يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة حول الحالة الفعالة أو التحفيزية للحيوانات في ظل ظروف الألم المختلفة. إنها خطوة مهمة في تحسين ترجمة البحوث قبل السريرية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها سريعة نسبيا وسهلة الأداء ، ولكنها لا تزال تقيم الدوافع المعقدة التي تؤثر على السلوك المرتبط بالألم.
ابدأ ببناء الجدران الجانبية والأرضية والسقف للغرفة الأولى باستخدام أكريليك أبيض غير شفاف بسمك ثلاثة ملليمترات. بالنسبة للجدار الأمامي المواجه ، استخدم أكريليك شفاف بسمك ثلاثة ملليمترات. قم بإرفاق غطاء الغرفة الأولى بمفصلة بحيث يمكن وضع الفئران بسهولة في الغرفة واستعادتها منها.
ثم قم بتوصيل شريط الصمام الثنائي الباعث للضوء ذاتي اللصق بالسطح الداخلي للغطاء لتوفير إضاءة تبلغ حوالي 4،800 لوكس. حرك ورقة أكريليك معتمة داخل وخارج موضعها لإغلاق الحجرة الأولى عن بقية جهاز MCA. بعد ذلك ، قم ببناء غرفة غير مضاءة بطول 270 ملم ، غرفة اختبار MCA ، باستخدام الأكريليك الأحمر الداكن الشفاف من جميع الجوانب مع غطاء مفصلي في الأعلى.
ثم ضع شبكة 13 × 31 بها ثقبان ملليمتريان على أرضية الغرفة يمكن من خلالها أن تبرز مجموعة من المجسات الحادة ذات الأطراف التي يبلغ قطرها 0.5 ملم. اضبط ارتفاع المجسات عن طريق وضع صفائح أكريليك إضافية أسفل صفيحة المسبار. باستخدام هذا النهج ، قم بتكوين الجهاز بارتفاعات مسبار صفر واثنين وخمسة ملليمترات.
كبديل لدبابيس الخريطة المخففة أو المواد المماثلة ، استخدم ملفات الطابعة ثلاثية الأبعاد لطباعة أرضية الغرفة الثانية ولوحة المسبار بمادة قابلة للغسل ومتوافقة حيويا مثل بلاستيك النايلون 12. أخيرا ، قم ببناء غرفة مظلمة ثلاثة باستخدام الأكريليك الأحمر الداكن الشفاف من جميع الجوانب مع غطاء مفصلي مشابه للغرفتين الأولى والثانية. ضعه في الطرف الآخر من الغرفة الأولى ليكون بمثابة منطقة هروب مظلمة من المجسات الميكانيكية في الغرفة الثانية.
قبل يوم واحد من جدولة الاختبار الأساسي ، تأقلم الفئران مع وحدة MCA لمدة 5 إلى 15 دقيقة مع زملائها في القفص لتسهيل الاستكشاف الاجتماعي للجهاز بأكمله. تأكد من إيقاف تشغيل مصابيح LED في الغرفة الأولى ، وإبقاء الحاجز بين الغرفتين الأولى والثانية مفتوحا وعدم بروز المجسات عبر أرضية الغرفة الثانية. بعد ذلك ، قم بإعداد كاميرا فيديو قادرة على تسجيل لقطات بدقة 1080 بكسل على حامل ثلاثي القوائم مع عرض جانبي لجهاز MCA بأكمله.
اضبط مجال الرؤية بحيث يملأ MCA الصورة المسجلة. بمجرد بدء التسجيل ، أمسك بلوحة مسح جافة محمولة باليد في العرض الميداني للكاميرا لتسمية بداية الفيديو بمعلومات تعريف عن تشغيل اختبار الحيوان. بالنسبة للتشغيل الأول ، اضبط ارتفاع المسبار على الصفر وانقل الماوس ليتم اختباره من قفصه المنزلي إلى الحجرة الأولى مع وجود باب الحاجز في مكانه.
ابدأ تشغيل مؤقت مرئي في اللقطات المسجلة. بعد 10 ثوان ، قم بتشغيل غرفة LED واحدة. بعد أن يكون الماوس في الغرفة المضاءة لمدة 20 ثانية ، اسحب الحاجز بين الغرفتين الأولى والثانية.
راقب الحيوان لمدة دقيقتين وقم بقياس زمن الوصول أو أوقات الإقامة باستخدام ساعة توقيت أثناء استمرار الاختبار. سجل زمن الوصول إلى المدخل الأول إلى الغرفة الثانية ، والكمون للعبور أكثر من منتصف الطريق عبر الغرفة الثانية ، وإجمالي وقت الإقامة في الغرفة الثانية ، والكمون للوصول إلى الغرفة الثالثة ، وإجمالي وقت الإقامة في كل غرفة في غضون دقيقتين وتحويلها إلى نسب. بمجرد اكتمال الاختبار ، أعد الماوس إلى قفصه المنزلي.
نظف غرف MCA ب 70٪ من الإيثانول واتركها تجف تماما. بعد تشغيل جميع الفئران في المجموعة مع ضبط ارتفاع المسبار على الصفر ، أدخل ورقة ثلاثة ملليمترات من الأكريليك أسفل الصفيحة الأساسية للمسبار الميكانيكي وكرر الجري بارتفاع مسبار يبلغ مليمترين. بعد تشغيل جميع الفئران مع ضبط ارتفاع المسبار على مليمترين ، أدخل ورقة أخرى من الأكريليك بثلاثة ملليمترات أسفل الصفيحة الأساسية للمسبار وكرر الجري بارتفاع مسبار يبلغ خمسة ملليمترات.
قم بإجراء تنظيف نهائي باستخدام مطهر في نهاية جلسة الاختبار. في نموذج الألم الالتهابي الكامل الناجم عن المساعد من Freund ، لا يغير الحقن الملحي زمن انتقال الهروب مقارنة بخط الأساس. أظهرت الفئران التي تم حقنها بالمادة المساعدة زيادة كبيرة في زمن انتقال الهروب بعد أربعة أيام من الحقن ، ولكن فقط عندما تم رفع ارتفاع المسبار إلى خمسة ملليمترات.
لم يلاحظ هذا الكمون المتزايد في الفئران التي تلقت كاربروفين قبل 90 دقيقة من بداية الاختبار. زاد نموذج إصابة الأعصاب المنقذ من آلام الأعصاب بشكل كبير من زمن الوصول للهروب مقابل خط الأساس عندما تم تعيين ارتفاع المسبار على خمسة ملليمترات. تم منع هذه الزيادة عن طريق إعطاء البوبرينورفين المسكن الأفيوني قبل 90 دقيقة من الاختبار.
كما لوحظ زيادة زمن انتقال الهروب في الفئران التي لم تخضع لجولة أساسية من اختبار MCA قبل إصابة الأعصاب. تم منع زيادة زمن الهروب في الفئران المجنبة من إصابة الأعصاب عند خمسة ملليمترات عن طريق جابابنتين الذي تم إعطاؤه قبل 90 دقيقة من الاختبار. في نموذج الكسر أو الصب ، زاد زمن الوصول للهروب من الغرفة الأولى بشكل متناسب مع ارتفاع المسبار قبل الإصابة.
وبعد الإصابة، ظل زمن الوصول دون تغيير عند صفر ملليمتر، ولكنه زاد بشكل كبير عند ارتفاع المسبار البالغ مليمترين وخمسة ملليمترات للذكور وارتفاع المسبار البالغ خمسة ملليمترات للإناث عند مقارنته بخط الأساس. أهم شيء يجب تذكره عند محاولة هذا الإجراء هو التأكد من أن جميع الفئران معتادة على جهاز MCA ، والحفاظ على التوزيع العشوائي السليم والعمى طوال فترة الدراسة. يمكن استخدام هذه الطريقة جنبا إلى جنب مع مقاييس أخرى لحساسية الألم بما في ذلك فون فراي أو تفضيل المكان الشرطي.
