نموذج زرع الكبد العظام الفئران هو أداة قوية لدراسة جوانب متعددة من زرع الكبد. من الاستجابة المناعية على العدوى ، إلى الجوانب التقنية للإجراء. المزايا الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن أن تقلل من المضاعفات، وأفضل تمثيل زرع الكبد المجيئي، وتحسين البقاء على قيد الحياة المتلقي.
هذا البروتوكول المعدل لزراعة الكبد العظام الفئران يحاكي عن كثب جوانب زرع الكبد البشري، وسوف تكون بمثابة نموذج البحوث المتغيرة ذات الصلة سريريا. ونأمل أن يتمكن المشاهدون من خلال العرض المرئي من معرفة كل التفاصيل وتقصير منحنى التعلم لإتقان مهارة الجراحة المجهرية المطلوبة لهذه التقنية. بعد حقن 300 وحدة دولية من الصوديوم الهيبارين في الوريد السفلي داخل الجسم الوريدي الوريدي السفلي من الجرذ من العمر 12 إلى 14 أسبوعًا ، قم بعمل شق خمسة ملليمترات تحت تشعب القناة الصفراوية ، وأدخل دعامة القناة الصفراوية في القناة الصفراوية الشائعة.
تأمين الدعامة مع واحد 7-0 ربط الحرير، ملليمتر واحد فوق الشق، و1 أربطة 10 ملليمترات تحت التشعب. قطع القناة الصفراوية بين العلاقات اثنين وفضح الشريان الكبدي السليم. تقسيم الشريان المعدية بين اثنين من 7-0 خيوط الحرير، وفضح الشريان المعدي الأيسر والشريان الزلي والجذع الاضطرابات الهضمية.
ثم قطع الشريان الأيسر في المعدة، والشريان الزلي، والجذع البطني بين ربطات عنق الشريان. استخدام حقنة 20 ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 21.5 لحقن ببطء 20 ملليلتر من محلول لاكتات رينغر أربع درجات مئوية في الوريد المدخل. لإعداد الكبد المانح، قم بقطع تشعب جذع الاضطرابات الهضمية والشريان الزلي والشريان المعدي الأيسر لتشكيل كفة أكبر كم شرياني وأدخل الدعامة الشريانية قياس 1.5 ملليمتر 24 في الشريان الكبدي المشترك المانح عبر الكفة.
ثم تأمين الدعامة مع 8-0 البولي بروبلين رباط وشطف الدعامة مع الحل لاكتات رينجر. بعد تعريض الوريد المدخل من 12 إلى 14 أسبوع من العمر الجرذان المتلقي، تقسيم القناة الصفراوية المتلقي في 0.5 سم تحت تشعب التليط، وإدراج دعامة القناة الصفراوية في القناة الصفراوية المشتركة. كشف الشرايين الكبدية اليسرى والوسطى والأيّني وربط الأوعية بتشعب الشريان الكبدي.
قطع الشرايين على مقربة من الكبد فوق العلاقات ووضع قطعة طويلة رقيقة من الشاش وراء الوريد الكبدي أدنى السوبر الكافا. وضع 3D المطبوعة داخل الجسم حامل الكافا الوريدي وراء الوريدي intrahepatic كافا واستخدام خياطة أحادية تينو غير قابلة للامتصاص لخياطة نهايات مقبض 3D المطبوعة معا. ربط فضفاضة 7-0 الرباط الحرير أدناه كل من حامل المطبوعة 3D بين الكافا فينا داخل الكبد والوريد البوابة، ومقبك الوريد intrahepatic كافا فقط فوق الوريد الكلوي الأيمن تحت حامل الكافا المطبوعة 3D.
المشبك الوريد المدخل فقط فوق الوريد البواقل وتحت حامل PV المطبوعة 3D. باستخدام حقنة ثلاثة ملليلتر مع إبرة قياس 27 المرفقة، مسح ملليلتر اثنين من محلول اللاكتات رينغر 37 درجة مئوية عبر تشعب الوريد المدخل، ومشابك الوريد الكبدي السوبر الكافا فوق الكبد مع المشبك Kitzmiller. ثم قطع تحت المشبك أقرب ما يمكن إلى الكبد وقطع فوق أصحاب 3D المطبوعة لكل من الوريد المدخل وبين الكبد الكبد لإزالة الكبد المتلقي.
لزرع الكبد المانحة، توجيه بعناية الكبد المانحة داخل تجويف الجسم المتلقي في مثل هذه الطريقة التي يمكن إنشاء تنام الاستئصال المرصوفة بالحصى العلوي. أدخل الكفة الوريدية المدخل من المتبرع في الوريد المدخل المتلقي وتشديد التعادل الحرير 7-0. إزالة المشبك اليابانتيك من الكفاة الكبدية السوبر وإزالة مقطع microvascular للوريد المدخل.
بعد إعادة ضخ الكبد بالدم الدافئ، أدخل الكفة الوريدية داخل الوريد المانحة داخل الوريد داخل الوريد داخل الكافا المتلقي وتأمين السفينة مع ربطة عنق حريرية 7-0. ثم إزالة المانحة داخل الكبد مقطع كافا قبل إزالة مقطع المتلقي. لإجراء التهاب الأوعية الشرياني ، قطع جزء من جذع الاضطرابات الهضمية من المتبرع الذي يمتد إلى ما وراء الدعامة ، وتضييق الشريان الكبدي السليم للمتلقي.
قطع ربطة العنق في نهاية وأي أنسجة إضافية المحيطة السفينة. واستخدام حل اللاكتات رينجر لطرد التجويف من كل من المانحة والمتلقية السفينة ينتهي. باستخدام إبرة منحنية، ضع خياطة 10-0 الإثنيلون من خلال الجانب الأيسر من الشريان الكبدي المانح، 2.5 ملليمتر فوق الفوهة من الدعامة، والخروج من خلال نهاية الدعامة.
احول الشريان الكبدي المناسب للمتلقي 0.5 ملليمتر أسفل فتحة الوعاء من الجانب الأيسر من الوعاء، إلى الجانب الأيمن من الشريان. وضع خياطة المقبل من خلال الجدار الأيمن للشريان الكبدي المانح من الداخل إلى الخارج، على مسافة من فتحة الدعامة متطابقة إلى غرزة الأصلي، وسحب ما يصل على طرفي أحادية 10-0 غير مُسْبَنِبِة لتنزلق الشريان الكبدي المناسب المتلقي إلى الأعلى، وإلى دعامة الشريان الكبدي. ثم ربط أحادية 10-0 غير قابلة للابكاب مع نفسها على الشريان الكبدي المانح.
تدفق كل من القنوات الصفراوية المتلقي والمتبرع، وإدراج الدعامات القناة الصفراوية المانحة في القناة الصفراوية المتلقي. ثم تشديد التعادل التي كانت وضعت سابقا حول القناة الصفراوية المتلقي. في هذه التجربة التمثيلية، أظهر نموذج زرع الكبد التقويمي للفئران 50 و37.5٪ من معدلات البقاء على قيد الحياة، بمعدل 21 يومًا و60 يومًا، بعد العملية على التوالي.
وعلى النقيض من ذلك، فإن إجراء إعادة توصيل الشريان الكبدي الأمثل زاد بشكل كبير من البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل. كشف التحليل النسيجي لمجموعة فرعية تمثيلية من الحيوانات المزروعة دون إعادة توصيل الشريان الكبدي عن علامات إصابة الكبد نقص الأكسجين مع نخر الفصيص المركزي، في اليوم السادس والثالث عشر بعد إجراء عملية زرع. ارتبط نخر الكبد الواسع بمستويات مرتفعة بشكل كبير من نقل مناعة ألانين وناقلات أمينية الأسبارتات في هذه الحيوانات.
في المقابل، لم تظهر الفئران المزروعة التي لديها إعادة توصيل الشريان الكبدي أي علامات على إصابة الكبد وكشف التحليل النسيجي عن بنية بارينشيما كبدية طبيعية، مع acini المنظم والفص والشرايين والقنوات الصفراوية. بالإضافة إلى ذلك، كشف التحليل النسيجي للكبد من الفئران نموذج إعادة الاتصال الشريان غير الكبدي التغيرات التفاعلية بعد إصابة الكبد نقص الأكسج. بما في ذلك انتشار القناة الصفراوية السوق, بيري بوابة التليف والالتهاب, وتشويه الكبد parenchyma.
ويمكن تكييف هذا البروتوكول لدراسة العديد من الجوانب المناعية والجراحية لزراعة الكبد ويمكن أن يكون بمثابة نموذج لاختبار التدخلات العلاجية الجديدة ذات الصلة بزرع.
