该协议能够产生强大的胸主动脉瘤,在小鼠的大小和位置一致,并作为指南,安全进入穆林胸部。与其他模型相比,此协议是一种简单、一致的方法,用于在合理的时间范围内在小鼠体内产生胸主动脉瘤。在确认在8至10周大的雄性c57黑色六只小鼠中适当水平的电前,将鼠标放在右横向脱花位置,并用胶带将右臂松松,使前爪与鼻子保持一体。
用力拉尾巴,在右臂和尾巴之间形成一条张力线,从而延长脊柱,将左腿固定在其自然位置。然后,将左臂通风盘胶带戴在卷起的纱布上。在开始手术之前,使用剪子将左肩剃到左腹部。
使用棉尖施用器刷先用贝塔迪恩溶液,然后在手术现场刷70%乙醇。当皮肤干燥时,在动物上放置一个无菌的窗帘。在海莫霍拉克斯的中点做一个两厘米的横向切口,并使用手持电烧机来分割肌肉层,直到肋骨可见。
在 10 到 15 倍的放大下,直接在肋骨之间烧灼两毫米的份量,并在肋骨空间中使用盐水湿润的细棉尖施用器,以便通过烧灼部分解剖到胸膜空间中。将盐水湿,三由两毫米海绵放入胸部,以帮助崩溃的肺。然后,用剪刀扩大胸腔,直到隔膜是可见的通风和切口是几毫米远离左视肌肉的四口肌肉。
要暴露大母体,请将肋骨缩回器放入胸腔切口,并小心地将海绵从肺表面取出。用盐水湿的,六到四毫米的海绵盖住肺,末端用玫瑰色和毛孔,在海绵上放置一个宽而平的肺缩回器。然后,轻轻地滑动缩回器,直到下降的胸大动脉暴露,并使用数字七钳解剖约五毫米部分的结缔组织和脂肪从大动脉。
要应用弹性酶,首先,使用微管将0.5由1毫米海绵与12微升的猪胰腺弹性酶饱和,然后将海绵放在大炉外露的表面。三到五分钟后,使用七号钳子取出弹性酶海绵并取出肺缩回器。用大约半毫升的无菌盐水灌溉胸腔。
取出肺海绵,用卷起的两英寸两英寸的纱布吸收剩余的盐水灌溉。取出肋骨缩回器,用三根中断的六欧不可吸收的缝合线将肋骨切除,在每根缝合线中绑上一个松动的结,而不将缝合线绑下来。重新膨胀肺部后,将缝合线系上,用运行中的五欧可吸收编织缝合线重新增加肌肉层。
用 7 到 10 个中断的 5-oh 不可吸收的缝合线关闭皮肤。然后,监测动物,直到完全恢复。在适当的实验端点,使用剪刀将皮肤从左侧到中腹部进行医疗切割,注意不要进入腹膜。
将皮肤从后侧侧翼玫瑰色到左肩,并通过轴骨以 90 度角切口到胸骨。使用烧灼,解剖皮肤皮瓣朝向小鼠的腹侧,以暴露左半角,并使用剪刀进入腹部沿左成本边缘从腹角到背向,以暴露左隔膜的底面。如果隔膜的最横向边缘未打开,则将隔膜在其最横向边缘切开。
将烧灼的尖端放在这个孔中,将隔膜从成本边缘烧到西腓工艺,并使用潮湿、细细的棉尖施用器轻轻地将肺从任何粘附物中释放到胸壁上。在确保肺外行的同时,使用电烧机切开肋骨和胸壁,从成本边缘切到第一根肋骨,支骨到中侧线,但至少两毫米从大干。沿着第一根肋骨的上边缘切开,并反射肋骨笼,以暴露河轮。
将缩回器放在肺上,然后进行医疗拉。将缩回器或盐水湿纱布放在隔膜上,然后绘制卡道以尽可能多地露出大母。使用干的棉尖施用器去除大动脉瘤和未受影响的远端段的任何粘附,并使用视频微量测量未受影响的控制段的直径和弹性酶处理动脉瘤的最宽部分。
要收获大母,抓住容器与伤害钳只是对处理段,并使用剪刀切向钳子。将大动脉从脊柱上解剖,将血管切向治疗的段,以切除动脉瘤组织。然后,使用结核素注射器和针头,用盐水清洗大音流明,并根据计划的下游实验分析处理样品。
发达的胸动脉瘤在形状上为富西形,只发生在大动脉的处理部分。在这个具有代表性的视频微量测量中,在组织收获时,大阳大流板被确定为130%。事实上,虽然治疗的小鼠在治疗的第三天、第七天、第十四天和21天时大脂扩张显著增加,而对照野生型小鼠相比,第14天观察到的最大扩张。
组织学分析表明,野生型动脉瘤具有弹性蛋白纤维,其细小且支离破碎。也有不太平滑的肌肉细胞染色与巨噬细胞和插曲蛋白一β表达的增加。肺的肺非常细腻,而且伤害通常是致命的。
在最初进入胸部时,请小心谨慎,只用盐水湿海绵操纵肺部。该模型有助于阐明插曲单β和插曲六在下降胸主动脉瘤的发病机制中的作用,以及它们的封锁如何促进这些动脉瘤的非手术管理。