم القوارض.

Introduction

الصلابة هي إحدى الخصائص الميكانيكية (على سبيل المثال ، المرونة والصلابة والمرونة اللزوجة وسلوك الكسر) وتستخدم بشكل شائع لتوصيف القدرة على مقاومة تشوه الانضغاط وكسر منطقة محلية من المادة. اختبار صلابة المسافة البادئة الثابتة هو الطريقة الأكثر استخداما ، بما في ذلك صلابة فيكرز وصلابة Knoop¹. يتم تنفيذ اختبار صلابة فيكرز عن طريق الضغط على مسافة بادئة من الماس في السطح تحت حمل اختبار ثابت. المسافة البادئة على شكل هرم ، مع قاعدة مربعة وزاوية 136 درجة بين الوجوه المتقابلة. يتم قياس طول كلا القطرين المتكونين على سطح الاختبار ، ويتم استخدام المتوسط لحساب الصلابة ، والتي يتم تحديدها من خلال النسبة F / A (حيث F هي القوة و A هي مساحة سطح المسافة البادئة).....

Protocol

تم تنفيذ جميع الإجراءات الموضحة في هذا البروتوكول وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح الخاصة باستخدام الفقارية المعتمدة من قبل لجنة استخدام رعاية المؤسسية (IACUC) في جامعة أوغوستا وفي جامعة نوفا ساوث إيسترن المعتمدة من قبل جمعية تقييم واعتماد رعاية المختبر الدولية (AAALAC). لاحظ أن الدكتور سوزوكي كان يعمل في جامعة أوغوستا حيث تم الانتهاء من تجارب تسمم الأسنان بالفلور على الفئران.

1. استخراج قواطع الفك السفلي في نموذج تسمم الأسنان بالفلور الفأر

1. تغذية الوجبات الغذائية الخالية من الفلورايد إلى الفئران C57BL / 6 (5 أسابيع من العمر ، ذكر) من 1 أسبوع قبل الفلورايد حتى إنهاء العلاج بالفلورايد.
2. تحضير ماء الفلورايد ع....

النتائج

نموذج تسمم الأسنان بالفلور: يوضح الشكل 1 صورا تمثيلية μCT للقواطع في السيطرة والفئران المعالجة بالفلورايد. في المجموعة الضابطة (الشكل 1B-D) ، أظهرت منطقة عنق الرحم كثافة معدنية أقل للمينا (EMD) تبلغ 1.188 جم / سم³ (الشكل 1B) مقارنة بالوس.......

Discussion

يتم إجراء الصلابة الدقيقة لتقييم الخواص الميكانيكية للأنسجة الصلبة مثل الأسنان والعظام. حتى الآن ، تم الإبلاغ عن طرق قياس الصلابة الدقيقة المتباينة. من المحتمل أن تكون معظم معلومات القياس ، وخاصة مستحضرات العينات ومواقع المسافة البادئة غير كافية. ركزت هذه الدراسة على بروتوكول الصلابة ال.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Braided Silk Suture 6-0	Teleflex
Canica Small Animal Surgery System	Kent Scientific Corporation	SURGI 5001
CarbiMet PSA 120/P120	Buehler	30080120
CarbiMet PSA 60/P60	Buehler	36080060
CarbiMet PSA 600/P1200	Buehler	36080600
Castroviejo Micro Needle hilder	F.S.T	12060-01
Epofix cold setting embeding Resin	Electron Microscopey Science	CAT-1237
Fisherbrand 112xx Series Advanced Ultrasonic Cleaner	Fisher Brand	FB11201
Fluoride-free Rodent diet	Bio Serv	F1515	AIN-76A, 1/2" Pellets
in-vivo microCT Skyscan 1176	Bruker
Isomet 1000 Precison saw	Buehler	MA112180
Lapping film 0.3µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4203	Alternative  A3-0.3 SHT, 3M USA
Lapping film 1µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4206	Alternative A3-1 SHT, 3M USA
Lapping film 12µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4211	Alternative A3-12 SHT, 3M USA
Lapping film 3µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4204	Alternative A3-3 SHT, 3M USA
Lapping film 9µm	Maruto instrument co, LTD. Japan	26-4201	Alternative A3-9 SHT, 3M USA
Leica wild microscope	Leica	LEIC M690
Metaserv 2000 Variable speed Grinder polisher	Buehler	No: 557-MG1-1160
MicroCut PSA 1200/P2500	Buehler	36081200
MicroCut PSA P4000	Buehler	36084000
Microhardness tester, ALPHA-MHT-1000Z	PACE Technologies
SamplKups  1 inch	Buehler	No: 209178
Sodium Fluoride	Fisher Scientific	S299-100
West cott Stitch Scissor	JEDMED	Cat. #25-1180
ZooMed Repti Thern Undertank heater (U.T.H)	Zoo Med Laboratories, Inc.	RH-4