فإن الكتاب أود أن أشكر أندرو جونسون دان ، وهو طالب البحوث الجامعية البارزة في المختبر لدينا ، للحصول على المساعدة الفنية له ورعاية الحيوانات. بتمويل من المعهد الوطني للصحة منح HD058834 وجامعة ميسوري للعلوم زمالة الحياة هذا العمل.

قبل الجراحة آلات / مواد <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قواطع للاسلاك / كماشة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الشاش 2 × 2 &quot;منصات </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التدفئة الوسادة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> العصي نترات الفضة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجراحية القفازات المعقمة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Isoflurane استنشاق مخدر </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غلوكونات الكلورهيكسيدين 4 ٪ (فرك الجراحية مطهر) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> معقمة 2-0 خياطة الجراحية الصلب </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 25 X 08/05 إبرة قياس (المعقمة) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرقئ (المعقمة) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجراحية الصلب خياطة </li></ul> جراحة الداخلي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إنشاء حقل معقمة. اتبع الإجراءات العقيمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الماوس مع 2 -- 3 ٪ isoflurane. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان الماوس على وسادة التدفئة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فرك الذيل مع حل الكلورهيكسيدين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> موقع 5 ، 6 أو 7 الفضائية عشر الفقرية (بين اثنين من المطبات العظمية على الذيل ، وبدء العد من نهاية الشعر الجسم ، وعلى قاعدة الذيل). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام إبر والمرقأة 25G لجعل ثقب التجريبية بين فقرتين ، في الفضاء الفقرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام تقطيعها الى قطع اسلاك الصلب الدرز 10 سم طويلة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الإبرة والخيط الصلب من خلال ادخال ثقب ، 5 سم من الخيط على أي نهاية الذيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب على كل من جانبي الذيل و+ 5 سم من الخيط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان طرف الإبهام على الذيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام يدك الحر والرياح خياطة الصلب على غيض من الإبهام وتحريف تاريخ لتشكيل حلقة كبيرة. وينبغي أن الجزء الجرح أو دائرية تكون + 3 مم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الإبهام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> المشبك one حبلا من الدرز مع مرقئ وثنيه في أصغر حلقة ، ونهاية وهي مرفقة قدر الإمكان إلى تطور كبير في حلقة الأصلي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع الأسلاك الزائدة ، وثني الأسلاك الملتوية الى الوراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كان هناك أي نزيف الزائد ، يمكن أن تقوم بإيقافه مع العصي نترات الفضة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إيقاف الماوس isoflurane ووضعه في قفص بيت واحد لاستعادة لمدة 5-7 أيام قبل hindlimb التفريغ. الحلقات الذيل التورط في حال إيواء أكثر من الماوس معا. </li></ol> 1. Hindlimb التفريغ الداخلي المواد <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حجم 10-24 X 4 براغي آلة ، واحدة للحيوان الواحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نايلون قفل الجوز حجم 10-24 ، واحدة للحيوان الواحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجناح الجوز حجم 10 × 24 ، واثنين من حيوان الواحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حجم غسالة ¼ X 1 ، واثنين من حيوان الواحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطب الصيد مع حجم هوك المفاجئة # 6 ، 1-11/16 &quot;، وحيوان واحد في المائة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ماكينة خياطة بكرة معدنية. حيوان واحد في المائة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مشبك الورق الصغيرة ل S - شكل خطاف ، واحدة للحيوان الواحد </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كماشة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2 × 2 &quot;الشاش. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2 &quot;ورقة سوداء الموثق المشابك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قناة الشريط / مختبر الشريط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1-3/8 &quot;مطلي قضيب من الفولاذ الذي يمتد مشقوق قليلا بعد طول كامل من القفص </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 50cm X 40cm س 20cm قفص (قفص الفئران). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> زجاجة ماء مع أنبوب محني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> غير القابل للصدأ أسلاك الفولاذ على شكل حرف U لدعم زجاجة المياه. </li></ul> قفص الإعداد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع &quot;شريط 1-38 مطلي الصلب سدد فوق الجزء العلوي من القفص ، وشريط لاصق عليه زمنيا مع شريط لاصق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1 المسمار الجوز الجناح المسمار الآلة ، اضافة الى وجود غسالة ، وإدراج حوض الآلة المسمار مسطحات الصلب مشقوق ± 15 سم من حافة القفص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة آخر غسالة والجوز الجناح. تشديد المكسرات كلا الجناحين ، ولكن لا تشديد تماما ، لأنه سيكون من الضروري القيام التعديلات في وقت لاحق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج برغي آلة من خلال ثقب وسط بكرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لمنع بكرة من السقوط ، المسمار الجوز قفل النايلون حتى نهاية المسمار الجهاز. يجب على بكرة دوارة بحرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تضاف هوك المفاجئة من دوار الصيد من خلال الجزء السفلي للمكوك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام كماشة لتشكيل هوك S - شكل من مشبك الورق. (قص 2cm من مشبك الورق لتشكيل هوك). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج واحدة من نهاية هوك S - شكل من خلال ثقب في دوار الصيد وقرصة انها اغلقت مع كماشة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع سلك على شكل حرف U ، بالتوازي مع آلة المسمار ، في الداخل من جانب القفص ، والانحناء مرة أخرى إلى نهايات دعم زجاجة ماء كامل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج زجاجة ماء في السلك على شكل حرف U ، مع spicket أسفل ، ولكن لا تلمس القاع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثني 2 &quot;الموثق المشبك مفتوحة ، بحيث لا يمكن إيقاف قريبة. التوتر فقط بما يكفي لاجراء 3-4 قطعة من المواد الغذائية في أنه دون ذلك سقوطه ، وهذا هو منع القوة من المشبك من سحق الطعام ، أو تضييق الخناق على الماوس الأنف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان 3-4 قطعة من طعام القوارض في المشبك الموثق. </li></ol> Hindlimb تفريغ ماوس <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج نهاية مفتوحة للربط على شكل S من خلال حلقة صغيرة من الحلبة الذيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط ارتفاع الماوس من خلال تشديد أو تخفيف الجوز الجناح السفلي المسمار على الجهاز. ينبغي أن لا يكون السفلية تحمل الوزن. متى تم تحقيق ارتفاع الأمثل تشديد الجوز الجناح العلوي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعادة وضع زجاجة الماء ، والأسلاك على شكل حرف U بحيث الماوس لا يمكن الصعود الى spicket مع hindlimbs والخمسين.<html> تأمين زجاجة الماء مع شريط لاصق لجانب من القفص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> موقف الشبك الموثق مع الطعام على الجزء السفلي من القفص بحيث الماوس لا يمكن الصعود إليها ؛ الشريط عليه مع شريط لاصق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كرر نفس الإجراء إذا تم تفريغ hindlimb أكثر من حيوان واحد على الجانب الآخر من القفص. منزل حيوانين في قفص ؛ الفضاء الحيوانات بحيث يمكن تلمس ما يقرب من بعضها البعض. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الشاش 2 X 2 فضفاضة للالتفاف ذيل الفأر معه الى دوار السمك. استخدام قطعة صغيرة من الشريط للالتفاف حول الشاش ، وتأمين شاش إلى الذيل. هذه الخطوة مهمة للحيلولة دون ذيل تدلى من الهبوط ، مما يؤدي إلى تجمع الدم في طرف الذيل والذيل أن تصبح نخرية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة كمية صغيرة من الفراش الكوز إلى القفص. لا تضيف الكثير من الفراش وإلا سوف الماوس من كومة من الفراش ومحاولة لتحميل hindlimbs على الفراش. </li></ol> 2. ممثل النتائج : لإنشاء نجاح تقنية HU الذيل الدائري قمنا بقياس وزن الجسم الحيوان قبل الذيل جراحة الطوق ، وقبل وبعد هو والانتعاش ؛ النعلية كتلة العضلات ، والغدة الكظرية الشامل في جميع الفئات. وتظهر وزن الجسم من الفئران في كافة مراحل التجربة في الشكل 1. وكان وزن الجسم من الفئران قبل عصابة الذيل لعملية جراحية (24.7 ± 3.5G) لا تختلف كثيرا بعد 5 أيام من التعافي من الجراحة عصابة الذيل (24.3 ± 2.9g) قبل هو جين تاو. ولم انخفاض وزن الجسم بشكل ملحوظ على الفور بعد 14 يوما من الخليل (22.7 ± 1.9g) ، و 28 يوما من الخليل (21.3 + 2.1g) أو بعد 3 أيام من الانتعاش HU (24.0 ± 1.8g) على الرغم من أن هو جين تاو الى 14 و 28 يوما أسفرت عن خسارة صغيرة (-6.8 ٪ و 12 ٪) ، ولكن غير مهمة في كتلة الجسم ، فإن الفئران تعافى تماما من ما كانت عليه قبل HU وزن الجسم بعد 3 ايام من الانتعاش. ويبين الاستهلاك الغذائي للفئران والجرذان السيطرة المتنقلة HU في الشكل 3. وكان متوسط ​​الاستهلاك الغذائي اليومي لا تختلف في الفئران HU أكثر من 28 يوما مقارنة مع الضوابط. لاحظنا ضمور العضلات الكبيرة النعلية HU التالية لمدة 14 و 28 يوما (-39.1 ٪ -46.6 ٪ و) التي تشير إلى إجراء HU فعالة (الشكل 2). وعلاوة على هذه الدرجة من ضمور يتسق مع القيم الأدب المتوقع لمدة 2-4 أسابيع من HU 2 ، 7 ، 8. بعد 3 أيام من التعافي من HU النعلية الشامل زيادة كبيرة لتصل إلى 74 ٪ من قيم السيطرة. وكان النعلية الشامل في مجموعة استرداد أكبر بكثير من الجماعات HU على حد سواء ، لكنها ما زالت أقل بكثير من الحيوانات السيطرة الخارجية. تم قياس الأوزان الكظرية كمؤشر على التوتر الحيوان ، وكلاهما تم رفعه في الغدد الكظرية اليمنى واليسرى وزنه. وكان متوسط ​​الأوزان مماثلة لمكافحة الفئران والجرذان HU في جميع الفئات (الشكل 4). سبق لنا في الفئران أظهرت أن نسبة النجاح لعدد من الحيوانات في بداية HU بالمقارنة مع عدد من الحيوانات التي أنجزت HU دون الخروج من جهاز التعليق (بسبب مضغ الحيوانات من خلال الشريط الذيل الجر) وكان 10 من أصل من 12 باستخدام تقنية موري هولتون - 1. أي من الفئران (ن = 54) وجاء في هذه الدراسة من أي وقت مضى إلى أسفل من تعليق قبل الانتهاء من فترة هو جين تاو. فعلنا ومع ذلك ، واحد التي وضعت الماوس الذي ذيل ملتهبة بشدة. أزلنا عندما أصبح واضحا الالتهاب ، وخاتم الذيل للسماح للمنطقة ملتهبة للشفاء ، ووضع في وقت لاحق آخر الذيل الدائري لإكمال مدة HU. في الماضي عندما يكون لدينا استخدام الأسلوب موري - هولتون هو جين تاو ، ونحن عادة القضاء على الفئران 02/01 / المجموعة لأنها تخرج من جهاز التعليق. مع أسلوب درب الحلقة لم يكن هناك من الفئران الحلقات المقبلة من دون قصد الجهاز هو جين تاو خلال الفترة من الخليل لمدة 14 أو 28 يوما (ن = 54 الفئران). <img src="/files/ftp_upload/2467/2467fig1.jpg" alt="الشكل 1" /> الرقم وزن الجسم 1. التغييرات (متوسط ​​± SD). الاختصارات : CON : الفئران الحاملة للتحكم في وزن الجسم (ن = 76) ؛ التمهيدية هو : كل الفئران قبل HU (ن = 54) ؛ HU14 : الفئران hindlimb تفرغ لمدة 14 يوما (ن = 34) ؛ HU28 : الفئران hindlimb لتفريغ 28 يوما (ن = 20) ؛ REC : الفئران hindlimb تفريغ يسمح لاسترداد قفص لمدة 3 أيام (ن = 22). لم يلاحظ أي اختلافات كبيرة في وزن الجسم بين المجموعات. <img src="/files/ftp_upload/2467/2467fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الرقم عضلة النعلية 2. ضمور (متوسط ​​± SD). الاختصارات : CON : الفئران الحاملة للتحكم في وزن الجسم (ن = 76) ؛ HU14 : الفئران hindlimb تفرغ لمدة 14 يوما (ن = 34) ؛ HU28 : الفئران hindlimb تفرغ لمدة 28 يوما (ن = 20) ، ونادي السباق والفروسية : الفئران hindlimb تفريغ سمحت لاسترداد قفص لمدة 3 أيام (ن = 22). * تختلف اختلافا كبيرا (ع &lt;0.001) من تحمل الوزن التحكم (CON). δSignificantly مختلفة (ع &lt;0.01) من المجموعات HU على حد سواء. 467fig3.jpg &quot;بديل =&quot; الشكل 3 &quot;/&gt; استهلاك الأغذية الرقم 3 (متوسط ​​± SD). متوسط ​​الاستهلاك الغذائي اليومي (غ / يوم) خلال تحمل الوزن وتفريغ hindlimb. الاختصارات : الفئران الحاملة للتحكم في وزن الجسم (ن = 76) ؛ HU : الفئران hindlimb unloaded14 -- 28 يوما. لم يلاحظ أي فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات وCON هو جين تاو. <img src="/files/ftp_upload/2467/2467fig4.jpg" alt="الشكل 4" /> الشكل 4. القداس الكظرية (متوسط ​​± SD). الاختصارات : CON : الفئران الحاملة للتحكم في وزن الجسم (ن = 76) ؛ HU14 : الفئران hindlimb تفرغ لمدة 14 يوما (ن = 34) ؛ HU28 : الفئران hindlimb تفرغ لمدة 28 يوما (ن = 20) ، ونادي السباق والفروسية : الفئران hindlimb تفريغ سمحت لاسترداد قفص لمدة 3 أيام (ن = 22). لم يلاحظ أي اختلافات كبيرة بين المجموعتين.

<ol>
	<li>Brown, M., Foley, A. M., Hasser, E. M., Foley, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+alternative+method+for+hindlimb+unweighting.">An alternative method for hindlimb unweighting.</a> J Gravitational Physiol. 12, 43-50 (2005).</li><li>Fitts, R. H., Metzger, J. M., Riley, D. A., Unsworth, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+disuse:+a+comparison+of+hindlimb+suspension+and+immobilization.">Models of disuse: a comparison of hindlimb suspension and immobilization.</a> J Appl Physiol. 60, 1946-1953 (1986).</li><li>Ingalls, C. P., Warren, G. L., Armstrong, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracellular+Ca2++transients+in+mouse+soleus+muscle+after+hindlimb+unloading+and+reloading.">Intracellular Ca2+ transients in mouse soleus muscle after hindlimb unloading and reloading.</a> Journal of Applied Physiology. 87, 386-390 (1999).</li><li>Morey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spaceflight+and+bone+turnover:+correlation+with+a+new+rat+model+of+weightlessness.">Spaceflight and bone turnover: correlation with a new rat model of weightlessness.</a> BioScience. 29, 168-172 (1979).</li><li>Morey-Holton, E. R., Globus, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hindlimb+unloading+of+growing+rats:+a+model+for+predicting+skeletal+changes+during+space+flight.">Hindlimb unloading of growing rats: a model for predicting skeletal changes during space flight.</a> Bone. 22, 83-88 (1998).</li><li>Morey-Holton, E. R., Globus, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hindlimb+unloading+rodent+model:+technical+aspects.">Hindlimb unloading rodent model: technical aspects.</a> J Appl Physiol. 92, 1367-1377 (2002).</li><li>Thomason, D. B., Booth, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrophy+of+the+soleus+muscle+by+hindlimb+unweighting.">Atrophy of the soleus muscle by hindlimb unweighting.</a> J Appl Physiol. 68, 1-12 (1990).</li><li>Thomason, D. B., Herrick, R. E., Surdyka, D., Baldwin, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+course+of+soleus+muscle+myosin+expression+during+hindlimb+suspension+and+recovery.">Time course of soleus muscle myosin expression during hindlimb suspension and recovery.</a> J Appl Physiol. 63, 130-137 (1987).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

قمنا بتقييم أسلوب بديل من الفئران hindlimb التفريغ ، ونحن مصممون على أن تكون ناجحة للغاية. وقد استخدم الأسلوب الدائري الذيل كما هو موضح هنا للتعليق hindlimb طويلة الأجل ، ودراسة HU الانتعاش التالية. تحت كل هذه الظروف ، لم يكن هناك أي دليل على الفشل في التكيف كما يتضح من تناول الأغذية مستقرة ، ووزن الجسم ، والأوزان الكظرية للفئران. هذه التقنية HU الذيل عصابة من السهل القيام بها ويمكن بسهولة أن تدمج مع الممارسة الجراحية القليل جدا. هناك العديد من المزايا من الذيل الدائري أسلوب مقارنة بالطريقة التقليدية 6 - موري هولتون 5. أولا ، والجلد وخاتم موقع غرس على هذا الذيل دائما مرئية ، حتى إذا تنشأ مشاكل يتضح على الفور ، وليس فقط في نهاية فترة التعليق. الثانية ، والحيوانات ليست قادرة على الخروج من جهاز التعليق في أي وقت خلال HU ، تنتفي الحاجة إلى اتخاذ قرار ما إذا كان للحفاظ على الماوس أو ليست في مجموعة بيانات. وعلاوة على ذلك ، فإن الفئران لا يزعج جهاز الرنين وعندما يتم اطلاق سراحهم من HU للانتعاش ، لا تعبث مع ذيولها ، والسماح لمرحلة الانتعاش التالية السلس هو جين تاو. أخيرا ، والفئران تفريغ hindlimb مع أسلوب الذيل الدائري الحفاظ على وزن الجسم بشكل أفضل من الفئران hindlimb تفريغها بواسطة تقنية الذيل الجر موري - هولتون. في ايدينا بعد 14 يوما من HU احظنا خسارة صغيرة (-6.8 ٪) ، ولكن غير مهمة في كتلة الجسم. بينما لاحظ آخرون إينغلس. انخفاضا كبيرا في -12 ٪ من وزن الجسم في الفئران بعد 14 يوما من HU بواسطة الأسلوب موري هولتون - 3. على الرغم من أن التقرير لم إينغلس الأوزان الكظرية ، ويبدو أن لدينا الذيل الدائري أسلوب يمنح أقل من الضغط على الفأرة (أوزان الفئران في الغدة الكظرية هو جين تاو ان لا تختلف من الضوابط) وصيانة أفضل من وزن الجسم خلال فترة hindlimb التفريغ. باختصار ، تم تطوير أسلوب عصابة الذيل تفريغ hindlimb واختباره على الفئران لHU 14 و 28 يوما ، وعلى الفئران عاد الى الانتعاش قفص لمدة 3 أيام بعد HU. على أساس الأوزان الكظرية ، وكتلة الجسم وتناول الطعام ، ويبدو أن الفئران تكيفت جيدا لجهاز الذيل الدائري. وhindlimb الذيل الدائري تفريغ الأسلوب هو مفيد وبسيط لالبديلة التقليدية موري - هولتون تقنية التفريغ hindlimb.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Wire cutters/pliers</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ace Hardware </td>
<td>84-056</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Gauze</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fisher Scientific</td>
<td>22-037-901</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Heating pad</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Sunbeam</td>
<td>Z-1228-001</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Silver nitrate applicators</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>ARZOL</td>
<td>0001-2</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Isoflurane,USP</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Novaplus</td>
<td>NDC 0409-3292-49</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Chlorhexidine Gluconate 4%</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Purdue Products L.P</td>
<td>NDC 67618-200-01</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Sterile 2-0 surgical steel suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Ethicon</td>
<td>SS-28</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>25 X 5/8 A gauge needle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Terumo</td>
<td>NN 2516R</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Hemostat/ needle holder</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Fine Science Tools</td>
<td>12500-12</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Size 10-24 X 4 machine screws</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hillman The Fastener Center</td>
<td>90272</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Nylon lock nut size 10 X 24</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hillman The Fastener Center</td>
<td>180141</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Wing nut size 10 X 24</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hillman The Fastener Center</td>
<td>180243</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fender Washer size &frac14; X 1</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Hillman The Fastener Center</td>
<td>290012</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Fishing swivel with snap hook size #6, 1-11/16&#x201D;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Bass Pro Shop</td>
<td>38-481-554-01</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Metal sewing machine bobbin.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Singer</td>
<td>45785</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Paper clip</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Office Depot</td>
<td>221720</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>2&#x201D; black paper binder clamps.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Office Depot</td>
<td>308957</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Scotch Multi-Use Duct Tape</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Office Depot</td>
<td>790710</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>1-3/8&#x201D; Plated slotted steel bar</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Home Depot</td>
<td>548932</td>
<td>Extends slightly beyond the full length of the cage</td>
</tr>
<tr>
<td>50cm X 40cm X 20cm cage (rat cage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Alternative Design Manufacturing</td>
<td>RC88D-PC</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Water Bottle</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Alternative Design Manufacturing</td>
<td>WB16FS</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Stainless Steel wire</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Small Parts, Inc</td>
<td>SWX-4029</td>
<td>U-shaped wire to support water bottle</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>

an alternant method to the traditional nasa hindlimb unloading model in mice

وموري ، هولتون hindlimb التفريغ (HU) الأسلوب هو مقبول على نطاق واسع الوطنية للملاحة الجوية والفضاء الأميركية (ناسا) أرضية نموذجية لدراسة الترك ، ضمور في القوارض و 4-6. دراستنا تقييم أسلوب alternant إلى معيار الذهب موري - هولتون أسلوب جر الذيل هو جين تاو فى الفئران. وكانت أربعة وخمسين إناث الفئران (4-8 مو). HU لمدة 14 يوما (ن = 34) أو 28 يوما (ن = 20). وجرى تقييم التعافي من الخليل بعد 3 أيام من العمل بشكل طبيعي بعد التمشي القفص هو (22 = ن). خدم الذين تتراوح أعمارهم بين الفئران المتطابقة (ن = 76) وتحمل الوزن الضوابط. قبل HU تم تشكيل عصابة الذيل 2-0 العقيمة مع أسلاك الفولاذ الجراحية التي تم تمريرها من خلال ال 5 و ال 6 أو ال 7 بين مساحة القرص الفقري وظهر على شكل حلقة التي تم تعليقها من الفئران. وقد تم اختيار الموقع الفقري لعصابة الذيل لتحقيق التوازن بين وزن الجسم بشكل مناسب الحيوان من دون التدخل في التغوط. نحن مصممون على نجاح هذه التقنية HU رواية تقييم وزن الجسم قبل وبعد HU ، ودرجة ضمور النعلية ، والغدد الكظرية HU الشامل التالي. ولم وزن الجسم من الفئران قبل HU (24.3 ± 2.9g) لا تراجع بشكل ملحوظ على الفور بعد 14D هو جين تاو (22.7 ± 1.9g) ، 28D هو جين تاو (21.3 + 2.1g) أو بعد 3 أيام الانتعاش (24.0 ± 1.8g) . النعلية كتلة العضلات انخفضت بشكل ملحوظ (-39.1 ٪ ، و -46.6 ٪) في أعقاب HU لمدة 14 يوما و 28 يوما على التوالي (P &lt;0.001). بعد 3 أيام من الانتعاش الشامل النعلية زيادة كبيرة لتصل إلى 74 ٪ من قيم السيطرة. وأوزان الخليل الكظرية من الفئران لا تختلف بالمقارنة مع الفئران السيطرة. ومما يدل على نجاح الرواية لدينا طريقة لصيانة HU من وزن جسم الحيوان ، مقارنة أوزان الغدة الكظرية ، وضمور النعلية التالية HU الموافق الأدب القيم المتوقعة 2 و 7 و 8. المزايا الرئيسية لهذا الأسلوب HU ما يلي : 1) سهولة فحص الذيل أثناء التعليق ، 2) انخفض احتمال ذيول مزرقة ، ملتهبة ، و / أو نخرية وحظ في كثير من الأحيان مع تسجيل الذيل وHU ، 3) أي إمكانية لمضغ الفئران الجر الشريط والخروج من جهاز التعليق ، و4) الانتعاش السريع والعادي النشاط قفص فورا بعد HU.

Watch this Scientific Journal Video about An Alternant Method to the Traditional NASA Hindlimb Unloading Model in Mice at JoVE.com

An Alternant Method to the Traditional NASA Hindlimb Unloading Model in Mice

طورنا hindlimb alternant تفريغ النموذج في الفئران. الميزة الرئيسية لدينا وسيلة hindlimb الذيل الدائري التفريغ خلال تقنية التقليدية الذيل الجر موري هولتون ، هو إجراء بسيط مباشر أن يقلل الإجهاد على الحيوان.

أسلوب Alternant لنموذج ناسا التقليدية تفريغ Hindlimb في الفئران

The Morey-Holton hindlimb unloading (HU) method is a widely accepted National Aeronautics and Space Administration (NASA) ground-based model for studying ...

an-alternant-method-to-traditional-nasa-hindlimb-unloading-model

Research

JoVE Journal

Biology

20.1K Views.  University of Missouri, Columbia. طورنا hindlimb alternant تفريغ النموذج في الفئران. الميزة الرئيسية لدينا وسيلة hindlimb الذيل الدائري التفريغ خلال تقنية التقليدية الذيل الجر موري هولتون ، هو إجراء بسيط مباشر أن يقلل الإجهاد على الحيوان.

Video: An Alternant Method to the Traditional NASA Hindlimb Unloading Model in Mice

Murine Model of Hindlimb Ischemia 

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide. Medical therapies for symptomatic relief are limited. Surgical or endovascular interventions are useful for some individuals, but long-term results are often disappointing. As a result, there is a need for developing new therapies to treat PAD. The murine hindlimb ischemia preparation is a model of PAD, and is useful for testing new therapies. When compared to other models of tissue ischemia such as coronary or cerebral artery ligation, femoral artery ligation provides for a simpler model of ischemic tissue. Other advantages of this model are the ease of access to the femoral artery and low mortality rate. 
In this video, we demonstrate the methodology for the murine model of unilateral hindimb ischemia. The specific materials and procedures for creating and evaluating the model will be described, including the assessment of limb perfusion by laser Doppler imaging. This protocol can also be utilized for the transplantation and non-invasive tracking of cells, which is demonstrated by Huang et al.1.

Murine Model of Hindlimb Ischemia

The surgical procedure for induction of unilateral hindlimb ischemia is demonstrated, with confirmation of ischemia by laser Doppler perfusion imaging.

فأري موديل الإسكيمية Hindlimb

In the United States, peripheral arterial disease (PAD) affects about 10 million individuals, and is also prevalent worldwide.  Medical therapies for ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the function and regulation of protein folding was studied in vitro, in isolated tissue culture cells and in unicellular organisms. Recent studies have uncovered links between protein homeostasis (proteostasis), metabolism, development, aging, and temperature-sensing. These findings have led to the development of new tools for monitoring protein folding in the model metazoan organism Caenorhabditis elegans. In our laboratory, we combine behavioral assays, imaging and biochemical approaches using temperature-sensitive or naturally occurring metastable proteins as sensors of the folding environment to monitor protein misfolding. Behavioral assays that are associated with the misfolding of a specific protein provide a simple and powerful readout for protein folding, allowing for the fast screening of genes and conditions that modulate folding. Likewise, such misfolding can be associated with protein mislocalization in the cell. Monitoring protein localization can, therefore, highlight changes in cellular folding capacity occurring in different tissues, at various stages of development and in the face of changing conditions. Finally, using biochemical tools ex vivo, we can directly monitor protein stability and conformation. Thus, by combining behavioral assays, imaging and biochemical techniques, we are able to monitor protein misfolding at the resolution of the organism, the cell, and the protein, respectively.

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

To study the relationship between protein homeostasis, stress and aging, we monitored changes in protein folding by following protein dysfunction, protein localization in the cell and protein stability at the organismal, cellular and protein levels, using the genetically tractable metazoan Caenorhabditis elegans as a model system.

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

Hybrid-Cut: An Improved Sectioning Method for Recalcitrant Plant Tissue Samples

Maintaining plant section integrity is essential for studying detailed anatomical structures at the cellular, tissue, or even organ level. However, some plant cells have rigid cell walls, tough fibers and crystals (calcium oxalate, silica, etc.), and high water content that often disrupt tissue integrity during plant tissue sectioning.
This study establishes a simple Hybrid-Cut tissue sectioning method. This protocol modifies a paraffin-based sectioning technique and improves the integrity of tissue sections from different plants. Plant tissues were embedded in paraffin before sectioning in a cryostat at -16 &#176;C. Sectioning under low temperature hardened the paraffin blocks, reduced tearing and scratching, and improved tissue integrity significantly. This protocol was successfully applied to calcium oxalate-rich Phalaenopsis orchid tissues as well as recalcitrant tissues such as reproductive organs and leaves of rice, maize, and wheat. In addition, the high quality of tissue sections from Hybrid-Cut could be used in combination with in situ hybridization (ISH) to provide spatial expression patterns of genes of interest. In conclusion, this protocol is particularly useful for recalcitrant plant tissue containing high crystal or silica content. Good quality tissue sections enable morphological and other biological studies.

This protocol describes a simple Hybrid-Cut tissue sectioning method that is useful for recalcitrant plant tissues. Good quality tissue sections enable anatomical studies and other biological studies including in situ hybridization (ISH).

الهجين قطع: طريقة محسنة باجتزاء لعينات الأنسجة النباتية المتمردة

Maintaining plant section integrity is essential for studying detailed anatomical structures at the cellular, tissue, or even organ level. However, some ...

A Method to Assess Bacteriocin Effects on the Gut Microbiota of Mice

Very intriguing questions arise with our advancing knowledge on gut microbiota composition and the relationship with health, particularly relating to the factors that contribute to maintaining the population balance. However, there are limited available methodologies to evaluate these factors. Bacteriocins are antimicrobial peptides produced by many bacteria that may confer a competitive advantage for food acquisition and/or niche establishment. Many probiotic lactic acid bacteria (LAB) strains have great potential to promote human and animal health by preventing the growth of pathogens. They can also be used for immuno-modulation, as they produce bacteriocins. However, the antagonistic activity of bacteriocins is normally determined by laboratory bioassays under well-defined but over-simplified conditions compared to the complex gut environment in humans and animals, where bacteria face multifactorial influences from the host and hundreds of microbial species sharing the same niche. This work describes a complete and efficient procedure to assess the effect of a variety of bacteriocins with different target specificities in a murine system. Changes in the microbiota composition during the bacteriocin treatment are monitored using compositional 16S rDNA sequencing. Our approach uses both the bacteriocin producers and their isogenic non-bacteriocin-producing mutants, the latter giving the ability to distinguish bacteriocin-related from non-bacteriocin-related modifications of the microbiota. The fecal DNA extraction and 16S rDNA sequencing methods are consistent and, together with the bioinformatics, constitute a powerful procedure to find faint changes in the bacterial profiles and to establish correlations, in terms of cholesterol and triglyceride concentration, between bacterial populations and health markers. Our protocol is generic and can thus be used to study other compounds or nutrients with the potential to alter the host microbiota composition, either when studying toxicity or beneficial effects.

Bacteriocins are believed to play a key role in defining microbial diversity in different ecological niches. Here, we describe an efficient procedure to assess how bacteriocins affect gut microbiota composition in an animal model.

وهناك طريقة لتقييم بكتريوسين الآثار على الأمعاء الدقيقة من الفئران

Very intriguing questions arise with our advancing knowledge on gut microbiota composition and the relationship with health, particularly relating to the ...

A Simple and Efficient Method for In Vivo Cardiac-specific Gene Manipulation by Intramyocardial Injection in Mice

Gene manipulation specifically in the heart significantly potentiate the investigation of cardiac disease pathomechanisms and their therapeutic potential. In vivo cardiac-specific gene delivery is commonly achieved by either systemic or local delivery. Systemic injection via tail vein is easy and efficient in manipulating cardiac gene expression by using recombinant adeno-associated virus 9 (AAV9). However, this method requires a relatively high amount of vector for efficient transduction, and may result in nontarget organ gene transduction. Here, we describe a simple, efficient, and time-saving method of intramyocardial injection for in vivo cardiac-specific gene manipulation in mice. Under anesthesia (without ventilation), the pectoral major and minor muscles were bluntly dissected, and the mouse heart was quickly exposed by manual externalization through a small incision at the fourth intercostal space. Subsequently, adenovirus encoding luciferase (Luc) and vitamin D receptor (VDR), or short hairpin RNA (shRNA) targeting VDR, was injected with a Hamilton syringe into the myocardium. Subsequent in vivo imaging demonstrated that luciferase was successfully overexpressed specifically in the heart. Moreover, Western blot analysis confirmed the successful overexpression or silencing of VDR in the mouse heart. Once mastered, this technique can be used for gene manipulation, as well as injection of cells or other materials such as nanogels in the mouse heart.

A Simple and Efficient Method for In Vivo Cardiac-specific Gene Manipulation by Intramyocardial Injection in Mice

Here we present a protocol for cardiac-specific gene manipulation in mice. Under anesthesia, the mouse hearts were externalized through the fourth intercostal space. Subsequently, adenoviruses encoding specific genes were injected with a syringe into the myocardium, followed by protein expression measurement via in vivo imaging and Western blot analysis.

طريقة بسيطة وفعالة في فيفو التلاعب بالجينات الخاصة بالقلب بالحقن إينتراميوكارديال في الفئران

Gene manipulation specifically in the heart significantly potentiate the investigation of cardiac disease pathomechanisms and their therapeutic potential. ...

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A)

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer progression. How the chromosomal location and function of a centromere (i.e., centromere identity) are determined and participate in accurate chromosome segregation is a fundamental question. CENP-A is proposed to be the non-DNA indicator (epigenetic mark) of centromere identity, and CENP-A ubiquitylation is required for CENP-A deposition at the centromere, inherited through dimerization between cell division, and indispensable to cell viability.
Here we describe mass spectrometry analysis to identify ubiquitylation of EYFP-CENP-A K124R mutant suggesting that ubiquitylation at a different lysine is induced because of the EYFP tagging in the CENP-A K124R mutant protein. Lysine 306 (K306) ubiquitylation in EYFP-CENP-A K124R was successfully identified, which corresponds to lysine 56 (K56) in CENP-A through mass spectrometry analysis. A caveat is discussed in the use of GFP/EYFP or the tagging of high molecular weight protein as a tool to analyze the function of a protein. Current technical limit is also discussed for the detection of ubiquitylated bands, identification of site-specific ubiquitylation(s), and visualization of ubiquitylation in living cells or a specific single cell during the whole cell cycle.
The method of mass spectrometry analysis presented here can be applied to human CENP-A protein with different tags and other centromere-kinetochore proteins. These combinatory methods consisting of several assays/analyses could be recommended for researchers who are interested in identifying functional roles of ubiquitylation.

Mass Spectrometry Analysis to Identify Ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A EYFP-CENP-A

CENP-A ubiquitylation is an important requirement for CENP-A deposition at the centromere, inherited through dimerization between cell division, and indispensable to cell viability. Here we describe mass spectrometry analysis to identify ubiquitylation of EYFP-tagged CENP-A (EYFP-CENP-A) protein.

تحليل قياس الطيف الكتلي لتحديد Ubiquitylation من EYFP الموسومة CENP-A (EYFP-CENP-A)

Studying the structure and the dynamics of kinetochores and centromeres is important in understanding chromosomal instability (CIN) and cancer ...

An Antegrade Perfusion Method for Cardiomyocyte Isolation from Mice

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating cardiomyocytes from rabbits, guinea pigs or rats has been performed via retrograde perfusion of the heart with enzymes using a Langendorff apparatus. However, a high degree of skill is required when this method is used with a small mouse heart. An antegrade perfusion method that does not use a Langendorff apparatus was recently reported for the isolation of mouse cardiomyocytes. We herein report a complete protocol for the improved antegrade perfusion of the excised heart to isolate individual heart cells from adult mice (8 - 108 weeks old). Antegrade perfusion is performed by injecting perfusate near the apex of the left ventricle of the excised heart, the aorta of which was clamped, using an infusion pump. All procedures are carried out on a pre-warmed heater mat under a microscope, which allows for the injection and perfusion processes to be monitored. The results suggest that ventricular and atrial myocytes, and fibroblasts can be well isolated from a single adult mouse simultaneously.

We developed a simple method for isolating high quality individual mouse heart cells by the antegrade perfusion technique. This method is Langendorff-free and useful for isolating ventricular and atrial myocytes or interstitial cells, such as cardiac fibroblasts or progenitors.

طريقة ال perfusion أنتيغراد لعزل القلب من الفئران

In basic research using mouse heart, isolating viable individual cardiomyocytes is a crucial technical step to overcome. Traditionally, isolating ...

Imaging Molecular Adhesion in Cell Rolling by Adhesion Footprint Assay

Rolling adhesion, facilitated by selectin-mediated interactions, is a highly dynamic, passive motility in recruiting leukocytes to the site of inflammation. This phenomenon occurs in postcapillary venules, where blood flow pushes leukocytes in a rolling motion on the endothelial cells. Stable rolling requires a delicate balance between adhesion bond formation and their mechanically-driven dissociation, allowing the cell to remain attached to the surface while rolling in the direction of flow. Unlike other adhesion processes occurring in relatively static environments, rolling adhesion is highly dynamic as the rolling cells travel over thousands of microns at tens of microns per second. Consequently, conventional mechanobiology methods such as traction force microscopy are unsuitable for measuring the individual adhesion events and the associated molecular forces due to the short timescale and high sensitivity required. Here, we describe our latest implementation of the adhesion footprint assay to image the P-selectin: PSGL-1 interactions in rolling adhesion at the molecular level. This method utilizes irreversible DNA-based tension gauge tethers to produce a permanent history of molecular adhesion events in the form of fluorescence tracks. These tracks can be imaged in two ways: (1) stitching together thousands of diffraction-limited images to produce a large field of view, enabling the extraction of adhesion footprint of each rolling cell over thousands of microns in length, (2) performing DNA-PAINT to reconstruct super-resolution images of the fluorescence tracks within a small field of view. In this study, the adhesion footprint assay was used to study HL-60 cells rolling at different shear stresses. In doing so, we were able to image the spatial distribution of the P-selectin: PSGL-1 interaction and gain insight into their molecular forces through fluorescence intensity. Thus, this method provides the groundwork for the quantitative investigation of the various cell-surface interactions involved in rolling adhesion at the molecular level.

This protocol presents the experimental procedures to perform the adhesion footprint assay to image the adhesion events during fast cell rolling adhesion.

التصوير الالتصاق الجزيئي في الخلية المتداول بواسطة Adhesion بصمة المقايسة

Rolling adhesion, facilitated by selectin-mediated interactions, is a highly dynamic, passive motility in recruiting leukocytes to the site of ...

Bioluminescent Monitoring of Graft Survival in an Adoptive Transfer Model of Autoimmune Diabetes in Mice

Type 1 diabetes is characterized by the autoimmune destruction of the insulin-producing beta cells of the pancreas. A promising treatment for this disease is the transplantation of stem cell-derived beta cells. Genetic modifications, however, may be necessary to protect the transplanted cells from persistent autoimmunity. Diabetic mouse models are a useful tool for the preliminary evaluation of strategies to protect transplanted cells from autoimmune attack. Described here is a minimally invasive method for transplanting and imaging cell grafts in an adoptive transfer model of diabetes in mice. In this protocol, cells from the murine pancreatic beta cell line NIT-1 expressing the firefly luciferase transgene luc2 are transplanted subcutaneously into immunodeficient non-obese diabetic (NOD)-severe combined immunodeficient (scid) mice. These mice are simultaneously injected intravenously with splenocytes from spontaneously diabetic NOD mice to transfer autoimmunity. The grafts are imaged at regular intervals via non-invasive bioluminescent imaging to monitor the cell survival. The survival of mutant cells is compared to that of control cells transplanted into the same mouse.

This protocol describes a straightforward and minimally invasive method for transplanting and imaging NIT-1 cells in non-obese diabetic (NOD)-severe combined immunodeficient mice challenged with splenocytes purified from spontaneously diabetic NOD mice.

مراقبة التوهج الحيوي لبقاء الكسب غير المشروع في نموذج نقل بالتبني لمرض السكري المناعي الذاتي في الفئران

Type 1 diabetes is characterized by the autoimmune destruction of the insulin-producing beta cells of the pancreas. A promising treatment for this disease ...

Establishing a Diaphyseal Femur Fracture Model in Mice

Bones have a significant regenerative capacity. However, fracture healing is a complex process, and depending on the severity of the lesions and the age and overall health status of the patient, failures can occur, leading to delayed union or nonunion. Due to the increasing number of fractures resulting from high-energy trauma and aging, the development of innovative therapeutic strategies to improve bone repair based on the combination of skeletal/mesenchymal stem/stromal cells and biomimetic biomaterials is urgently needed. To this end, the use of reliable animal models is fundamental to better understanding the key cellular and molecular mechanisms that determine the healing outcomes. Of all the models, the mouse is the preferred research model because it offers a wide variety of transgenic strains and reagents for experimental analysis. However, the establishment of fractures in mice may be technically challenging due to their small size. Therefore, this article aims to demonstrate the procedures for the surgical establishment of a diaphyseal femur fracture in mice, which is stabilized with an intramedullary wire and resembles the most common bone repair process, through cartilaginous callus formation.

This protocol describes a surgical procedure for the establishment of a diaphyseal fracture in the femur of mice, which is stabilized with an intramedullary wire, for fracture healing studies.

إنشاء نموذج كسر عظم الفخذ الحجابي في الفئران

Bones have a significant regenerative capacity. However, fracture healing is a complex process, and depending on the severity of the lesions and the age ...