These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.

1. 마우스 착유 프로토콜 이 프로토콜에서 설명하는 방법은 IACUC에 의해 승인되었다. 자손의 댐 1. 분리 <ol><li> 착유 할 수있는 댐을 선택합니다. 8~12일 컬렉션 21 일 모든 시간 포인트 포스트 분만 업에 가능 최대 우유 컬렉션 비록 제공하기 위해 출산을 게시합니다 4 인 이상 새끼의 쓰레기와 댐을 선택합니다. </li><li> 착유 전에 그녀의 쓰레기 최소 2 시간에서 댐을 분리합니다. 참고 : 주어진 시간에 하나 이상의 댐 우유 하나의 욕망하는 경우, 이는 적절한 음식과 물 공급과 같은 케이지에서 분리 된 댐을 집에 허용됩니다. </li></ol> 옥시토신, 마취 눈 윤활유의 2. 관리 <ol><li> 복강 옥시토신의 2 IU / kg (IP)을 관리 할 수​​ 있습니다. 옥시토신은 우유의 방출을 자극하는 수유의 여성의 유방 동맥에 작용하는 호르몬이다. 옥시토신은 FR을 취득 할 수있다톰 의사. </li><li> 5 ~ 10 ㎎ / ㎏ 자일 라진의 IP와 함께 80 ~ 100 ㎎ / kg 케타민을 포함하는 마취제 혼합물을 관리 할 수​​ 있습니다. 예를 들어, 10 밀리리터의 마취 액을 약 30 g의 무게 마우스에 대해 사전에 준비 할 수 있고, 0.1 ml의 자일 라진, 8.9 ML의 H 2 O, 1.0 ML 케타민을 포함 할 것입니다. 0.25 ㎖의 총 마취 우유 수집을위한 충분한 시간을 제공해야하는, 약 20 ~ 30 분 동안이 크기의 마우스를 마취합니다. 주의 사항 : 동물이 성공적으로 마취 된 것을 확인하려면, 부드럽게 고체 표면에 그녀와 그녀의 뱃속에 배치; 그녀는 그녀의 다리를 이동 또는 그녀가 완전히 마취하면 그녀의 발에 상승을 시도 할 수 없습니다. 완전히 원래 투여 량으로 마취되지 않은 마우스의 경우, 연구자는 다른 관리있다 ¼ 또는 마취제 혼합물 마우스 이미 달성 마우스 및 / 또는 진정 작용의 레벨의 크기에 따라 본래의 복용량의 ½ . 그러나, 이것은 내가 할 수마취 부작용의 가능성을 ncrease, 또한 마우스보다 깊게 마취 및 / 또는 시간의 긴 기간 동안 마취를 당할 수도있다. 참고 : 하나 이상의 댐을 짜는 경우는 옥시토신과 케타민 (ketamine)과 자일 라진을위한 옥시토신과 진정 작용 시간의 짧은 반감기로 인해 마취 주사를 엇갈리게 할 필요가있다. </li><li> 각 눈의 구석에 눈 소량의 윤활유를 적용하고 마취 동안 건조에서 마우스의 눈을 방지하기 위해 확산. </li></ol> 3. 우유 컬렉션 수동 (R1이라 함) 우유, 한 연구원 우유 (R2)를 수집하는 표현하면서 마취 마우스를 개최 한 연구원 : 우유 수집은 쉽게 두 연구원이 수행됩니다. 마우스가 피해를 방지하기 위해 평면에 고정되어있는 경우이 방법은 또한, 한 사람으로 수행 될 수있다. <ol><li> R2는 P-200 핍에게, 멸균 알코올 준비 패드를 장착해야etman, 각 마우스 깨끗한 피펫 팁, 이러한 1.5 ㎖의 에펜 도르프 튜브 또는 1.2 ㎖의 cryovial와 우유, (재료의 표 참조) 보유하는 컨테이너입니다. </li><li> 옥시토신을 적용하는 것을 시작으로, 우유 내림 (그림 1A 참조) 마우스의 유방 영역에 표시 될 것입니다. R1 : 멸균 알코올 준비 패드의 포장을 조심스럽게 전에 착유 할 영역을 청소하려면 마우스의 유방 영역을 닦습니다. 수동으로 우유의 볼 구슬 유두의 기초에 형성하기 시작 때까지 부드럽게 상승 움직임에 유방 조직을 마사지하고 짜내는 엄지 손가락과 집게 손가락을 사용하여 젖꼭지에서 우유를 표현한다. </li><li> 피펫 팁의 공기를 해제하고 우유 수집을 위해 준비하는 첫 번째 정지 P-200 pipetman 플런저를 누르십시오. </li><li> 우유의 드롭의 상단에 피펫 팁을 놓고 부드럽게 천천히 플런저에 압력을 방출하여 피펫 팁에 우유를 당깁니다. (참조 유두 나 피부에 너무 가까이 팁을 넣어하지 않도록주의그림 1B). 그것은이 모든 방법 피펫 팁의 상단에 우유를 끌어와 어려운 보유 용기에 종종 점성 우유를 추방 할 것 같은 완전히 플런저를 해제 할 필요가 없습니다. </li><li> (도 1C 참조) 첫번째 중지 지나서 플런저를 누르면 손가락을 사용하여 용기 내로 우유를 추방. 어떤 액체가 손실되지 않도록 소량의 추방을 용이하게하기 위해, 튜브의 측면에 대한 피펫 팁을 누릅니다. </li><li> 어떤 젖꼭지를 건너하지 않도록 수동으로 시계 방향 또는 반 시계 방향으로 하나의 이동, 각 젖꼭지에서 우유를 표현하기 위해 계속합니다. 그것은 다시 와서는 다른 것보다 더 많은 우유를 생산해야 지속적으로 같은 젖꼭지에서 우유를 표현하기 위해 허용하고 유용한 모두 있습니다. </li></ol> 댐 4. 마취 반전 <ol><li> 대부분의 경우,이 둑이 착유 프로세스 중에 일어나 시작하기 시작하는 것이 일반적이다. 이 경우가 아니라면, CAG에 댐을 배치전자 간접적으로 가열 된 순환 담요로 열원, 아래 그녀는 일어나 시작할 때까지. 참고 : 댐, 일어나 그녀가 그녀 자신에 그녀의 새장에 대해 걸을 수있을 때까지 그녀의 활동의 확대 관찰을 계속하기 시작. </li><li> 댐이 투쟁하지 않고 새장에 대해 이동하면, 그녀의 쓰레기와 함께 그녀의 원래 케이지에 그녀를 다시 배치합니다. 악영향 우유 수집 한 후 먹이 새끼의 능력에 대해 언급하지 않았습니다. </li></ol> 2. 문착 착유 프로토콜 이 프로토콜에서 설명하는 방법은 IACUC에 의해 승인되었다. 자손에서 미상의 1. 분리 <ol><li> 착유 할 미상을 선택합니다. 리브스 &#39;문착 사슴은 일반적으로 하나의 새끼 사슴 2를 낳을. 초유 8 필수 영양소에 대한 액세스를 얻을 수있는 새끼 사슴의 기회를 허용하는 암컷에게 출산 후 하루 우유. 참고 : 새끼 사슴은 보통 숨기고 PROC 동안 다시 나타나지edure; 어머니 - 자식 쌍의 분리는 필요하지 않습니다. </li></ol> 옥시토신, 마취 눈 윤활유의 2. 관리 <ol><li> 근육 옥시토신의 10 IU / kg (IM)를 관리 할 수​​ 있습니다. 옥시토신은 우유 내리기를 자극하는 수유의 여성의 유방 동맥에 작용하는 호르몬이다. 옥시토신은 수의사로부터 획득 할 수있다. </li><li> BAM의 마취에게 IM (11)를 관리 butorphanol 0.45 ㎎ / ㎏, azaperone 0.25 ㎎ / ㎏, medetomadine 0.07 ㎎ / ㎏을 포함. BAM 마취 혼합물의 하나의 용량은 전체 우유 수집을위한 충분한 시간을 제공합니다 약 20 ~ 30 분에 대한 문착 마취를합니다. 마취에 대한 또 다른 옵션은 약 10 ~ 15 분 동안 문착 마취가 1-2 ㎎ / ㎏,에서 미다 졸람입니다. 이것은 우유 수집을위한 충분한 시간을 제공하지만 BAM 및 동물이 짧은 시간주기의 끝에서 탈출하려고 시도 할 수 않고, 마취가 더 빠르게 대사된다. 참고 : 통증에 대한 최소 응답투쟁없이 MJ를 보유하는 R1의 능력 다음에 귀를 접촉시 약간의 반사 신경, 동물이 성공적으로 마취되었음을 나타냅니다. 주 : 완전히 원래 투여 량으로 마취되지 문착의 경우, 연구자는 다른 관리있다 ¼ 또는 이미왔다 진정의 동물 및 / 또는 레벨의 크기에 따라 마취 혼합물의 일본어 도즈 ½ 달성. 그러나, 이것은 마취 부작용의 가능성을 높일 수 있고, 또한 문착 더 깊게 마취 및 / 또는 시간의 긴 기간 동안 마취를 당할 수도있다. </li><li> 마취 동안 건조에서 문착의 눈을 방지하기 위해 각각의 눈과 확산의 모서리에 윤활제의 작은 금액을 적용합니다. </li></ol> 3. 우유 컬렉션 우유 수집은 쉽게 두 연구자와 함께 수행됩니다 에 마취 문착을 보유하는 한 연구원랩 수동 (R1이라 함) 우유, 그리고 편안하고 안전한 위치에 문착의 머리를 유지하고 우유 (R2)를 수집하는 두 번째 연구원을 표현하면서. <ol><li> 사용되는 마취제에 따라 착유들은 (미다 졸람 유발) 또는 2) 침구없는 대기실에서 청결을 유지하기 위해 (BAM-절차를 수행하는 동안 깨어 있어야 그들에게 안전한 장소를 제공하기 위해 펜에 하나 1)을 수행해야 ) 유도. </li><li> R1과 R2는 우유를 유지하는 에탄올을 묻힌 거즈 몇 15의 ML 원뿔 폴리 프로필렌 튜브를 장착해야한다. </li><li> 옥시토신을 적용하는 것을 시작으로, 우유 내림은 문착의 유방 영역에 표시 될 것입니다. R1 : 장갑 낀 손과 손가락뿐만 아니라, 전체 유방 및 에탄올을 적신 거즈를 가진 동물의 각각의 유두을 제균. R2 : 호흡의 용이성을 허용하고 반추위의 역류를 방지 할 수있는 안전하고 편안한 위치에 문착의 머리를 잡아. 포집 관의 CL을 잡고<html> 유두에 OSE는 잠재적 인 오염을 방지하기 위해 그것을 건드리지 않고 젖이 되. </li><li> 젖꼭지는 우유 부풀어 오른 때까지 부드럽게 상승 움직임에 유방 조직을 짜내는 엄지 손가락과 집게 손가락을 사용하여 하나의 젖꼭지에서 우유를 표현하고 부드럽게 그림 2 참조 (유두에서 그리고 R2 들고 튜브에 우유를 롤 ). </li><li> 참고 : R2가 더 우유를 거의 낭비 될 수 있도록 컬렉션 튜브가 위치해야하는 것이 중요하므로 우유, 스트림에 나옵니다. </li><li> 문착의 유방은 사분면으로 나누어 져 있습니다. R1 : 우유가 더 이상 쉽게 흘러 나올 때까지 각 사분면에서 우유를 표현하지를 계속합니다. 우유 한 젖꼭지로부터 발현 될 수없는 경우, 제 복귀하기 전에 모든 다른 유두에서 표현. 그것은 다시 와서는 다른 것보다 더 많은 우유를 생산해야 지속적으로 같은 젖꼭지에서 우유를 표현하기 위해 허용하고 유용한 모두 있습니다. </li></ol> 미상 4. 마취 반전 t는 &quot;&gt; 그것은. 대부분의 경우, 암컷은 모든 우유가 표현되기 전에 탈출을 시도합니다 착유 과정에서 일어나 시작 미다 졸람 유도 미상 일반적입니다. 마이너 구속은 우유를 증가하기위한 노력의 일환으로 사용된다 수율은 있지만 연구자와 암컷 모두의 안전과 편안함은 똑같이 중요하다. <ol><li> BAM의 빠른 반전을위한 ㎎ / medetomadine 피하 2.5 밀리그램 atipamezole 관리 미상 마취. 주 : 마취의 두 가지 유형으로, 그녀는 비틀 또는 하강하지 않고 자신의 걸을 수있을 때까지 미상의 경과 관찰을 유지하기 위해 필요하고, 흡입의 두려움이나 질식하지 않고 먹고 마실 수있다. 악영향 우유 수집 한 후 간호사 새끼 사슴의 능력에 대해 언급하지 않았습니다. </li></ol>

<ol>
	<li>Dueling, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , (2004).</li><li>Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breeding+cycle+of+the+Formosan+Reeves+muntjac+(Muntiacus+reevesi+micrurus)+in+northern+Taiwan,+Republic+of+China.">Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China.</a> Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).</li><li>Browning, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transmission+of+prions+from+mule+deer+and+elk+with+chronic+wasting+disease+to+transgenic+mice+expressing+cervid+PrP.">Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP.</a> J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).</li><li>Van de perre, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transfer+of+antibody+via+mother's+milk.">Transfer of antibody via mother's milk.</a> Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).</li><li>Maden, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+modified+mice+produce+human+milk+protein.">Genetically modified mice produce human milk protein.</a> BioNews. , (2009).</li><li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat.">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).</li><li>Depeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+collecting+milk+from+mice.">Methods for collecting milk from mice.</a> J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li><li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Milk+yield+and+composition+in+mice:+effects+of+litter+size+and+lactation.">Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation.</a> 84 (1), 127-133 (1986).</li><li>Hedrich, H. J., Bullock, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+mouse.">The laboratory mouse.</a> , 735-736 (2004).</li><li>Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxytocin+is+required+for+nursing+but+is+not+essential+for+parturition+or+reproductive+behavior.">Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).</li><li>Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Butorphanol-azaperone-medetomidine+for+immobilization+of+captive+white-tailed+deer.">Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer.</a> 45 (2), 457-467 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

마우스 1 등의 마우스에서 우유를 수집 할 때 고려해야 할 여러 가지 요인이) 수집을 위해 따로 시간의 양, 투여 옥시토신 2) 용량, 3) 댐은 간호 4) 양이 얼마나 많은 새끼가 있습니다 컬렉션의 분만시 이후 경과 된 시간. 지침으로 이전의 연구를 사용하여, 우리는 우유 생산 조건을 최적화하기 위해 밖으로 설정합니다. 이전 연구는 직접 산자 ...

동물 모델은 체외 분석에 의해 얻어 질 수없는 질병의 병리에 대한 통찰력을 제공합니다. 가장 효과적인 결과를 제공하기 위해, 밀접 질환 및 그와 관련된 종의 동물 모델을 사용하는 것이 중요하다. 예를 들어, 꿰 문착 (Muntiacus reevesi에), cervid 프리온 단백질 (CerTgPrP)를 3 표현하는 작은 아시아 사슴 1, 2, 형질 전환 마우스는 cervid 종에 유용한 동물 모델입니다. 두 종은 연중 번식을 허용 polyestrous이며, 따라서 임신 관련 조직과 체액에 대한 일관성있는 소스는 cervid 생물학의 특정 메커니즘을 연구 할 수 있습니다. 우유의 연구는 인간보다 동물 모델에서 수행 더 간단하게 (저렴하게)있는 응용 프로그램의 광대 한 배열이있다. 연구원은 1) 전염성 질병 전파의 잠재적 인 소스로 우유와 초유를 조사 수, 개발까지의 자손에게 어머니로부터 전송 2) 면역 글로불린수동 면역 4, 3) 락토페린의 pment 연구자가 현재 시도하고 수동 면역에 관련된 인간의 모유에서 발견되는 단백질은 상업적으로 5를 생산하고 있습니다. 작은 동물에서 우유의 상당한 양을 수집하는 것은 어려운 작업이 될 증명할 수 있습니다. 로저스는 이후 마우스에 사용 된 쥐 6에서 우유를 수집하는 방법을 제안했다. DePeters 및 호비는 진공 원에 부착 착유 유닛 (의 구성을 필요로 우유 컬렉션, 파스퇴르 피펫에 부착 된 고무 피펫 전구에 의해 생성 수동으로 생성 된 진공을 이용 하나, 그리고 제 두 가지 방법을 제안 그러한 마우스 우유 7을 수확 할 수있는 수도꼭지) 등. 여기에서 우리는 마우스 만 쉽게 사용할 실험실 장비 및 기본적인 기술 능력을 필요로 꿰 문착 사슴, 양에서 우유를 수집하기위한 간단하고 저렴한 방법을 제안한다. 우리의 방법은 다양한 우유의 충분한 볼륨을 생성응용 프로그램.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1009">
	<tbody>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:360px;">Materials-Mouse</td>
			<td style="width:297px;"></td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:116px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Material/Reagent</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg)</td>
			<td>MWI/Vedco</td>
			<td>011075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg)</td>
			<td>MWI/Vedco</td>
			<td>NADA 139236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye lubricant</td>
			<td>MWI/Apexa</td>
			<td>701013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxytocin (2 IU/kg)</td>
			<td>Vet One</td>
			<td>501013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Materials- Muntjac</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Material/Reagent</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Midazolam (1-2 mg/kg)</td>
			<td>Amerisource Bergen Drug Corp</td>
			<td>924326</td>
			<td>optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg)</td>
			<td>Fort Dodge Animal Health</td>
			<td>NADA 135-780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Azaperone tartrate (0.25 mg/kg)</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Medetomadine HCl (0.07 mg/kg)</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg)</td>
			<td>Orion Corporation</td>
			<td>NADA 141-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Oxytocin (10 IU/kg)</td>
			<td>Vet One</td>
			<td>501013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Equipment- Mouse</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Equipment</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">P-200 Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">200 &#956;L pipette tips</td>
			<td>Light Labs</td>
			<td>B-2004-SH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">1 ml syringes</td>
			<td>MWI</td>
			<td>005427</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">27 gauge needles</td>
			<td>MWI</td>
			<td>002031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;"></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;">Equipment- Muntjac</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Name of Equipment</td>
			<td>Vendor</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">15 ml conical tubes</td>
			<td>VWR</td>
			<td>21008-918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">22 gauge needles</td>
			<td>MWI</td>
			<td>873</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">3 ml luer lock syringes</td>
			<td>MWI</td>
			<td>001377</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

milk collection methods for mice and reeves' muntjac deer

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.

마우스 우리의 실험에서, 우리는 몇 가지 변수에 의존 한 실험 쥐에서 우유의 약 100 ~ 400 μl를 수집 할 수 있음을 확인했다. 이러한 변수는) 수집을 위해 따로 시간의 양, 2) 옥시토신의 투여 량 투여를, 1을 포함 3) 댐은 간호 및 시간 포스트 분만 4) 양이 얼마나 많은 새끼. 우리의 연구는 댐은 적어도 2 시간 동안 그들의 자손에서 분리 될 때 가장 높은 수익률을 얻?...

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Milk Collection Methods for Mice and Reeves&#039; Muntjac Deer

Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves&#8217; muntjac deer.

마우스 및 꿰 문착 사슴 우유 수집 방법

Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen&#8217;s native ...

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Research

JoVE Journal

Biology

Milk Collection Methods for Mice and Reeves' Muntjac Deer

19.6K 조회수.  Colorado State University. Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer. 

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Gibberella zeae Ascospore Production and Collection for Microarray Experiments.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain quality. F. graminearum also causes stalk and ear rots of maize and is a producer of mycotoxins such as the trichothecenes that contaminate grain and are harmful to humans and livestock (Goswami and Kistler, 2004).

The fungus produces two types of spores. Ascospores, the propagules resulting from sexual reproduction, are the main source of primary infection.  These spores are forcibly discharged from mature perithecia and dispersed by wind (Francl et al 1999). Secondary infections are mainly caused by macroconidia which are produced by asexual means on the plant surface. To study the developmental processes of ascospores in this fungus, a procedure for their collection in large quantity under sterile conditions was required. Our protocol was filmed in order to generate the highest level of information for understanding and reproducibility; crucial aspects when full genome gene expression profiles are generated and interpreted. In particular, the variability of ascospore germination and biological activity are dependent on the prior manipulation of the material. The use of video for documenting every step in ascospore production is proposed in order to increase standardization, complying with the increasingly stringent requirements for microarray analysis. The procedure requires only standard laboratory equipment. Steps are shown to prevent contamination and favor time synchronization of ascospores.

To study the developmental processes of ascospores in Gibberella zeae, a procedure for collection under sterile conditions is filmed in order to generate the highest level of information for protocol description. This should facilitate the reproducibility of the experiment, a crucial aspect when full genome expression profile tests are implemented.

Microarray 실험에 대한 Gibberella zeae Ascospore 생산 및 수집.

Fusarium graminearum Schwabe (teleomorph Gibberella zeae) is a plant pathogen causing scab disease on wheat and barley that reduces crop yield and grain ...

연구

생물학

Seawater Sampling and Collection

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses. For today's demonstration samples were collected from the deck of the HMS John Strickland operating in Saanich Inlet. An A-frame derrick, with a multi-purpose winch and cable system, is used in combination with Niskin or Go-Flo water sampling bottles. Conductivity, Temperature, and Depth (CTD) sensors are also used to sample the underlying water mass. To minimize outgassing, trace gas samples are collected first.  Then, nutrients, water chemistry, and cell counts are determined. Finally, waters are collected for biomass filtration. The set-up and collection time for a single cast is ~1.5 hours at a maximum depth of 215 meters. Therefore, a total of 6 hours is generally needed to complete the collection series described here.

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass concentration, nucleic acid purification, cell abundance, nutrient and trace gas analyses.

해수 샘플링 및 수집

This video documents methods for collecting coastal marine water samples and processing them for various downstream applications including biomass ...

Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal colony. Proper collection of tissues for further histological processing can impact the quality of testing results. This article describes the conduct of a basic gross examination including identification of heart, liver, lungs, kidneys, and spleen, as well as how to collect those organs. Additionally four of the more difficult tissue/sample collection techniques are demonstrated. Lung collection and perfusion can be particularly challenging as the tissue needs to be properly inflated with a fixative in order for inside of the tissue to fix properly and to enable thorough histologic evaluation. This article demonstrates the step by step technique to remove the lung and inflate it with fixative in order to achieve optimal fixation of the tissue within 24 hours. Brain collection can be similarly challenging as the tissue is soft and easily damaged. This article demonstrates the step by step technique to expose and remove the brain from the skull with minimal damage to the tissue. The mesenteric lymph node is a good sample type in which to detect many common infectious agents as enteric viruses persist longer in the lymph node than they are shed in feces. This article demonstrates the step by step procedure for locating and aseptically removing the mesenteric lymph node. Finally, identification of infectious agents of the respiratory tract may be performed by bacterial culture or PCR testing of nasal and/or bronchial fluid aspirates taken at necropsy. This procedure describes obtaining and preparing the respiratory aspirate sample for bacterial culture and PCR testing.

This article describes the procedures for conducting a basic postmortem examination of a mouse or rat, and the collection of basic organs, as well as more challenging sample types from for histological, microbiological, and PCR evaluation.

진단 검시와 고양이와 마우스의 선택 조직 및 샘플 수집

There are multiple sample types that may be collected from a euthanized animal in order to help diagnose or discover infectious agents in an animal ...

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has since been used extensively as a model organism 1. C. elegans possesses key attributes such as simplicity, transparency and short life cycle that have made it a suitable experimental system for fundamental biological studies for many years 2. Discoveries in this nematode have broad implications because many cellular and molecular processes that control animal development are evolutionary conserved 3.
C. elegans life cycle goes through an embryonic stage and four larval stages before animals reach adulthood. Development can take 2 to 4 days depending on the temperature. In each of the stages several characteristic traits can be observed. The knowledge of its complete cell lineage 4,5 together with the deep annotation of its genome turn this nematode into a great model in fields as diverse as the neurobiology 6, aging 7,8, stem cell biology 9 and germ line biology 10. 
An additional feature that makes C. elegans an attractive model to work with is the possibility of obtaining populations of worms synchronized at a specific stage through a relatively easy protocol. The ease of maintaining and propagating this nematode added to the possibility of synchronization provide a powerful tool to obtain large amounts of worms, which can be used for a wide variety of small or high-throughput experiments such as RNAi screens, microarrays, massive sequencing, immunoblot or in situ hybridization, among others. 
Because of its transparency, C. elegans structures can be distinguished under the microscope using Differential Interference Contrast microscopy, also known as Nomarski microscopy. The use of a fluorescent DNA binder, DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole), for instance, can lead to the specific identification and localization of individual cells, as well as subcellular structures/defects associated to them.

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

The easiness of maintaining and propagating the nematode C. elegans make it a nice model organism to work with. The possibility of synchronizing worms allows the work with a significant amount of subjects at the same developmental stage, what facilitates the study of one particular process in many animals.

기본<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; 방법 : 동기화 및 전망

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound responses and repair in this model have illuminated our understanding of the cytoskeletal and genomic responses to tissue damage. The two most commonly used methods to wound the C. elegans adult skin are pricks with microinjection needles, and local laser irradiation. Needle wounding locally disrupts the cuticle, epidermis, and associated extracellular matrix, and may also damage internal tissues. Laser irradiation results in more localized damage. Wounding triggers a succession of readily assayed responses including elevated epidermal Ca2+ (seconds-minutes), formation and closure of an actin-containing ring at the wound site (1-2 hr), elevated transcription of antimicrobial peptide genes (2-24 hr), and scar formation. Essentially all wild type adult animals survive wounding, whereas mutants defective in wound repair or other responses show decreased survival. Detailed protocols for needle and laser wounding, and assays for quantitation and visualization of wound responses and repair processes (Ca dynamics, actin dynamics, antimicrobial peptide induction, and survival) are presented.

Methods for Skin Wounding and Assays for Wound Responses in C. elegans

The adult C. elegans skin is a tractable model for studies of epithelial wound responses, including wound closure, scar formation, and innate immunity.

에 상처 응답에 대한 피부 상처에 대한 방법 및 분석 실험<em&gt; C. 엘레</em

The C. elegans epidermis and cuticle form a simple yet sophisticated skin layer that can repair localized damage resulting from wounding. Studies of wound ...

Milk Collection in the Rat Using Capillary Tubes and Estimation of Milk Fat Content by Creamatocrit

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also contains a vast number of bioactive compounds that greatly affect the development of the neonate. The analysis of milk components will help elucidate key factors that link maternal metabolism and health with offspring growth and development. The laboratory rat represents a popular model organism for maternal studies, and rat milk can be used to examine the effect of various maternal physiological, nutritional, and pharmacological interventions on milk components, which may then impact offspring health. Here a simple method of manually collecting milk from the lactating rat that can be performed by a single investigator, does not require specialized vacuum or suction equipment, and provides sufficient milk for subsequent downstream analysis is described. A method for estimating the fat content of milk by measuring the percentage of cream within the milk sample, known as the creamatocrit, is also presented. These methods can ultimately be used to increase insight into maternal-child health and to elucidate maternal factors that are involved in proper growth and development of offspring.

Milk is a primary source of nutrition for the neonate. Analysis of milk components may provide insight into maternal factors that affect offspring health. This protocol describes a manual method of collecting milk samples from the lactating rat, which can then be used for further downstream analysis.

모세관 튜브 및 Creamatocrit에 의한 우유 지방 함량의 평가를 사용하여 쥐의 우유 컬렉션

Milk, as the sole source of nutrition for the newborn mammal, provides the necessary nutrients and energy for offspring growth and development. It also ...

Methods for the Isolation, Culture, and Functional Characterization of Sinoatrial Node Myocytes from Adult Mice

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). These pacemaker APs reflect the coordinated activity of numerous membrane currents and intracellular calcium cycling. However the precise mechanisms that drive spontaneous pacemaker activity in SAMs remain elusive. Acutely isolated SAMs are an essential preparation for experiments to dissect the molecular basis of cardiac pacemaking. However, the indistinct anatomy, complex microdissection, and finicky enzymatic digestion conditions have prevented widespread use of acutely isolated SAMs. In addition, methods were not available until recently to permit longer-term culture of SAMs for protein expression studies. Here we provide a step-by-step protocol and video demonstration for the isolation of SAMs from adult mice. A method is also demonstrated for maintaining adult mouse SAMs in vitro and for expression of exogenous proteins via adenoviral infection. Acutely isolated and cultured SAMs prepared via these methods are suitable for a variety of electrophysiological and imaging studies.

Methods are demonstrated for the isolation of sinoatrial node myocytes (SAMs) from adult mice for patch clamp electrophysiology or imaging studies. Isolated cells can be used directly or can be maintained in culture to permit expression of proteins of interest, such as genetically encoded reporters.

성인 마우스에서 동방 노드 근육 세포의 분리, 문화 및 기능 특성화하는 방법

Sinoatrial node myocytes (SAMs) act as the natural pacemakers of the heart, initiating each heart beat by generating spontaneous action potentials (APs). ...

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in mammals. However, humans cannot oxidize cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid to cytidine monophosphate-N-glycolylneuraminic acid due to a primary exon deletion of the CMAH gene. To understand the effects and implications of the lack of CMAH activity in more detail, a Cmah knock-out model in mice is of keen interest in basic and applied research. The analysis method to determine the phenotype of this mouse model is herein described in detail, and is based on the detection of both N-acetylneuraminic acid and N-glycolylenuraminic acid in the liver and milk of wild-type and Cmah knock-out mice. Endogenous sialic acids are released and derivatized with o-phenylenediamine to generate fluorogenic derivatives, which can be subsequently analyzed by HPLC. The presented protocol can be also applied for the analysis of milk and tissue samples from various other origins, and may be of use to investigate the nutritional and health effects of N-glycolylneuraminic acid.

Determination of Sialic Acids in Liver and Milk Samples of Wild-type and CMAH Knock-out Mice.

We describe a HPLC-based method for the determination of N-acetylneuraminic acid and N-glycolylenuraminic acid in mouse liver and milk.

야생형과 간암의 시알 산의 결정<em&gt; CMAH</em&gt; 넉 아웃 마우스.

CMAH (cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acid hydroxylase) is responsible for the oxidation of cytidine monophosphate-N-acetylneuraminic acids in ...

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish species is that it possesses interfertile cave and river-dwelling populations. This enables the genetic mapping of heritable traits that were fixed during adaptation to the different environments of these populations. While this species can be maintained and bred in the lab, it is challenging to both obtain embryos during the daytime and create hybrid embryos between strains. In vitro fertilization (IVF) has been used with a variety of different model organisms to successfully and repeatedly breed animals in the lab. In this protocol, we show how, by acclimatizing A. mexicanus to different light cycles coupled with changes in water temperature, we can shift breeding cycles to a chosen time of the day. Subsequently, we show how to identify suitable parental fish, collect healthy gametes from males and females, and produce viable offspring using IVF. This enables related procedures such as the injection of genetic constructs or developmental analysis to occur during normal working hours. Furthermore, this technique can be used to create hybrids between the cave and surface-dwelling populations, and thereby enable the study of the genetic basis of phenotypic adaptations to different environments.

Gamete Collection and In Vitro Fertilization of Astyanax mexicanus

In vitro fertilization is a commonly used technique with a variety of model organisms to maintain lab populations and produce synchronized embryos for downstream applications. Here, we present a protocol that implements this technique for different populations of the Mexican tetra fish, Astyanax mexicanus.

아스티야낙스 멕시코의 게임테 컬렉션 및 체외 수정

Astyanax mexicanus is emerging as a model organism for a variety of research fields in biological science. Part of the recent success of this teleost fish ...

Tissue Collection of Bats for -Omics Analyses and Primary Cell Culture

As high-throughput sequencing technologies advance, standardized methods for high quality tissue acquisition and preservation allow for the extension of these methods to non-model organisms. A series of protocols to optimize tissue collection from bats has been developed for a series of high-throughput sequencing approaches. Outlined here are protocols for the capture of bats, desired demographics to be collected for each bat, and optimized methods to minimize stress on a bat during tissue collection. Specifically outlined are methods for collecting and treating tissue to obtain (i) DNA for high molecular weight genomic analyses, (ii) RNA for tissue-specific transcriptomes, and (iii) proteins for proteomic-level analyses. Lastly, also outlined is a method to avoid lethal sampling by creating viable primary cell cultures from wing clips. A central motivation of these methods is to maximize the amount of potential molecular and morphological data for each bat and suggest optimal ways to preserve tissues so they retain their value as new methods develop in the future. This standardization has become particularly important as initiatives to sequence chromosome-level, error-free genomes of species across the world have emerged, in which multiple scientific parties are spearheading the sequencing of different taxonomic groups. The protocols outlined herein define the ideal tissue collection and tissue preservation methods for Bat1K, the consortium that is sequencing the genomes of every species of bat.

This is a protocol for the optimal tissue preparation for genomic, transcriptomic, and proteomic analyses of bats caught in the wild. It includes protocols for bat capture and dissection, tissue preservation, and cell culturing of bat tissue.

-Omics 분석 및 1 차 적인 세포 배양을 위한 박쥐의 조직 수집

As high-throughput sequencing technologies advance, standardized methods for high quality tissue acquisition and preservation allow for the extension of ...