هذا البروتوكول قادر على إنتاج تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري القوي من الحجم والموقع ثابتين في الفئران ويعمل كدليل للوصول الآمن إلى الصدر المورين. هذا البروتوكول هو طريقة مباشرة ومتسقة لإنتاج تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري في الفئران على مدى فترة زمنية معقولة مقارنة بالنماذج الأخرى. بعد التأكد من مستوى مناسب من التدليس في ثمانية إلى 10 أسابيع من العمر الذكور c57 أسود ستة الماوس، وضع الماوس في موقف اليمين ديسوبيتوس الجانبي وشريط الذراع الأيمن مُجَرَّد حتى أن الكف الأمامي يتماشى مع الأنف.
سحب الذيل caudally لخلق خط التوتر بين الذراع اليمنى والذيل، وإنتاج تمديد العمود الفقري، وشريط الساق اليسرى في وضعها الطبيعي. ثم، الشريط الذراع اليسرى ventrally فوق الشاش المدلفن. قبل البدء في العملية، استخدم المقصات لحلاقة الجناح الأيسر من الكتف الأيسر إلى البطن الأيسر.
استخدام قضيب القطن يميل إلى فرشاة حل بيتادين الأول، ثم 70٪ الإيثانول على موقع الجراحة. عندما يكون الجلد جافًا، ضع ستارة معقمة على الحيوان. قم بعمل شق جانبي طوله سنتيمترين عند نقطة منتصف الهيموثوراx واستخدمي الوتر الكهربائي باليد لتقسيم طبقات العضلات حتى تصبح الأضلاع مرئية.
تحت 10 إلى 15x التكبير، الكي مباشرة جزء مليمترين بين الأضلاع واستخدام المالحة wetted، غرامة القطن يميل قضيب في الفضاء الأضلاع من أجل تشريح في الفضاء الجنبي من خلال جزء الكي. ضع إسفنجة ملحية، ثلاثة باثنين ملليمترين من الإسفنج في الصدر للمساعدة في انهيار الرئة. ثم، استخدام مقص لتوسيع الصدر حتى الحجاب الحاجز مرئيا ventrally والشق هو عدة ملليمترات بعيدا عن عضلات الطفيليات dorsally.
لفضح الشريان الأورطي، ضع اضلع الداخر في شق الصدر وإزالة بعناية الاسفنج من سطح الرئة. تغطية الرئة مع المالحة wetted، ستة من أربعة ملليمتر اسفنجة مع نهايات مشيرا rostrally وcaudally ووضع واسعة، ونطحة الرئة على اسفنجة. ثم، حرك بلطف الداخر البطينية حتى يتعرض الشريان الأورطي الصدري التنازلي واستخدام عدد سبعة ملقط لتشريح ما يقرب من خمسة ملليمترات مقطع من النسيج الضام والدهون من الشريان الأورطي.
لتطبيق elastase، أولا، استخدام ميكروبليت لتشبع 0.5 من قبل إسفنجة ملليمتر واحد مع 12 ميكرولترات من elastase البنكرياس بورسين ووضع الاسفنج على السطح المكشوف من الشريان الأورطي. بعد ثلاث إلى خمس دقائق، استخدم عدد سبعة ملقط لإزالة الاسفنج elastase وإزالة نازل الرئة. ري تجويف الصدر مع ما يقرب من نصف ملليلتر من المالحة العقيمة.
إزالة إسفنج الرئة واستخدام قطعة تدحرجت اثنين في اثنين بوصة من الشاش لامتصاص الري المالحة المتبقية. إزالة الضواد الأضلاع وخلع الأضلاع مع ثلاثة توقف ستة أوه خياطة غير قابلة للامتصاص، ربط عقدة فضفاضة في كل خياطة دون ربط الغرز إلى أسفل. بعد إعادة تشغيل الرئة، وربط الغرز وإعادة ادمج طبقات العضلات مع خياطة مضفرة خمسة أوه قابلة للامتصاص.
أغلق الجلد مع سبعة إلى 10 خياطة غير قابلة للامتصاص من 7 إلى 10. ثم، مراقبة الحيوان حتى إعادة شغل كامل. عند نقطة النهاية التجريبية المناسبة ، استخدم المقص لتمسيد الجلد من الجناح الأيسر إلى البطن المركزي ، مع الحرص على عدم دخول الصفاق.
اِنْكِ الجلد من الجناح الأيسر الظهري إلى الكتف الأيسر و إجراء شق بزاوية 90 درجة من خلال الإبط إلى القص. باستخدام الكي، تشريح رفرف الجلد نحو الجانب البطني من الماوس لفضح الاندموم الأيسر واستخدام مقص لدخول البطن على طول الهامش كوستال الأيسر من البطن اتجاه الظهر لفضح الجانب السفلي من الحجاب الحاجز الأيسر. إذا لم يتم فتح الحافة الجانبية الأكثر من الحجاب الحاجز، incise الحجاب الحاجز على حافة الأكثر الجانبي.
وضع غيض من الكي في هذا الثقب، الكي الحجاب الحاجز من الهامش كوستال لعملية xiphoid واستخدام قضيب رطبة، غرامة يميل القطن يميل لتحرير بلطف الرئة من أي التصاقات إلى جدار الصدر. مع ضمان الرئة هو للخروج من الطريق، واستخدام الكهرباء لقطع من خلال الأضلاع وجدار الصدر من هامش تكلفة إلى الضلع الأول، الظهر إلى خط منتصف الإبط، ولكن على الأقل اثنين ملليمتر من الشريان الأبهر. قطع على طول هامش متفوقة من الضلع الأول وتعكس القفص الصدري ventrally لفضح الهيموثوراك.
وضع الداورس على الرئة وسحب medially. وضع الداخر أو الشاش المالحة wetted على الحجاب الحاجز ورسم caudally لفضح أكبر قدر ممكن من الشريان الأبهر. استخدم قضيبًا جافًا ومقلوبًا بالقطن لإزالة أي تصاقات من تمدد الأوعية الدموية الأبهري وجزء من الشق غير متأثر واستخدم قياس الفيديو الصغير لقياس قطر جزء التحكم غير المتأثر والجزء الأوسع من تمدد الأوعية الدموية المعالج بelastase.
لحصاد الشريان الأورطي، فهم السفينة مع ملقط يضر مجرد قطيعة إلى الجزء المعالج واستخدام مقص لقطع قفص إلى ملقط. تشريح الشريان الأورطي الخروج من العمود الفقري وقطع السفينة القريبة إلى الجزء المعالج لإزالة الأنسجة الدهنية. ثم، باستخدام حقنة درنة و إبرة، وغسل التجويف الأبهري مع المالحة ومعالجة العينة وفقا للتحليل التجريبي المصب المخطط لها.
المتقدمة تمدد الأوعية الدموية الصدرية كما fusiform في الشكل وتحدث فقط في الجزء المعالج على الشريان الأورطي. في هذا القياس القياس المجهري الفيديو التمثيلي، تم تحديد تمدد الأبهري ليكون 130٪ في حصاد الأنسجة. في الواقع ، في حين أن نوع الفئران المعالجة elastase تظهر زيادة كبيرة في التمدد الأبهري في الأيام الثلاثة والسابعة و14 و 21 بعد العلاج مع التمدد الأقصى الملاحظ في اليوم 14 مقارنة بفئران التحكم في النوع البري.
تحليل الأنسجة يكشف أن نوع تمدد الأوعية الدموية البرية والألياف elastin التي هي رقيقة ومجزأة. وهناك أيضا أقل سلاسة خلية العضلات تلطيخ مع زيادة في الضامة والتعبير interlukin بيتا واحد. الرئة مورين حساسة للغاية، وعادة ما تكون الإصابة قاتلة.
اتخاذ أقصى درجات الحذر مع الدخول الأولي إلى الصدر والتلاعب فقط الرئة مع الإسفنج المالحة. وقد ساعد هذا النموذج لتوضيح دور interlukin بيتا واحدة وinterlukin ستة في التسبب في تمدد الأوعية الدموية الأبهري الصدري التنازلي وكيف يمكن أن الحصار تسهيل الإدارة غير الجراحية لهذه تمدد الأوعية الدموية.
