أهمية هذا البروتوكول على طرق أخذ العينات البروستاتا السابقة هو أنه يعطينا ثقة أعلى من استهداف أنسجة الورم الطازجة للبحوث. لذلك، يمكننا أن نأخذ الأنسجة الطازجة مباشرة إلى المختبر ونستخدمها في الثقافة أو التصوير لأن لدينا ثقة عالية من العينات التي هي ورم والتي هي حميدة. نصيحتي الرئيسية عند تعلم هذه التقنية هي العمل مع أخصائي الأمراض المحلي الخاص بك حتى لا يتم اختراق التشخيص النهائي للأنسجة والتقرير.
لاستهداف موقع الورم، راجع صور التصوير بالرنين المغناطيسي لقياس الموقع فوق الورم والعثور على التسلسل الذي يظهر به الورم أكثر في المستوى المحوري. قم بالتمرير عبر الصور المحورية لتحديد الصورة التي يكون الورم فيها أكبر وطباعة الصورة كمرجع. في الصورة التاجية المقابلة، وقياس المسافة من قاعدة البروستاتا إلى موقف محوري المحدد وقياس الطول الكامل للبروتاتا من القمة إلى القاعدة في ملليمترات.
ثم طباعة هذه القياسات ووضع علامة على مواقع الورم للرجوع إليها. بعد أن تم جمع العينة، تعقيم غطاء محرك تدفق الفاتنة وجهاز تشريح البروستاتا مع 70٪ الإيثانول ووزنها البروستاتا على مقياس قياسي في غرام. ثم طلاء الجانب الأيمن بالحبر الأزرق والجانب الأيسر من العينة بالحبر الأسود الذي يغطي الكبسولة الكاملة والحويصلات المنوية بالحبر للسماح بالتمييز في الهوامش الجراحية.
لشريحة البروستاتا، ووضع الأنسجة مع قاعدة و القمة التي تواجه الجدران المعاكسة للجهاز مع الجانب الخلفي إلى أسفل والجانب الأمامي حتى. ضع دبابيس الذهب حول عينة الأنسجة دفع البروستاتا إلى الداخل قليلا إذا لزم الأمر لتحقيق نوبة دافئ وقياس طول البروستاتا من القاعدة إلى القمة لمقارنة هذا القياس إلى طول البروستاتا التي يتم قياسها عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي. إذا تقلصت البروستاتا، وضبط موقف تشريح المتوقعة من قبل النسبة المئوية المناسبة من التخفيض.
بعد ذلك، قم بالقياس من القاعدة إلى الشريحة العرضية المطلوبة وحدد الدبوس الأقرب إلى هذا القياس لشريحة حولها. ارتداء قفازات chainmail لمنع الإصابة، ووضع شفرات من جهاز تشريح على جانبي دبوس المحدد واستخدام المسافة للحفاظ على ريش خمسة ملليمترات. للحصول على شريحة، واستخدام السكتات الدماغية طويلة لتحريك ببطء ولكن بحزم ريش إلى أسفل، إلى الأمام، والخلف مؤكدا من خلال الشعور بأن شريحة كاملة قد فصل قبل تفكيك الجهاز.
ثم إزالة الجدران والدبابيس واستخدام القفازات لنقل بعناية شريحة على قطعة عقيمة من الفلين. بعد الحصول على العينة، فحص بصريا شريحة عرضية للمقارنة مع صورة التصوير بالرنين المغناطيسي المحوري. في بعض الحالات، قد تظهر منطقة الورم أكثر شحوباً من الأنسجة المحيطة.
Palpate شريحة عرضية بلطف. قد يشعر الورم أكثر ثباتًا من الأنسجة المحيطة. باستخدام صورة التصوير بالرنين المغناطيسي المحوري كدليل، حدد واحد أو أكثر من المناطق لأخذ العينات واستخدام لكمة ستة ملليمترات لدفع إلى أسفل على منطقة الأنسجة من الفائدة.
تحريف لكمة الأنسجة على الفور وإلى أسفل ضد الفلين لضمان فصل كامل باستخدام مشرط حاد لفصل عينة خزعة من العينة حسب الضرورة. عندما يتم الحصول على العينة، إزالة لكمة واستخدام المكبس لإخراج العينة في الحاوية المناسبة لتحليل المصب اللاحقة. ثم الحبر الثقوب حيث اتخذت اللكمات باللون الأحمر ونلاحظ موقع كل لكمة جنبا إلى جنب مع وزن البروستاتا وأي ملاحظات حول لون الأنسجة والحزم.
دبوس كبسولة البروستاتا إلى الفلين لمنع البيلغينغ أثناء التثبيت. غمر البروستاتا والفلين في تثبيت ضمان العينة مغمورة بالكامل. في هذا التحليل التمثيلي، من أول 92 حالة تم أخذ عينات منها كما هو موضح، احتوى 64٪ من العينات على ما لا يقل عن 40٪ من الورم وتم تقديمها إلى مشروع الجينوم 100000 دون ميكروديستيكشن.
وقد استُخرج الحمض النووي وكان له مردود كاف وجودة كافية في جميع الحالات، ونشرت مجموعة فرعية أولية من 59 عينة من هذه العينات للمقارنة مع طريقة سابقة لأخذ العينات. بعد هذا الإجراء، يمكن استخدام عينات الورم الطازجة للتصوير الحي أو الثقافة مما يسمح لنا باختبار المؤشرات الحيوية الجديدة والأدوية ومعرفة المزيد عن بيولوجيا الورم. الآن بعد أن نستخدم هذه الطريقة بشكل روتيني ، لقد كنت قادرا على تقديم مشروع باستخدام هذا النسيج لثقافة الجسم الحي السابق للنظر في مجموعات جديدة من العلاجات قبل الظهر لسرطان البروستاتا.
