These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.

1. بروتوكول حلب ماوس تمت الموافقة على الطرق الموضحة في هذا البروتوكول من قبل IACUC. 1. الفصل بين السد من النسل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد السد أن تحلب. اختيار السد مع القمامة من 4 أو أكثر من الجراء التي هي 8-12 أيام بعد الولادة لتوفير الحليب القصوى التحصيل على الرغم من جمع من الممكن في أي وقت آخر نقطة الولادة تصل إلى 21 يوما. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فصل السد من القمامة لها على الأقل 2 ساعة قبل الحلب. ملاحظة: يجب أن رغبة واحدة لحلب السد أكثر من واحد في فترة زمنية معينة، كان مقبولا لإيواء السدود فصل في نفس القفص مع الغذاء الكافي والمياه. </li></ol> 2. إدارة الأوكسيتوسين، التخدير وشحم العين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2 إدارة وحدة دولية / كجم من الأوكسيتوسين الغشاء البريتونى (IP). الأوكسيتوسين هو الهرمون الذي يعمل على الغدد الثديية من الإناث المرضعات لتحفيز الافراج عن الحليب. الأوكسيتوسين يمكن الحصول على الابام طبيب بيطري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة خليط مخدر تحتوي على 80-100 ملغ / كغ الكيتامين في تركيبة مع 5-10 ملغ / كغ زيلازين IP. على سبيل المثال، يمكن إعداد 10 مل الأسهم خليط مخدر مقدما على الفئران وزنها حوالي 30 غراما، وتشمل 0.1 مل زيلازين، 8.9 مل H 2 O، و 1.0 مل الكيتامين. سوف 0.25 مخدر مجموع مل رزين ماوس من هذا الحجم لحوالي 20-30 دقيقة، والتي ينبغي أن توفر الوقت الكافي لجمع الحليب. ملاحظات: لتحديد أن هذا الحيوان قد تم تخدير بنجاح، ووضع لها بلطف على بطنها على سطح صلب؛ وقالت انها لا ينبغي أن يتحرك قدميها أو محاولة للارتقاء إلى قدميها إذا كانت تخدير كامل. في حالة وجود الماوس لا يتم تخدير الكامل مع الجرعة الأصلي، قد الباحثة إدارة أخرى ¼ أو ½ من الجرعة الأصلية من خليط مخدر اعتمادا على حجم من الفأرة و / أو مستوى التخدير أن الفأر قد تحققت بالفعل . ومع ذلك، وهذا يمكن ليncrease فرصة رد فعل سلبي على التخدير، وأيضا قد يؤدي إلى تخدير الماوس يجري أكثر عمقا و / أو تخدير لفترة أطول من الزمن. ملاحظة: إذا حلب السد أكثر من واحد، فمن الضروري لارباك الأوكسيتوسين وحقن مخدر بسبب القصير نصف عمر الأوكسيتوسين والأوقات لتخدير الكيتامين وزيلازين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنطبق على كمية صغيرة من الشحم العين إلى الركن من كل عين وتنتشر لمنع عيون الماوس، من الجفاف بينما تحت التخدير. </li></ol> 3. جمع الحليب يتم تنفيذ معظم جمع الحليب بسهولة مع اثنين من الباحثين: الباحث واحد لعقد الماوس تخدير أثناء التعبير عن الحليب (المشار إليها باسم R1)، وأحد الباحثين لجمع الحليب (R2) يدويا. ويمكن أيضا أن هذا الأسلوب أن يؤديها مع شخص واحد، إذا تم تأمين الماوس على سطح مستو لتجنب الضرر. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن تكون مجهزة R2 مع العقيمة منصات الإعدادية الكحول، والنقطة P-200عتمان، وهي غيض ماصة نظيفة لكل الماوس، وحاوية لعقد الحليب، مثل أنبوب 1.5 مل إيبندورف أو 1.2 مل cryovial (انظر جدول المواد). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كما يبدأ الأوكسيتوسين نافذة المفعول، والحليب خيبة أمل تصبح مرئية في منطقة الثديية الماوس (انظر الشكل 1A). R1: بسط العقيمة وحة الإعدادية الكحول وبلطف مسح منطقة الثديية من الماوس لتنظيف المنطقة قبل الحلب. التعبير يدويا الحليب من حلمة باستخدام الإبهام والسبابة لتدليك بلطف والضغط على الأنسجة الثديية في حركة تصاعدية حتى يبدأ حبة مرئية من الحليب لتشكيل في قاعدة الحلمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اضغط على المكبس pipetman P-200 لأول محطة لإطلاق سراح الهواء من طرف ماصة والاستعداد لتجميع الحليب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> موقف الطرف ماصة في الجزء العلوي من قطرة من الحليب، وسحب بلطف الحليب في تلميح ماصة عن طريق الإفراج عن ببطء الضغط على المكبس. الحرص على عدم وضع غيض قريبة جدا من حلمة أو الجلد (انظرالشكل 1B). فإنه ليس من الضروري لاطلاق سراح تماما المكبس حيث سيؤدي ذلك إلى سحب الحليب على طول الطريق إلى الأعلى من غيض ماصة وسوف تجعل من الصعب طرد الحليب في كثير من الأحيان لزج في وعاء القابضة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> طرد الحليب في وعاء باستخدام الإبهام للضغط على المكبس الماضي المحطة الأولى (انظر الشكل 1C). لتسهيل طرد كميات صغيرة، اضغط على تلميح ماصة ضد الجانب من الأنبوب بحيث لا يضيع السائل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستمرار في التعبير عن الحليب يدويا من كل حلمة، وتتحرك في اتجاه عقارب الساعة أو إما بعكس اتجاه عقارب الساعة حتى لا تخطي أي الحلمات. إلا أنه من غير المقبول والمفيد أن نعود إلى والتعبير عن الحليب باستمرار من نفس حلمة يجب أن تنتج المزيد من الحليب من الآخر. </li></ol> 4. عكس التخدير في السد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في معظم الحالات، فإنه من الشائع للالسد للبدء في البدء أن تستيقظ أثناء عملية الحلب. إذا لم تكن هذه هي الحالة، وضع السد في CAGالبريد غير مباشرة تحت مصدر الحرارة، مثل بطانية تعميم ساخنة، حتى انها تبدأ في الاستيقاظ. ملاحظة: كما يبدأ السد أن يستيقظ، والحفاظ على مراقبة وثيقة من نشاطها حتى انها قادرة على المشي حول القفص لها على بلدها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مرة واحدة السد تتحرك حول القفص دون صراع، ووضع ظهرها الى بلدها الأصلي قفص مع القمامة لها. وقد لوحظ عدم وجود آثار سوء فيما يتعلق بقدرة الجراء &#39;لإطعام بعد جمع الحليب. </li></ol> 2. البروتوكول حلب Muntjac تمت الموافقة على الطرق الموضحة في هذا البروتوكول من قبل IACUC. 1. الفصل بين الفلاني من النسل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حدد ظبية أن تحلب. الغزلان muntjac ريفز &#39;تعطي عموما ادة واحدة تزلف 2. الألبان وظبية اليوم بعد الولادة للسماح للتزلف فرصة للوصول إلى المواد الغذائية الأساسية في اللبأ 8. ملاحظة: عادة ما يخفي وتزلف لا تعود الى الظهور خلال بروكedure؛ فصل الزوج من الأم ذرية ليست ضرورية. </li></ol> 2. إدارة الأوكسيتوسين، التخدير وشحم العين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة 10 وحدة دولية / كجم من العضل أوكسيتوسين (IM). الأوكسيتوسين هو الهرمون الذي يعمل على الغدد الثديية من الإناث المرضعات لتحفيز أسفل السماح للحليب. الأوكسيتوسين يمكن الحصول عليها من طبيب بيطري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة مخدر BAM IM تحتوي على 11 بوتورفانول 0.45 مغ / كغ، azaperone 0.25 مغ / كغ، medetomadine 0.07 ملغم / كغم. وجرعة واحدة من الخليط مخدر BAM رزين وmuntjac لحوالي 20-30 دقيقة، والتي توفر وقتا كافيا لجمع الحليب كاملة. خيار آخر هو لمخدر ميدازولام في 1-2 مغ / كغ، والتي سوف رزين وmuntjac لحوالي 10-15 دقيقة. في حين أن هذا يوفر الوقت الكافي لجمع الحليب، ويتم استقلاب هذا مخدر بسرعة أكثر من BAM والحيوان قد يحاول الهروب في نهاية فترة زمنية أقصر. ملاحظة: الحد الأدنى استجابة للألم، وردود الفعل طفيفة عند لمس الأذنين، تليها قدرة R1 لعقد MJ دون النضال يشير إلى أن الحيوانات قد تم تخدير بنجاح. ملاحظة: في حالة وجود muntjac لا يتم تخدير الكامل مع الجرعة الأصلي، قد الباحثة إدارة أخرى ¼ أو ½ من الجرعة الأصلية من خليط مخدر تبعا لحجم الحيوان و / أو مستوى التخدير التي كانت بالفعل تحققت. ومع ذلك، وهذا يمكن أن يزيد من فرصة حدوث رد فعل سلبي على التخدير، وأيضا قد يؤدي إلى muntjac كونها أكثر تخدير عميق و / أو تخدير لفترة أطول من الزمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنطبق على كمية صغيرة من الشحم إلى زاوية كل عين وانتشار لمنع عيون muntjac من الجفاف بينما تحت التخدير. </li></ol> 3. جمع الحليب يتم تنفيذ معظم جمع الحليب بسهولة مع اثنين من الباحثين؛ باحث واحد لعقد muntjac تخدير فياللفة بينما معربا عن الحليب (يشار إلى R1)، والباحث الثاني للحفاظ على رأس muntjac في وضع مريح وآمن وجمع الحليب (R2) يدويا. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تبعا للمخدر يستخدم، يجب أن يتم تنفيذ الحلب إما 1) في أقلامهم لتوفير مكان آمن لهم يجب أن تستيقظ أثناء إجراء (أو من صنع ميدازولام) 2) في حجرة الانتظار خالية من الفراش للحفاظ على نظافة (BAM- الناجم). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يجب أن تكون مجهزة R1 و R2 بشاش غارقة الإيثانول وعدة أنابيب البولي بروبلين 15 مل المخروطية لعقد الحليب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كما يبدأ الأوكسيتوسين نافذة المفعول، والحليب خيبة أمل تصبح مرئية في منطقة الثدي وmuntjac ل. R1: تعقيم اليدين والأصابع القفاز، وكذلك الضرع كامل ولكل فرد من حلمة الحيوان مع الشاش غارقة في الايثانول. R2: عقد رأس muntjac في وضع آمن ومريح للسماح سهولة التنفس وتساعد على منع الكرش قلس. عقد البنود أنبوب جمع<html> بيئة نظام التشغيل إلى حلمة يجري تحلب دون لمسها لمنع التلوث المحتملة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شفط الحليب من حلمة واحدة باستخدام الإبهام والسبابة للضغط بلطف الأنسجة الثديية في حركة تصاعدية حتى يتم محتقن حلمة مع الحليب، ولفة بلطف الحليب من حلمة والى الانبوب الذي R2 تحتجز (انظر الشكل 2 ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملاحظة: الحليب يخرج في تيار، لذلك من المهم أن يكون لR2 أنبوب جمع وضعه بحيث قليل من دون حليب سوف يضيع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وينقسم الضرع وmuntjac حيز الأرباع. R1: الاستمرار في شفط الحليب من كل رباعي حتى الحليب لم يعد يتدفق بسهولة. إذا الحليب لا يمكن التعبير عنها من حلمة واحدة، والتعبير عن كل من الحلمات أخرى قبل أن تعود إلى الأول. إلا أنه من غير المقبول والمفيد أن نعود إلى والتعبير عن الحليب باستمرار من نفس حلمة يجب أن تنتج المزيد من الحليب من الآخر. </li></ol> 4. عكس التخدير في الفلاني ر &quot;&gt; ومن الشائع لالناجم عن ميدازولام ظبية أن تبدأ في الاستيقاظ أثناء عملية الحلب، وفي معظم الحالات، سوف ظبية محاولة للهروب قبل وقد أعرب كل الحليب. يستخدم ضبط النفس الصغرى في محاولة لزيادة الحليب العائد، إلا أن سلامة وراحة كل من الباحثين وظبية لا تقل أهمية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة atipamezole في 2.5 ملغ / ملغ medetomadine تحت الجلد لعكس السريع للBAM تخدير ظبية. ملاحظة: مع كلا النوعين من مخدر، فمن الضروري للحفاظ على مراقبة وثيقة من وزارة الطاقة حتى انها قادرة على السير بمفردها دون عثرة أو السقوط، وغير قادرة على تناول الطعام والشراب دون خوف من الطموح أو الاختناق. وقد لوحظ عدم وجود آثار سوء فيما يتعلق بقدرة تزلف لممرضة بعد جمع الحليب. </li></ol>

<ol>
	<li>Dueling, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , (2004).</li><li>Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+cycle+of+the+Formosan+Reeves+muntjac+(Muntiacus+reevesi+micrurus)+in+northern+Taiwan,+Republic+of+China.">Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China.</a> Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).</li><li>Browning, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+of+prions+from+mule+deer+and+elk+with+chronic+wasting+disease+to+transgenic+mice+expressing+cervid+PrP.">Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP.</a> J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).</li><li>Van de perre, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+antibody+via+mother's+milk.">Transfer of antibody via mother's milk.</a> Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).</li><li>Maden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+mice+produce+human+milk+protein.">Genetically modified mice produce human milk protein.</a> BioNews. , (2009).</li><li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat.">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).</li><li>Depeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+collecting+milk+from+mice.">Methods for collecting milk from mice.</a> J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li><li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+yield+and+composition+in+mice:+effects+of+litter+size+and+lactation.">Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation.</a> 84 (1), 127-133 (1986).</li><li>Hedrich, H. J., Bullock, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+mouse.">The laboratory mouse.</a> , 735-736 (2004).</li><li>Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+is+required+for+nursing+but+is+not+essential+for+parturition+or+reproductive+behavior.">Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).</li><li>Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Butorphanol-azaperone-medetomidine+for+immobilization+of+captive+white-tailed+deer.">Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer.</a> 45 (2), 457-467 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

فأر هناك العديد من العوامل التي تأخذ بعين الاعتبار عند جمع الحليب من ماوس، بما في ذلك 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد الجراء السد حاليا التمريض و4) مبلغ الفترة الزمنية التي مرت منذ الولا?...

النماذج الحيوانية توفير نظرة ثاقبة علم الأمراض التي لا يمكن الحصول عليها في المختبر عن طريق التحليل. لتوفير النتائج الأكثر فعالية، فمن المهم استخدام نموذج الحيوان الذي يرتبط ارتباطا وثيقا لهذا المرض وأنواع من الفائدة. على سبيل المثال، muntjac في ريفز &#39;(Muntiacus reevesi)، والغزلان الصغيرة الآسيوية 1،2، والفئران المعدلة وراثيا التعبير عن بروتين بريون cervid (CerTgPrP) 3 هي نماذج حيوانية مفيدة لأنواع cervid. كلا النوعين هي متعدد الودق، مما يسمح للتربية على مدار السنة، وبالتالي مصدر ثابت للأنسجة المرتبطة بالحمل والسوائل لدراسة آليات محددة في cervid علم الأحياء. دراسات من الحليب لديها مجموعة واسعة من التطبيقات التي هي ببساطة أكثر (وغير مكلفة) أنجزت في النماذج الحيوانية من في البشر. يمكن الباحثين التحقيق الحليب واللبأ بوصفها مصدرا محتملا لل1) انتقال الأمراض المعدية، 2) المناعية المنقولة من الأم إلى الأبناء في development الحصانة السلبي 4 و 3) اللاكتوفيرين، وهو البروتين الموجود في حليب الثدي البشري المشاركة في الحصانة السلبي أن الباحثين يحاولون حاليا لإنتاج تجاريا 5. يمكن جمع كمية كبيرة من الحليب من الحيوانات الصغيرة أن يكون مهمة صعبة. اقترح روجرز نهجا لجمع الحليب من الفئران 6، والذي تم استخدامه في وقت لاحق في الفئران. DePeters وهوفي المقترحة طريقتين لجمع الحليب، واحد باستخدام فراغ إنشاؤها يدويا التي تنتجها لمبة المطاط تعلق على ماصة ماصة باستور، والثانية تتطلب بناء وحدة الحلب، والتي يتم بعد ذلك تعلق على مصدر فراغ (مثل كما صنبور) لحصاد الحليب الماوس 7. ونحن هنا نقترح لذلك، طريقة منخفضة التكلفة بسيطة لجمع الحليب من كلا الفئران وريفز &#39;muntjac الغزلان، الأمر الذي يتطلب معدات المختبرات فقط متاحة بسهولة والمهارات التقنية الأساسية. أسلوبنا ينتج كميات كافية من الحليب لمختلفالتطبيقات.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1009">
	<tbody>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:360px;">Materials-Mouse</td>
			<td style="width:297px;"></td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Material/Reagent</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg)</td>
			<td>MWI/Vedco</td>
			<td>011075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg)</td>
			<td>MWI/Vedco</td>
			<td>NADA 139236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye lubricant</td>
			<td>MWI/Apexa</td>
			<td>701013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxytocin (2 IU/kg)</td>
			<td>Vet One</td>
			<td>501013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Materials- Muntjac</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Material/Reagent</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Midazolam (1-2 mg/kg)</td>
			<td>Amerisource Bergen Drug Corp</td>
			<td>924326</td>
			<td>optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)</td>
			<td>Fort Dodge Animal Health</td>
			<td>NADA 135-780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Azaperone tartrate (0.25 mg/kg)</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Medetomadine HCl (0.07 mg/kg)</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg)</td>
			<td>Orion Corporation</td>
			<td>NADA 141-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxytocin (10 IU/kg)</td>
			<td>Vet One</td>
			<td>501013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Equipment- Mouse</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Equipment</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">P-200 Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">200 &#956;L pipette tips</td>
			<td>Light Labs</td>
			<td>B-2004-SH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 ml syringes</td>
			<td>MWI</td>
			<td>005427</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">27 gauge needles</td>
			<td>MWI</td>
			<td>002031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Equipment- Muntjac</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Equipment</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15 ml conical tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21008-918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">22 gauge needles</td>
			<td>MWI</td>
			<td>873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3 ml luer lock syringes</td>
			<td>MWI</td>
			<td>001377</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

milk collection methods for mice and reeves' muntjac deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

فأر من تجاربنا، فقد قررنا أنه من الممكن لجمع ما يقرب من 100-400 ميكرولتر من الحليب من الماوس مختبر واحد، تعتمد على العديد من المتغيرات. وتشمل هذه المتغيرات 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد ا?...

Watch this Scientific Journal Video about Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer at JoVE.com

Milk Collection Methods for Mice and Reeves&#039; Muntjac Deer

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

طرق جمع الحليب لالفئران وريفز &#39;Muntjac الغزلان

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

milk-collection-methods-for-mice-and-reeves-muntjac-deer

Research

JoVE Journal

Biology

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

19.6K Views.  Colorado State University. Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer. 

Video: Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

Gibberella zeae Ascospore Production and Collection for Microarray Experiments.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain quality. F. graminearum also causes stalk and ear rots of maize and is a producer of mycotoxins such as the trichothecenes that contaminate grain and are harmful to humans and livestock (Goswami and Kistler, 2004).

The fungus produces two types of spores. Ascospores, the propagules resulting from sexual reproduction, are the main source of primary infection.  These spores are forcibly discharged from mature perithecia and dispersed by wind (Francl et al 1999). Secondary infections are mainly caused by macroconidia which are produced by asexual means on the plant surface. To study the developmental processes of ascospores in this fungus, a procedure for their collection in large quantity under sterile conditions was required. Our protocol was filmed in order to generate the highest level of information for understanding and reproducibility; crucial aspects when full genome gene expression profiles are generated and interpreted. In particular, the variability of ascospore germination and biological activity are dependent on the prior manipulation of the material. The use of video for documenting every step in ascospore production is proposed in order to increase standardization, complying with the increasingly stringent requirements for microarray analysis. The procedure requires only standard laboratory equipment. Steps are shown to prevent contamination and favor time synchronization of ascospores.

To study the developmental processes of ascospores in Gibberella zeae, a procedure for collection under sterile conditions is filmed in order to generate the highest level of information for protocol description. This should facilitate the reproducibility of the experiment, a crucial aspect when full genome expression profile tests are implemented.

بوغ زقي zeae Gibberella الإنتاج والتحصيل للتجارب ميكروأري.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain ...

Seawater Sampling and Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses. For today's demonstration samples were collected from the deck of the HMS John Strickland operating in Saanich Inlet. An A-frame derrick, with a multi-purpose winch and cable system, is used in combination with Niskin or Go-Flo water sampling bottles. Conductivity, Temperature, and Depth (CTD) sensors are also used to sample the underlying water mass. To minimize outgassing, trace gas samples are collected first.  Then, nutrients, water chemistry, and cell counts are determined. Finally, waters are collected for biomass filtration. The set-up and collection time for a single cast is ~1.5 hours at a maximum depth of 215 meters. Therefore, a total of 6 hours is generally needed to complete the collection series described here.

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses.

أخذ عينات مياه البحر وكوكتيل

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal colony. Proper collection of tissues for further histological processing can impact the quality of testing results. This article describes the conduct of a basic gross examination including identification of heart, liver, lungs, kidneys, and spleen, as well as how to collect those organs. Additionally four of the more difficult tissue/sample collection techniques are demonstrated. Lung collection and perfusion can be particularly challenging as the tissue needs to be properly inflated with a fixative in order for inside of the tissue to fix properly and to enable thorough histologic evaluation. This article demonstrates the step by step technique to remove the lung and inflate it with fixative in order to achieve optimal fixation of the tissue within 24 hours. Brain collection can be similarly challenging as the tissue is soft and easily damaged. This article demonstrates the step by step technique to expose and remove the brain from the skull with minimal damage to the tissue. The mesenteric lymph node is a good sample type in which to detect many common infectious agents as enteric viruses persist longer in the lymph node than they are shed in feces. This article demonstrates the step by step procedure for locating and aseptically removing the mesenteric lymph node. Finally, identification of infectious agents of the respiratory tract may be performed by bacterial culture or PCR testing of nasal and/or bronchial fluid aspirates taken at necropsy. This procedure describes obtaining and preparing the respiratory aspirate sample for bacterial culture and PCR testing.

This article describes the procedures for conducting a basic postmortem examination of a mouse or rat, and the collection of basic organs, as well as more challenging sample types from for histological, microbiological, and PCR evaluation.

التشخيص والتشريح والأنسجة عينة مختارة كوكتيل في الجرذان والفئران

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has since been used extensively as a model organism 1. C. elegans possesses key attributes such as simplicity, transparency and short life cycle that have made it a suitable experimental system for fundamental biological studies for many years 2. Discoveries in this nematode have broad implications because many cellular and molecular processes that control animal development are evolutionary conserved 3.
C. elegans life cycle goes through an embryonic stage and four larval stages before animals reach adulthood. Development can take 2 to 4 days depending on the temperature. In each of the stages several characteristic traits can be observed. The knowledge of its complete cell lineage 4,5 together with the deep annotation of its genome turn this nematode into a great model in fields as diverse as the neurobiology 6, aging 7,8, stem cell biology 9 and germ line biology 10. 
An additional feature that makes C. elegans an attractive model to work with is the possibility of obtaining populations of worms synchronized at a specific stage through a relatively easy protocol. The ease of maintaining and propagating this nematode added to the possibility of synchronization provide a powerful tool to obtain large amounts of worms, which can be used for a wide variety of small or high-throughput experiments such as RNAi screens, microarrays, massive sequencing, immunoblot or in situ hybridization, among others. 
Because of its transparency, C. elegans structures can be distinguished under the microscope using Differential Interference Contrast microscopy, also known as Nomarski microscopy. The use of a fluorescent DNA binder, DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole), for instance, can lead to the specific identification and localization of individual cells, as well as subcellular structures/defects associated to them.

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

The easiness of maintaining and propagating the nematode C. elegans make it a nice model organism to work with. The possibility of synchronizing worms allows the work with a significant amount of subjects at the same developmental stage, what facilitates the study of one particular process in many animals.

الأساسية<em&gt; Caenorhabditis ايليجانس</em&gt; طرق: التزامن والمراقبة

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound responses and repair in this model have illuminated our understanding of the cytoskeletal and genomic responses to tissue damage. The two most commonly used methods to wound the C. elegans adult skin are pricks with microinjection needles, and local laser irradiation. Needle wounding locally disrupts the cuticle, epidermis, and associated extracellular matrix, and may also damage internal tissues. Laser irradiation results in more localized damage. Wounding triggers a succession of readily assayed responses including elevated epidermal Ca2+ (seconds-minutes), formation and closure of an actin-containing ring at the wound site (1-2 hr), elevated transcription of antimicrobial peptide genes (2-24 hr), and scar formation. Essentially all wild type adult animals survive wounding, whereas mutants defective in wound repair or other responses show decreased survival. Detailed protocols for needle and laser wounding, and assays for quantitation and visualization of wound responses and repair processes (Ca dynamics, actin dynamics, antimicrobial peptide induction, and survival) are presented.

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

The adult C. elegans skin is a tractable model for studies of epithelial wound responses, including wound closure, scar formation, and innate immunity.

طرق للبشرة إصابة وفحوصات لالردود الجرح في<em&gt; C. ايليجانس</em

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound ...

Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also contains a vast number of bioactive compounds that greatly affect the development of the neonate. The analysis of milk components will help elucidate key factors that link maternal metabolism and health with offspring growth and development. The laboratory rat represents a popular model organism for maternal studies, and rat milk can be used to examine the effect of various maternal physiological, nutritional, and pharmacological interventions on milk components, which may then impact offspring health. Here a simple method of manually collecting milk from the lactating rat that can be performed by a single investigator, does not require specialized vacuum or suction equipment, and provides sufficient milk for subsequent downstream analysis is described. A method for estimating the fat content of milk by measuring the percentage of cream within the milk sample, known as the creamatocrit, is also presented. These methods can ultimately be used to increase insight into maternal-child health and to elucidate maternal factors that are involved in proper growth and development of offspring.

Milk is a primary source of nutrition for the neonate. Analysis of milk components may provide insight into maternal factors that affect offspring health. This protocol describes a manual method of collecting milk samples from the lactating rat, which can then be used for further downstream analysis.

الحليب مجموعة في الفئران عن طريق أنابيب شعرية وتقدير من الحليب الدسم المحتوى من قبل Creamatocrit

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also ...

Methods for the Isolation, Culture, and Functional Characterization of Sinoatrial Node Myocytes from Adult Mice

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). These pacemaker APs reflect the coordinated activity of numerous membrane currents and intracellular calcium cycling. However the precise mechanisms that drive spontaneous pacemaker activity in SAMs remain elusive. Acutely isolated SAMs are an essential preparation for experiments to dissect the molecular basis of cardiac pacemaking. However, the indistinct anatomy, complex microdissection, and finicky enzymatic digestion conditions have prevented widespread use of acutely isolated SAMs. In addition, methods were not available until recently to permit longer-term culture of SAMs for protein expression studies. Here we provide a step-by-step protocol and video demonstration for the isolation of SAMs from adult mice. A method is also demonstrated for maintaining adult mouse SAMs in vitro and for expression of exogenous proteins via adenoviral infection. Acutely isolated and cultured SAMs prepared via these methods are suitable for a variety of electrophysiological and imaging studies.

Methods are demonstrated for the isolation of sinoatrial node myocytes (SAMs) from adult mice for patch clamp electrophysiology or imaging studies. Isolated cells can be used directly or can be maintained in culture to permit expression of proteins of interest, such as genetically encoded reporters.

طرق لعزل والثقافة، وتوصيف الوظيفي للالجيبية الأذينية عقدة Myocytes من الفئران الكبار

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). ...

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in mammals. However, humans cannot oxidize cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid to cytidine monophosphate-N-glycolylneuraminic acid due to a primary exon deletion of the CMAH gene. To understand the effects and implications of the lack of CMAH activity in more detail, a Cmah knock-out model in mice is of keen interest in basic and applied research. The analysis method to determine the phenotype of this mouse model is herein described in detail, and is based on the detection of both N-acetylneuraminic acid and N-glycolylenuraminic acid in the liver and milk of wild-type and Cmah knock-out mice. Endogenous sialic acids are released and derivatized with o-phenylenediamine to generate fluorogenic derivatives, which can be subsequently analyzed by HPLC. The presented protocol can be also applied for the analysis of milk and tissue samples from various other origins, and may be of use to investigate the nutritional and health effects of N-glycolylneuraminic acid.

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

We describe a HPLC-based method for the determination of N-acetylneuraminic acid and N-glycolylenuraminic acid in mouse liver and milk.

تحديد الأحماض السياليك في الكبد وعينات الحليب من البرية من نوع و<em&gt; CMAH</em&gt; خروج المغلوب الفئران.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in ...

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish species is that it possesses interfertile cave and river-dwelling populations. This enables the genetic mapping of heritable traits that were fixed during adaptation to the different environments of these populations. While this species can be maintained and bred in the lab, it is challenging to both obtain embryos during the daytime and create hybrid embryos between strains. In vitro fertilization (IVF) has been used with a variety of different model organisms to successfully and repeatedly breed animals in the lab. In this protocol, we show how, by acclimatizing A. mexicanus to different light cycles coupled with changes in water temperature, we can shift breeding cycles to a chosen time of the day. Subsequently, we show how to identify suitable parental fish, collect healthy gametes from males and females, and produce viable offspring using IVF. This enables related procedures such as the injection of genetic constructs or developmental analysis to occur during normal working hours. Furthermore, this technique can be used to create hybrids between the cave and surface-dwelling populations, and thereby enable the study of the genetic basis of phenotypic adaptations to different environments.

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

In vitro fertilization is a commonly used technique with a variety of model organisms to maintain lab populations and produce synchronized embryos for downstream applications. Here, we present a protocol that implements this technique for different populations of the Mexican tetra fish, Astyanax mexicanus.

مجموعة جاميت والإخصاب في المختبر من أسيتاناكس المكسيكية

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish ...

Tissue Collection of Bats for -Omics Analyses and Primary Cell Culture

As high-throughput sequencing technologies advance, standardized methods for high quality tissue acquisition and preservation allow for the extension of these methods to non-model organisms. A series of protocols to optimize tissue collection from bats has been developed for a series of high-throughput sequencing approaches. Outlined here are protocols for the capture of bats, desired demographics to be collected for each bat, and optimized methods to minimize stress on a bat during tissue collection. Specifically outlined are methods for collecting and treating tissue to obtain (i) DNA for high molecular weight genomic analyses, (ii) RNA for tissue-specific transcriptomes, and (iii) proteins for proteomic-level analyses. Lastly, also outlined is a method to avoid lethal sampling by creating viable primary cell cultures from wing clips. A central motivation of these methods is to maximize the amount of potential molecular and morphological data for each bat and suggest optimal ways to preserve tissues so they retain their value as new methods develop in the future. This standardization has become particularly important as initiatives to sequence chromosome-level, error-free genomes of species across the world have emerged, in which multiple scientific parties are spearheading the sequencing of different taxonomic groups. The protocols outlined herein define the ideal tissue collection and tissue preservation methods for Bat1K, the consortium that is sequencing the genomes of every species of bat.

This is a protocol for the optimal tissue preparation for genomic, transcriptomic, and proteomic analyses of bats caught in the wild. It includes protocols for bat capture and dissection, tissue preservation, and cell culturing of bat tissue.

جمع الانسجه من الخفافيش للتحليلات الomics وثقافة الخلايا الاوليه

As high-throughput sequencing technologies advance, standardized methods for high quality tissue acquisition and preservation allow for the extension of ...