جمع الأنسجة لاختبار داء الكلب له مخاطر واضحة وغير فاتحة. يجب على الفني استخدام الطرق الأكثر أمانًا المتاحة وارتداء معدات الحماية الشخصية المناسبة. وتوفر هذه البروتوكولات تقنيات خرّب آمنة دون استخدام أدوات أو مناشير الطاقة، مما يقلل من إنتاج الهباء الجوي.
ويمكن أيضا أن يتم تنفيذ بروتوكول الحيوان الكبير في هذا المجال. إن استخدام طريقة استرجاع العينات الحيوانية الكبيرة في الحقل يزيل التحدي المتمثل في نقل رأس يزيد وزنه عن 45 كيلوغراماً إلى المختبر. طريقة الحيوان الكبيرة مماثلة للبروتوكول الأوروبي لاسترجاع عينة الدماغ الإسفنجية القابلة للانتكاس ويمكن استخدامها لأي تحقيق باستخدام جذع الدماغ والمخيخ.
لاسترداد المخيخ و الدماغ بواسطة طريقة البطن، ضع الجانب البطني للعينة مع الأنف الموجهة distally نحو الجزء الخلفي من مجلس الوزراء السلامة البيولوجية. عقد مطرقة العظام في اليد المهيمنة وإزميل عضو المجلس في اليد الأخرى، وضع إزميل في زاوية 45 درجة مع نقطة الزاوية إلى إزميل في فتح شكل V بين الجانب الأيمن من العظام الصدغية والأقذاطي. ضرب الجزء العلوي من إزميل مع مطرقة حتى عظام اثنين منفصلة.
وجعل قطع المجاورة للعظم الأساس. فصل العظام الصدغية والقذالي على الجانب الأيسر من العينة كما هو موضح للتو. واستخدم الإزميل لثني منطقة V من الجمجمة إلى الأسفل لفضح منطقة الربخ في الدماغ بأكملها.
ثم، استخدام مقص ملقط ليغرف خارج الدماغ والمخيخ، وإزالة أي قطع الأنسجة المتبقية من الجمجمة حسب الضرورة. إذا لم يسمح العينة موقف استرجاع البطنية العينة dorsally، مع الأنف الموجهة distally نحو الجزء الخلفي من مجلس الوزراء السلامة البيولوجية. واستخدام مخالب ورم لفهم العضلات الصدغية اليسرى مع أسنان التناسولة.
الضغط على مقبض لقفل الأسنان حول الأنسجة واستخدام سكين نحت حاد لقطع العضلات الصدغية وصولا الى العظام. تدوير العينة 180 درجة مع تيناكولا والسكين وتكرار شق على العضلات الصدغية المقابلة لفضح الجمجمة. العودة إلى الرأس إلى اتجاهها الأصلي ووضع إزميل في زاوية 45 درجة مع نقطة الزاوية إلى إزميل على مركز الجمجمة في منعطف العظام الجدارية وداخل الجدارية.
وضرب الجزء العلوي من إزميل مع مطرقة حتى يتم فتح أفقي على النصف العلوي من الجمجمة في العظام الجدارية. تدوير العينة 180 درجة وجعل فتحة على الجانب الآخر من الجمجمة كما أظهرت للتو. ضع الرأس حسب الحاجة لإدراج نقطة الإزميل في نهاية القطع الأول بزاوية 90 درجة إلى الفتح الأفقي وضرب الإزميل حتى يصل الفتح إلى عظم القذالي.
لفة العينة لجعل فتحة على عظم القذالي المعاكس في نفس الطريقة. فتحات في الجمجمة ينبغي أن تشبه رأسا على عقب U.Insert الأسنان من تينولا في الجمجمة في الجزء السفلي من أنت وسحب العظام إلى الوراء لفضح نهاية السد من المخيخ و المخيخ. ثم استخدام مقص كمسبقة لابعاد المخيخ بأكمله من داخل تجويف.
واستخدام ملقط الأنسجة لندف من الدماغ من الخوامن. بالنسبة لاسترجاع المخيخ الحيواني الكبير و جذع الدماغ ، ضع العينة بحيث يكون الجزء الظهري من الجمجمة على اتصال مع سطح النخر. مع الجزء السد من الجمجمة والحصانات التي تواجه الجزء الأمامي من مجلس الوزراء السلامة الحيوية.
فهم جذع الدماغ مع ملقط. أدخل سكين الخنجر المعدلة في ماغنوم الفصين بين الحبل الشوكي والهرم الشوكي قدر الإمكان ونظف حول الحبل الشوكي لفصل المخيخ و الدماغ عن السحايا. ثم، سحب الجذعية من الهذات مع ملقط.
عندما تم إدخال السكين من خلال ماغنوم الفورامين، بزاوية بلطف شفرة لمتابعة على طول الجمجمة قدر الإمكان وإدراج ملعقة معدنية أو سكين مع مقبض طويل بما فيه الكفاية للوصول إلى تحت الدماغ في الفضاء بين الأنسجة العصبية والجلود الفقري. التحقيق حول المخيخ لضمان أن الاتصالات إلى السحايا في العمود الفقري قد قطعت. عندما تم قطع السحايا تماما تقدم ملعقة rostrally وdrosally لغرف حتى المخيخ.
ثم استخرج المخيخ مع الملعقة. جميع العينات الأرضية المقدمة مع الجماجم بين 31 يناير 2019 و 28 فبراير 2019 كان لديها معلومات عن وجود الرقبة وطريقة التشريح التي تم جمعها. خلال ذلك الوقت، تم نخر 170 رأس مع 18 نوعا ممثلة.
52٪ قطعت رؤوسهم بشكل صحيح. وكان المتبقيون على الأقل فقرة واحدة مرفقة بما في ذلك ثلاث عينات من الجسم كله. تم استخدام طريقة البطن 75٪ من الوقت.
من هؤلاء، كانت الأعناق موجودة على 49. وقدمت ثلاثة كبيرة، وفي حالتين، تم استخدام بروتوكول الحيوانات الكبيرة. وقدم سنجاب واحد مع الجمجمة سحقت وقطع ببساطة بعيدا الجلد يتعرض أنسجة الدماغ لذلك لم تستخدم أي من الأساليب أظهرت.
الأنسجة المستخدمة لصنع الشرائح المجهرية أو المستخرجة من الطرق الجزيئية عند معالجة الحيوانات المتعددة تجنب التلوث عبر باستخدام أدوات قفازات جديدة ومنطقة عمل نظيفة. كن حذرا عند تنفيذ هذه البروتوكولات كما قد تكون مصابة العينات مع فيروس داء الكلب أو غيرها من الأمراض الحيوانية نوي. لاحظ أن الأشياء الحادة قد تكون موجودة أيضًا داخل العينات.
