La raccolta dei tessuti per i test della rabbia presenta pericoli evidenti e non trasparenti. Il tecnico deve utilizzare i metodi più sicuri disponibili e indossare adeguati dispositivi di protezione individuale. Questi protocolli forniscono tecniche di necroscopia sicure senza utilizzare utensili elettrici o seghe, riducendo al minimo la produzione di aerosol.
Il grande protocollo animale può anche essere eseguito sul campo. L'uso del grande metodo di recupero del campione animale sul campo elimina la sfida di trasportare in laboratorio una testa animale di peso superiore a 45 chilogrammi. Il metodo animale di grandi dimensioni è simile al protocollo europeo per il recupero del campione di encefalopatia spongiforme trasmissibile e può essere utilizzato per qualsiasi indagine che utilizza il tronco encefalico e il cervelletto.
Per recuperare il cervelletto e il tronco encefalico con il metodo ventrale, posizionare il lato ventrale dell'esemplare verso l'alto con il naso diretto distally verso la parte posteriore dell'armadio di biosicurezza. Tenendo un martello ortopedico nella mano dominante e uno scalpello consigliere, invece, posizionare lo scalpello con un angolo di 45 gradi con il punto d'angolo dello scalpello nell'apertura a forma di V tra il lato destro delle ossa temporali e occipitali. Colpire la parte superiore dello scalpello con il martello fino a quando le due ossa si separano.
E fare un taglio adiacente all'osso basisfenoide. Separare le ossa temporali e occipitali sul lato sinistro dell'esemplare come appena dimostrato. E usa lo scalpello per piegare la regione V del cranio verso il basso per esporre l'intera area del rodibroencefalo del cervello.
Quindi, usa forbici e forcelle per raccogliere il tronco encefalico e il cervelletto, rimuovendo tutti i pezzi di tessuto rimanenti dal cranio se necessario. Se il campione non consente il recupero ventrale, posizionare il campione dorsalmente, con il naso diretto distally verso la parte posteriore dell'armadio della biosicurezza. E usa una tenacula tumorale per afferrare il muscolo temporale sinistro con i denti della tenacula.
Spremere il manico per bloccare i denti intorno al tessuto e utilizzare un coltello da intaglio affilato per tagliare il muscolo temporale fino all'osso. Ruotare l'esemplare di 180 gradi con la tenacula e il coltello e ripetere l'incisione sul muscolo temporale opposto per esporre il cranio. Riportare la testa al suo orientamento originale e posizionare lo scalpello con un angolo di 45 gradi con il punto d'angolo allo scalpello al centro del cranio al momento delle ossa parietali e intraparietali.
E colpire la parte superiore dello scalpello con il martello fino a quando non viene effettuata un'apertura orizzontale sulla metà superiore del cranio all'osso parietale. Ruotare l'esemplare di 180 gradi e fare un'apertura sul lato opposto del cranio come appena dimostrato. Posizionare la testa in base alle esigenze per inserire il punto dello scalpello all'estremità del primo taglio con un angolo di 90 gradi fino all'apertura orizzontale e colpire lo scalpello fino a quando l'apertura raggiunge l'osso occipitale.
Arrotolare il campione per fare un'apertura sull'osso occipitale opposto nello stesso modo. Le aperture nel cranio dovrebbero assomigliare a una U capovolta Inserire i denti della tenacula nel cranio nella parte inferiore del te e tirare l'osso all'indietro per esporre l'estremità caudale del cerebro e del cervelletto. Quindi usa le forbici come scoop per indiscrere l'intero cervelletto dall'interno della cavità.
E usa le fasci dei tessuti per stuzzicare il tronco encefalico dal forame. Per un grande recupero del cervelletto animale e del tronco encefalico, posizionare l'esemplare in modo che la parte dorsale del cranio sia a contatto con la superficie della necroscopia. Con la parte caudale del cranio e del forame magnum di fronte alla parte anteriore dell'armadio della biosicurezza.
Afferrare il tronco encefalico con le forcep. Inserire un coltello a spillo modificato nel forame magnum tra il midollo spinale e le meningi spinali per quanto possibile e setacciare intorno al midollo spinale per separare il cervelletto e il tronco encefalico dalle meningi spinali. Quindi, estrarre il gambo dal forame con le forcep.
Quando il coltello è stato inserito attraverso il forame magnum, inclina delicatamente la lama per seguire il cranio il più possibile e inserisci una spatola o un coltello metallico con una maniglia abbastanza lunga da raggiungere sotto il cervello nello spazio tra il tessuto neurale e le meningi spinali. Sonda intorno al cervelletto per assicurarsi che le connessioni alle meningi spinali siano state recise. Quando le meningi sono state completamente recise avanzare la spatola rostralmente e dorsalmente per raccogliere il cervelletto.
Quindi raccogliere il cervelletto con la spatola. Tutti i campioni terrestri presentati con teschi tra il 31 gennaio 2019 e il 28 febbraio 2019 hanno avuto informazioni sulla presenza di un collo e sul metodo di necroscopia raccolto. Durante questo periodo, 170 teste furono necropiche con 18 specie rappresentate.
Il 52% è stato correttamente decapitato. Il resto aveva almeno una vertebra attaccata tra cui tre esemplari di tutto il corpo. Il metodo ventrale è stato utilizzato per il 75% delle volte.
Di questi, i colli erano presenti al 49. Sono stati presentati tre grandi animali e in due casi è stato utilizzato il grande protocollo sugli animali. Uno scoiattolo è stato presentato con un cranio schiacciato e semplicemente tagliando via la pelle esposta il tessuto cerebrale in modo che nessuno dei metodi dimostrati è stato utilizzato.
I tessuti utilizzati per realizzare diapositive di microscopia e o estratti da metodi molecolari durante la lavorazione di più animali evitano la contaminazione incrociata utilizzando nuovi strumenti guanti e un'area di lavoro pulita. Fare attenzione quando si eseguono questi protocolli in quanto gli esemplari possono essere infettati da virus della rabbia o altre malattie zoonotiche. Si noti che gli oggetti appuntiti possono essere presenti anche all'interno dei campioni.
