与以前的前列腺采样方法相比,这种方案的意义是,它使我们对靶向新的肿瘤组织进行研究的更有信心。因此,我们可以将新鲜组织直接带回实验室,并用它来培养或成像,因为我们对哪些样本是肿瘤和哪些是良性的有很高的置信度。学习这项技术时,我的主要建议是与当地病理学家合作,以便最终的组织诊断和报告不会受到影响。
要瞄准肿瘤位置,请查看 MRI 图像以测量肿瘤上方的位置,并找到肿瘤在轴向平面中最可见的序列。滚动轴向图像以识别肿瘤最大的图像,并打印图像供参考。在相应的日冕图像中,测量从前列腺底部到所选轴向位置的距离,并测量前列腺从顶点到基础(以毫米为单位)的完整长度。
然后打印这些测量值并标记肿瘤的位置以供参考。采集标本后,用70%乙醇对层流罩和前列腺切片装置进行消毒,以标准量度(以克为单位)称量前列腺。然后用蓝色墨水和样品的左侧涂上黑色墨水,用墨水覆盖全胶囊和开创性囊泡,以允许对手术边缘进行歧视。
要切开前列腺,请将组织与底座和顶点朝向仪器的对面墙壁,后侧朝下,前侧朝上。如有必要,将金针放在组织标本周围,稍微向内推前列腺,以实现舒适拟合,并测量从底座到顶点前列腺长度,以将此测量与 MRI 测量的前列腺长度进行比较。如果前列腺缩小,则按适当百分比调整预期的切片位置。
接下来,测量从基点到所需横向切片,然后选择距离此测量值最近的引脚进行切片。戴上链邮件手套以防止受伤,将切片装置的刀片放在识别针的两侧,并使用空格器将刀片保持五毫米的分开。要获取切片,请使用长笔触缓慢而坚定地向下、向前和向后移动刀片,通过感觉在拆卸设备之前分离了完整切片。
然后取下墙壁和针脚,用手套小心地将切片转移到无菌的软木板上。采集试样后,目视检查横片,以便与轴向 MRI 图像进行比较。在某些情况下,肿瘤区域可能看起来比周围组织苍白。
轻轻擦掉横切片。肿瘤可能感觉比周围的组织更牢固。使用轴向 MRI 图像作为参考,选择一个或多个区域进行采样,并使用 6 毫米冲孔向下推感兴趣的组织区域。
将组织冲孔当场扭到软木塞上,确保使用锋利的手术刀完全分离,必要时将活检样本与标本分离。采集样品后,拆下冲孔并使用柱塞将样品喷射到适当的容器中,以便进行后续下游分析。然后用红色墨水打孔,并记下每冲孔的位置以及前列腺的重量以及有关组织颜色和硬度的任何观察。
将前列腺胶囊固定在软木塞上,以防止在固定过程中出现胆汁。将前列腺和软木塞浸入固定中,确保样品完全浸入水中。在这项代表性分析中,在所抽样前92例中,64%的样本至少含有40%的肿瘤,并提交给10万个基因组项目,无需微切除。
DNA被提取出来,在所有病例中都有足够的产量和质量,其中59个样本的初始子集已经公布,以便与早期的样本取样方法进行比较。按照这个程序,新鲜的肿瘤样本可用于活成像或培养,使我们能够测试新的生物标志物,药物,并找出更多关于肿瘤生物学。现在,我们经常使用这种方法,我已经能够提出一个项目,利用这种组织进行体外培养,看看前列腺癌的临床前疗法的新组合。