يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية حول توليد السقالات الوعائية ، والتي هي في الحقيقة الكأس المقدسة لحقل هندسة الأنسجة. والميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن الحقيبة المضغوطة في اتجاه مقلوب يحسن إزالة الخلية من الأعضاء البشرية غير القابلة للزرع ويتيح لنا أن نفعل ذلك بطريقة عقيمة على مدى إطار زمني مناسب. لإعداد القلب لفك الخلايا، قم أولاً بإجراء فحص داخلي للعيوب المحتملة.
إذا كان هناك عيب الحاجز، تصحيح الخلل مع الغرز المناسبة. بعد ذلك ، ligate فينا cavas متفوقة والدونية مع 2-0 خياطة الحرير. اغرز جدار الأذين الأيمن مع 5-0 PROLENE ، وتشريح الشريان الأورطي بعيدًا عن الشريان الرئوي الرئيسي لتكبيله لاحقًا.
أدخل الموصلات ، وفقًا لقطر الوعاء ، في الشريان الأورطي والشريان الرئوي ، واضمن الموصلات مع 2-0 خياطة حريرية. باستخدام إحدى فتحات الوريد الرئوي، أدخل خط أنابيب عبر الأذين الأيسر نحو البطين الأيسر، واربط خط التسريب بالموصل في الشريان الأورطي وخط تدفق إلى الموصل في الشريان الرئوي. ضع القلب المعد في كيس البوليستر في الاتجاه المقلوب ، ووضع الحقيبة في حاوية ضخ.
ربط كل من الخطوط إلى الموانئ المعنية في سدادة المطاط، وفقا لقطر الحاوية، وإدراج سدادة في غطاء حاوية perfusion لختم الحقيبة البوليستر. ثم، اثقب برنامج تلفزيوني عبر منفذ التسريب من سدادة المطاط للتحقق من تدفق من الشريان الرئوي ومن الخط إدراجها في البطين الأيسر، وذلك باستخدام هذا التدفق لتنظيف الجهاز من أي آثار المتبقية من الدم داخل الأوعية الدموية. عندما يكون القلب جاهزًا ، ضع المُجمّع في اتجاه مستقيم ، واربط خط التسريب ، خط الضغط - الرأس ، خط تدفق الشريان الرئوي ، وخط استنزاف مفاعل حيوي إلى المنافذ السطحية للغطاء المطاطي فوق مفاعل الضخ الحيوي.
ثم، إزالة الخلايا القلب لمدة أربع ساعات مع محلول فرط الطنين، ساعتين مع محلول هابوtonic، 120 ساعة مع كبريتات دوديسيل الصوديوم، أو SDS، وغسل النهائي مع 120 لترا من برنامج تلفزيوني، وكلها تحت ثابت 120 ملليمتر من ضغط الزئبق كما يقاس في الجذر الأبهري. خلال آخر 10 لترا من غسل برنامج تلفزيوني، إضافة 500 ملليلتر من محلول حمض معقم 2.1٪ مطهر مع 10 هيدروكسيد الصوديوم العادي إلى محلول القذف لتعقيم سقالة. عادة، معدل التدفق إلى الشريان الأورطي أثناء عملية إزالة الخلية ينخفض تدريجياً كما يتغير حل القذف من فرط الطنين إلى هابتونيك.
وفي المقابل، يزداد معدل التدفق عندما يتغير محلول التسريب من محلول أدنى درجة إلى محلول SDS، وعند هذه النقطة يوضح معدل تدفق التسريب التقلبات. معدل التدفق من الشريان الرئوي يدل على اتجاه مماثل مع حلول فرط وهوايبونية. غير أن معدل التدفق إلى الخارج أثناء عملية الضخ في النظام العام للتدفقات يظهر انخفاضاً عاماً.
كما أن كفاءة الضخ التاجية تقل بمرور الوقت حيث يتم حقن الكواشف المختلفة من خلال الأوعية الدموية. كما يتم جمع تدفق من الشريان الرئوي والبطين الأيسر في وقت واحد، يمكن مقارنة محتوى الحطام عن طريق التحليل الطيفي. يتناقص عكر السائل من كلا الوعاءين بمرور الوقت خلال القذف، على الرغم من أن التعكر من الشريان الرئوي يسلك تغيرًا أكثر فجائيًا في اللون مقارنةً بتلك التي لوحظت من البطين الأيسر خلال فترة القذف الأولية.
تقييم العلاقة بين النزوح عن العكرة ومخلفات الخلية بواسطة مقايسة بروتين حمض ثنائي الcinchoninic من ستة قلوب بشرية مزيلة الخلية يكشف عن وجود علاقة خطية بين تركيز البروتين والتعكرة السائلة. أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم مراقبة معدل التدفق وجمع البيرفوسات بشكل دوري لمراقبة عملية التسريب فعليًا. بعد هذا الإجراء، يمكن استخدام تقنيات أخرى مثل التقييم الميكانيكي أو اختبار العقم لتقييم دقة السقالة واستخدامها المحتمل لإعادة الخلية لتوليد أنسجة قلبية وظيفية.
بعد تطورها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال الطب التجديدي وهندسة الأنسجة لاستكشاف جيل الأعضاء الوعائية الكاملة ، وتغيير حقل زرع الأعضاء الصلبة حرفيًا. لا تنس أن العمل مع الأعضاء والأنسجة البشرية والمواد الكيميائية مثل SDS يمكن أن تكون خطرة للغاية، ودائما ارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة عند القيام بهذا الإجراء.
