جمع الدم من خلال ثقب الوريد تحت الترف في الفئران. جمع عينات الدم من الفئران أمر ضروري في معظم مختبرات الأبحاث. النهج التقليدية لجمع الدم في الفئران هو قطع الذيل، عندما تكون هناك حاجة إلى أقل من 100 عينة ميكرولتر.
ومع ذلك، إذا كان هناك حاجة إلى أكثر من 100 ميكرولتر من الدم عند نقطة زمنية غير نهائية، فإن النزيف الرجعي المداري أو دون المداري أو جمع الدم تحت المستوى، هي التقنيات الأكثر شيوعاً. في بعض المواقع تم اعتماد شق الوريد الوداجي أو القسطرة كطرق بديلة. ومع ذلك ، فإن الطرق المذكورة أعلاه مؤذية للفئران.
على أساس أبحاثنا الرسمية ، نقدم هنا استراتيجية اقتصادية ولطيفة جديدة لجمع الدم من الوريد تحت الترف في الفئران. السلامة والجدوى، ويتم الحصول على حجم الدم مع هذه التقنية، يتم عرض ومناقشتها. بعد التخدير العام، تكمن الماوس في موقف supine.
تنظيف الفضاء infraclavicular مع 75٪ الإيثانول. تأكد من الترقوة والفوساية فوق المحورة قبل ثقب. تحديد موقع ثقب في منتصف الترقوة.
تحريك الإبر متفوقة وإلى أعلى نحو فوساي فوقاستيرينال، فقط الخلفي إلى الترقوة. بعد تحريك ثلاثة إلى أربعة ملليمترات إلى الأمام، والحفاظ على الضغط السلبي في الحقنة، وسحب ببطء مرة أخرى الإبرة. سوف يستنزف الدم في الحقنة أثناء الانسحاب.
بعد جمع الدم، اضغط على موقع الثقب بهدوء لمدة دقيقة إلى دقيقتين لوقف النزيف. إعداد المواد المطلوبة، بما في ذلك 75٪ الإيثانول، شريط لاصق، وكيل إزالة الشعر، أنابيب، 1.0 ملليتر حقنة متصلة مع إبرة، مقياس الإلكترونية، الهيبارين، والملوحة. بعد التخدير العام المرضي، ضع الماوس على طاولة العمليات في وضعية الوبين، وعلى بعد 2 إلى 4 سنتيمترات من حافة الطاولة لتسهيل ثقب الوريد.
إصلاح الأطراف في وضع مريح، كما هو مبين في الشكل 2. لم تكن هناك حاجة إلى النوبات أو التهوية الميكانيكية في الإجراء بأكمله. تطبيق عامل الغطاويات حول الفضاء infraclavicular مع مسحة القطن.
بعد ثلاث دقائق، وغسل وكيل إزالة مع مسحة القطن الرطب، لإزالة الفراء وأية الأوساخ مرئية. تعقيم المساحة infraclavicular مع 75٪ الإيثانول، ثم يجف مع الشاش نظيفة. تحديد موقع عظم الترقوة والفوساية فوق الستيرينية بإصبع واحد.
حدد موقع الثقب، بالقرب من منتصف عظم الترقوة، واشتعلت عليه. وضع السبابة اليسرى الجانبي إلى موقع ثقب لإصلاح الجلد والأنسجة تحت الجلد. تحريك الإبرة إلى أعلى في وضع الجمجمة نحو fossae فوق الجمجمة.
بمجرد دخول الإبرة في الأنسجة تحت الجلد ، يجب أن يتحرك إصبع اليد اليمنى إلى الخلف لتشكيل ضغط سلبي. المضي قدما في حقنة لمدة ثلاثة إلى أربعة ملليمترات، ولكن وقف إذا لم يكن هناك استنزاف الدم في الحقنة. ثم سحب ببطء مرة أخرى حقنة، والحفاظ على الضغط السلبي في ذلك.
في معظم المناسبات الدم سيدخل حقنة في سياق سحب الظهر. مرة واحدة يدخل الدم في حقنة، إصلاح حقنة، والحفاظ على الضغط السلبي، حتى حجم المطلوبة من الدم التي تم جمعها في الحقنة. بعد جمع الدم ، اسحب إبرة الثقب ، واضغط على موقع الثقب مع مسحة القطن قليلاً لمدة دقيقة إلى دقيقتين لوقف النزيف ، ثم إرسال الفئران مرة أخرى إلى الأقفاص.
نقل عينة الدم إلى أنبوب الهيبارين لدينا. كررنا هذا الإجراء في 10 فئران كويمي. ونجحت تسعة إجراءات في الجانب الأيمن.
وفشلت إحدى الحالات في ثلاث محاولات في الجانب الأيمن، ونجح جمع الدم في الجانب الأيسر. وتراوحت مدة الدورة الزمنية بين 35 و 126 ثانية. تم تعيين حجم جمع الدم إلى حوالي 200 ميكرولتر.
وقد نجح جمع الدم مع واحد إلى أربع محاولات. نجح أخذ عينات الدم في المحاولة الأولى في اثنين من الفئران، وفي أربع محاولات في فأر واحد، في محاولتين إلى ثلاث محاولات في الفئران الأخرى. وقد تم توضيح جميع البيانات في الجدول 1.
وقد نجت جميع الحيوانات، واستعادت عافيتها في غضون 30 دقيقة بعد أخذ عينات الدم. لم يكن هناك فرق كبير بين الجنس لجميع المعلمات الملاحظة. في الختام ، ثقب الوريد تحت الترف هو طريقة آمنة وفعالة لجمع الدم في الفئران.
وإلى جانب قطع الوريد الذيل وجمع الدم الضفيرة المدارية الرجعية، فإن هذه الطريقة ممكنة ومناسبة للبحوث الرصدية في عدة نقاط زمنية في الفئران.
