الآلية الأساسية لـ CRPS لا تزال غير واضحة. إنشاء نموذج قبل كلينيكي محاكاة CRPS سأكون حاسما لاستكشاف الآليات الكامنة تحت CRPS I.The نموذج CPIP الفئران معارض العديد من CRPS أحب التألق، والتي تشمل الوذمة وhyperemia في مرحلة مبكرة. بعد إنشاء نموذج، تليها التحسس الحراري والميكانيكية المستمرة.
تبدأ من التخدير جميع الفئران مع الفينوباربيتال الصوديوم. تأكد من أن الفئران يتم تخديرها بشكل صحيح عن طريق معسر مخلب أو ذيل مع ملقط. ووضع مرهم الطبيب البيطري على العينين.
إبقاء الفئران على وسادة ساخنة 37 درجة مئوية خلال الإجراء. تليين مخلب الخلفي الأيمن والكاحل مع الجلسرين. ثم حرك حلقة نترييل 70 durometer O إلى الجانب الأكبر من أنبوب واحد من خمس ملليلتر مع قطع الغطاء المفاجئة.
أدخل بعناية مخلبًا خلفيًا في الأنبوب المجوف حتى يصل إلى القاع. الشريحة تدريجيا حلقة O من الأنبوب إلى hindlimb الحق بالقرب من مفصل الكاحل. واتركه هناك لمدة ثلاث ساعات
تطبيق نفس المعاملة على مجموعة صور من الفئران، إلا مع حلقة O مكسورة التي لا ينبغي أن تحفز نقص التروية. بعد ثلاث ساعات، قطع حلقة O ومراقبة الفئران حتى يستعيد ما يكفي من الوعي للحفاظ على إعادة شغل القص. لا تضع الفئران في صحبة الفئران الأخرى حتى يتم استردادها بالكامل من التخدير.
ضع الجرذ في غرفة زجاج شبكي شفافة على أرضية شبكية ، واعتاد على الفئران إلى البيئة لمدة 30 دقيقة قبل أي اختبار سلوكي. استخدام خيوط فون فراي لاختبار الفئران لألسودينيا الميكانيكية. بدء الاختبار من خيوط الأوسط عن طريق تطبيق عموديا على سطح منتصف ألواح من مخلب الخلفية.
تطبيق القوة المناسبة لثني خيوط لمدة تصل إلى خمس ثوان. ويعتبر التراجع المفاجئ للمخلب سلوكا nocifensive. إجراء اختبار النيا الميكانيكية في الأيام ثلاثة، اثنين، واحد، وكل يوم واحد حتى اليوم 13.
تطبيق أعلى أسفل طريقة الاختبار لاختبار عتبة وطريقة ديكسون لحساب عتبة انسحاب مخلب 50 في المئة. لاختبار hyperalgesia الحرارية، استخدم طريقة hargreaves مباشرة عن طريق توجيه شعاع الضوء المنبعث من لمبة 50 واط إلى مخلب الخلفي. قياس الكمون الانسحاب مخلب، وتحديد 20 ثانية كعتبة قطع لتجنب الإصابة المفرطة.
كرر كل اختبار ثلاث مرات في خمس فترات دقيقة لكل مخلب الخلفي، وتأخذ المتوسط كمنوم سحب مخلب. إجراء اختبار فرط الحساسية الحرارية في الأيام الثلاثة، اثنين، واحد، وكل يوم حتى اليوم 13. لاختبار الكابسايسين الناجم عن السلوك nocifensive الحادة، وإعداد 200 مللولار capsaicin حل المخزون مع DMSO، وكذلك تخفيفه واحد إلى 1،000 في برنامج تلفزيوني للحقن.
كابسايسين هو كاشف، والتي يمكن أن تسبب تهيج المفاصل للجلد والعينين والتنفس. من المهم ارتداء قناع ونظارة عند إعداد حل الكابسايسين. ثم حقن 50 ميكرولترات من الكابسايسين أو سيارة في مخلب هند باستخدام إبرة قياس 30 تعلق على حقنة ملليلتر واحد.
سجل السلوك nocifensive، مثل لعق، عض، أو رف من مخلب حقن باستخدام كاميرا فيديو لمدة 10 دقائق بعد الحقن. تقييم الوذمة مخلب هند عن طريق قياس الزيادة في قطر مخلب في 15 دقيقة، 24 ساعة، 48 ساعة، و 72 ساعة بعد إنشاء نموذج. بعد وضع حلقة O على الكاحل، أظهرت بشرة مخلب الظهر إيبسجيرال زرقة، وهو مؤشر على نقص الأكسجة الأنسجة.
بعد قطع حلقة O ، بدأ الكف في ملء الدم وأظهر تورمًا قويًا ، مما يشير إلى فرط الدم الشديد. تقلص التورم تدريجيا وعاد إلى طبيعته بعد 48 ساعة من الإجراء. بعد يوم واحد من إنشاء النموذج ، أظهرت مخلب الخلفية ipsilateral من مجموعة CPIP الأهان النيائية الميكانيكية الواضحة التي استمرت لمدة 13 يومًا من الإطار الزمني للمراقبة.
كما عرض مخلب الخلفية contralateral من مجموعة CPIP hyperalgesia الميكانيكية لمدة 13 يوما. عندما تم قياس hyperalgesia الحرارية، أظهرت الكفوف الخلفية الثنائية من الفئران CPIP انخفاض كبير في وقت الاستجابة للمحفزات الحرارية الضارة، مقارنة بالجرذان مجموعة صورية. استمرت الهايبرجيسيا الحرارية من مخلب الخلفية ipsilateral حتى نهاية الإطار الزمني للمراقبة ، في حين أن hyperalgesia الحرارية من مخلب الخلفية contralateral استمرت لمدة سبعة أيام.
تم اختبار مجموعات صورية و CPIP لسلوك nocifensive مع حقن الكابسايسين. عندما تم حقن سيارة، أظهرت مجموعة الصور استجابة خفيفة وناقصة وأظهرت مجموعة CPIP استجابة أعلى بكثير. والأهم من ذلك ، أظهرت فئران CPIP استجابات أعلى بكثير لحقن الكابسايسين من المجموعة الصورية ، مما يشير إلى أن فئران CPIP تظهر ظاهرة مماثلة للمرضى البشريين الذين يعانون من CRPS I.By هذا الإجراء ، يتم تخدير الفئران قبل وأثناء إنشاء النموذج.
نموذج فئران CPIP الموصوفة في هذا البروتوكول التي أنشأتها الإقفار وCRPS الإنسان أحب التواسم. عائلات هذه النماذج، أكثر آلية حول CRPS يمكن استكشافها.
