La recolección de tejidos para las pruebas de rabia tiene peligros obvios y no padres. El técnico debe utilizar los métodos más seguros disponibles y llevar el equipo de protección personal adecuado. Estos protocolos proporcionan técnicas seguras de necropsia sin utilizar herramientas eléctricas o sierras, minimizando la producción de aerosoles.
El protocolo animal grande también se puede realizar en el campo. El uso del método de recuperación de muestras de animales grandes en el campo elimina el desafío de transportar una cabeza de animal que pese más de 45 kilogramos al laboratorio. El método animal grande es similar al protocolo europeo para la recuperación de muestras de encefalopatía espongible transmisible y se puede utilizar para cualquier investigación utilizando el tronco cerebral y el cerebelo.
Para recuperar el cerebelo y el tronco encefálica por el método ventral, coloque el lado ventral de la muestra hacia arriba con la nariz dirigida distalmente hacia la parte posterior del gabinete de bioseguridad. Sosteniendo un mazo ortopédico en la mano dominante y un cincel del concejal en la otra mano, coloque el cincel en un ángulo de 45 grados con el punto de esquina al cincel en la abertura en forma de V entre el lado derecho de los huesos temporales y occipitales. Golpea la parte superior del cincel con el mazo hasta que los dos huesos se separen.
Y hacer un corte adyacente a la basefenoides óseo. Separe los huesos temporales y occipitales en el lado izquierdo del espécimen como se acaba de demostrar. Y usa el cincel para doblar la región V del cráneo hacia abajo para exponer toda el área de rombencéfalo del cerebro.
Luego, usa tijeras y fórceps para sacar el tronco encefálico y el cerebelo, eliminando las piezas de tejido restantes del cráneo según sea necesario. Si la muestra no permite la recuperación ventral de la posición dorsal de la muestra, con la nariz dirigida distalmente hacia la parte posterior del gabinete de bioseguridad. Y usa una tenácula tumoral para agarrar el músculo temporal izquierdo con los dientes de la tenácula.
Apriete el mango para bloquear los dientes alrededor del tejido y utilice un cuchillo de tallado afilado para cortar el músculo temporal hasta el hueso. Gire el espécimen 180 grados con la tenácula y el cuchillo y repita la incisión en el músculo temporal opuesto para exponer el cráneo. Devolver la cabeza a su orientación original y colocar el cincel en un ángulo de 45 grados con el punto de esquina al cincel en el centro del cráneo en la coyuntura de los huesos parietales e intraparietales.
Y golpear la parte superior del cincel con el mazo hasta que se hace una abertura horizontal en la mitad superior del cráneo en el hueso parietal. Gire el espécimen 180 grados y haga una abertura en el lado opuesto del cráneo como acaba de demostrar. Coloque la cabeza según sea necesario para insertar el punto del cincel en el extremo del primer corte en un ángulo de 90 grados con respecto a la abertura horizontal y golpee el cincel hasta que la abertura llegue al hueso occipital.
Enrollar el espécimen para hacer una abertura en el hueso occipital opuesto de la misma manera. Las aberturas en el cráneo deben parecerse a un U al revés U.Inserte los dientes de la tenácula en el cráneo en la parte inferior del tú y tire del hueso hacia atrás para exponer el extremo caudal del cerebro y el cerebelo. Luego usa las tijeras como una cucharada para sacar todo el cerebelo desde dentro de la cavidad.
Y usa fórceps tisulares para sacar el tronco encefálica del foramen. Para la recuperación de cerebelo animal grande y tronco encefálico, coloque el espécimen de modo que la parte dorsal del cráneo esté en contacto con la superficie necropsia. Con la parte caudal del cráneo y foramen magnum frente a la parte frontal del gabinete de bioseguridad.
Agarra el tronco encefálica con fórceps. Inserte un cuchillo de aguja modificado en el foramen magnum entre la médula espinal y las meninges espinales en la medida de lo posible y escarca alrededor de la médula espinal para separar el cerebelo y el tronco encefálico de las meninges de la columna vertebral. Luego, saca el tallo del foramen con fórceps.
Cuando el cuchillo se haya insertado a través del foramen magnum, anule suavemente la hoja para seguir el cráneo tanto como sea posible e inserte una espátula de metal o un cuchillo con un mango lo suficientemente largo como para alcanzar debajo del cerebro en el espacio entre el tejido neural y las meninges de la columna vertebral. Sondear alrededor del cerebelo para asegurarse de que las conexiones con las medingas espinales se han cortado. Cuando las meninges han sido completamente cortadas avanzar la espátula rostral y dorsalmente para recoger el cerebelo.
Luego saca el cerebelo con la espátula. Todas las muestras terrestres presentadas con cráneos entre el 31 de enero de 2019 y el 28 de febrero de 2019 tenían información sobre la presencia de un cuello y el método de necropsía recogido. Durante ese tiempo, 170 cabezas fueron necropsiadas con 18 especies representadas.
El 52% fue debidamente decapitado. El resto tenía al menos una vértebra unida, incluyendo tres especímenes de todo el cuerpo. El método ventral se utilizó un 75% de las veces.
De ellos, los cuellos estaban presentes en el 49. Se presentaron tres animales grandes y, en dos casos, se utilizó el protocolo de animales grandes. Una ardilla fue presentada con un cráneo aplastado y simplemente cortando la piel expuso el tejido cerebral por lo que ninguno de los métodos demostrados fueron utilizados.
Los tejidos utilizados para hacer portaobjetos de microscopía o extraídos de métodos moleculares al procesar múltiples animales evitan la contaminación cruzada mediante el uso de nuevos instrumentos de guantes y un área de trabajo limpia. Tenga cuidado al realizar estos protocolos, ya que los especímenes pueden estar infectados con el virus de la rabia u otras enfermedades zoonóticas. Tenga en cuenta que los objetos afilados también pueden estar presentes dentro de los especímenes.
