מודל השתלת כבד אורתוטופי עכברוש הוא כלי רב עוצמה לחקר היבטים מרובים של השתלת כבד. מתגובה חיסונית על הזיהום, להיבטים טכניים של ההליך. היתרונות העיקריים של טכניקה זו הם שזה יכול להפחית סיבוכים, מייצג טוב יותר השתלת כבד בא, ולשפר את הישרדות המטופל.
פרוטוקול השתלת כבד אורתוטופי חולדה שונה זה מחקה באופן הדוק היבטים של השתלת כבד אנושית וישמש מודל מחקר משתנה ורלוונטי קלינית. אנו מקווים כי באמצעות ההדגמה החזותית, הצופים יוכלו ללמוד את כל הפרטים ולקצר את עקומת הלמידה לשליטה במיומנות המיקרו-כירורגית הנדרשת לטכניקה זו. לאחר הזרקת 300 יחידות בינלאומיות של נתרן הפרין לתוך וינה קאווה תוך-הפטית של חולדה בת 12 עד 14 שבועות, בצע חתך של חמישה מילימטרים מתחת לצינור המרה bifurcation, והכנס את צינור המרה סטנט לתוך צינור המרה המשותף.
לאבטח את הסטנט עם אחד 7-0 קשירה משי, מילימטר אחד מעל החתך, ו קשירה אחת 10 מילימטרים מתחת bifurcation. חותכים את צינור המרה בין שני הקשרים ולחשוף את עורק הירך הנכון. מחלקים את העורק הגסטרודודיאלי בין שתי ליגטורות משי 7-0, וחושפים את עורק הקיבה השמאלי, עורק הטחול וגזע הצליאק.
לאחר מכן חותכים את עורק הקיבה השמאלי, עורק הטחול וגזע הצליאק בין קשרי העורק. השתמש מזרק 20 מיליליטר מצויד מחט מד 21.5 להזריק לאט 20 מיליליטר של פתרון לקטט של ארבע מעלות צלזיוס רינגר לתוך וריד הפורטל. כדי להכין את הכבד התורם, לחתוך לפתוח את bifurcation של תא המטען צליאק, עורק טחול עורק קיבה שמאלה כדי ליצור שרוול עורקים גדול יותר שרוול העורקים ולהכניס את 1.5 מילימטר אורך 24 מד סטנט עורקי מד לתוך עורק הכבד המשותף התורם דרך השרוול.
ואז לאבטח את הסטנט עם 8-0 קשירה פוליפרופילן ושטיפת הסטנט עם תספורת הלקטאט של רינגר. לאחר חשיפת וריד הפורטל של נמען חולדה בן 12 עד 14 שבועות, חלק את צינור המרה של הנמען ב- 0.5 ס"מ מתחת לחיתוך אריחים והכנס סטנט צינור מרה לתוך צינור המרה המשותף הדיסטלי. חשוף את עורקי הלחץ השמאליים, האמצעיים והימין וקשר את כלי הדם דיסטליים לביפורציה של עורק הלחץ.
חותכים את העורקים קרוב לכבד מעל הקשרים ומ מניחים חתיכה דקה ארוכה של גזה מאחורי הנבוב הנבוב הנחות סופר כבד. מניחים מחזיק קאווה ותנאי תוך-הפטי מודפס בתלת-ממד מאחורי הווריד הווריד ההפוכה ולהשתמש בתפר מונופילמנט שאינו נספג של Tenno כדי לתפור את הקצוות של הידית המודפסת בתלת-ממד יחד. לקשור באופן רופף קשירה משי 7-0 מתחת הן מחזיק מודפס 3D בין הווריד intrahepatic ואת הווריד פורטל, ומהדקים את הווריד תוך-הפטי ממש מעל הווריד הכלייתי הנכון מתחת למחזיק קאווה מודפס 3D.
מהדקים את וריד הפורטל ממש מעל וריד ההצמדה ומתחת למחזיק PV המודפס בתלת-ממד. באמצעות מזרק שלושה מיליליטר עם מחט מד 27 מחובר, לשטוף שני מיליליטר של 37 מעלות צלזיוס רינג'ר של פתרון לקטט באמצעות bifurcation של וריד הפורטל, ומהדק את וריד הכבד סופר קאווה מעל הכבד עם מהדק Kitzmiller. ואז לחתוך מתחת מהדק קרוב לכבד ככל האפשר לחתוך מעל המחזיקים המודפסים 3D עבור וריד הפורטל והן את הנבוב הנבוב בין הכבד כדי להסיר את הכבד המטופל.
עבור השתלת כבד התורם, בזהירות לכוון את הכבד התורם בתוך חלל הגוף של המטופל באופן כזה anastomosis המרוצף העליון ניתן ליצור. הכנס את שרוול וריד הפורטל מהתורם לווריד פורטל הנמען והדק את עניבת המשי 7-0. הסר את המהדק האטראומטי מן ונטה קאווה בלחץ דם סופר ולהסיר את קליפ microvascular עבור וריד הפורטל.
לאחר מזכה מחדש את הכבד עם דם חם, להכניס את שרוול הוורידה הוורידה תוך-לחץ דם התורם לתוך הנמען vena קאווה תוך-לחץ ולהבטיח את הכלי עם עניבת משי 7-0. לאחר מכן הסר את קליפ הנבוב ההפוכי של התורם לפני הסרת קליפ הנמען. כדי לבצע anastomosis עורקי, לחתוך את החלק של תא המטען צליאק מן התורם המשתרע מעבר סטנט, ומהדק את עורק הכבד הנכון של המטופל.
חותכים את העניבה בסוף וכל רקמה נוספת המקיפה את הכלי. ולהשתמש בתסימת הלקטאט של רינגר כדי לשטוף את הלומן של קצוות כלי התורם והמקבל. באמצעות מחט מעוגלת, מניחים תפר 10-0 ethilon דרך ההיבט השמאלי של עורק הירך התורם, 2.5 מילימטרים מעל פתח דיסטלי של הסטנט, ובחוץ עד סוף הסטנט.
Transfix עורק הירך הנכון הנמען 0.5 מילימטרים מתחת פתח הכלי מצד שמאל של הכלי, לצד ימין של העורק. מניחים את התפר הבא דרך הקיר הימני של עורק ההפטר התורם מבפנים החוצה, במרחק מן פתח הסטנט זהה לתפר המקורי, ולמשוך על שני הקצוות של מונופילמנט 10-0 nonabsorbable להחליק את עורק ההיתוך הנכון הנמען למעלה, ולתוך סטנט עורק ההשבחה. ואז לקשור את מונופילמנט 10-0 nonabsorbable עם עצמו על עורק הלחץ התורם.
שטפו הן את תעלות המרה של הנמען והן את צינורות המרה של התורם, והכניסו את צינורות המרה של התורם לצינור המרה של הנמען. לאחר מכן הדק את העניבה שהונחה בעבר סביב צינור המרה של הנמען. בניסוי מייצג זה, מודל השתלת כבד אורתוטופית עורק שאינו כבד הפגינו 50 ו 37.5% שיעורי ההישרדות, ב 21 ימים ו 60 ימים, לאחר הניתוח בהתאמה.
לעומת זאת, הליך חיבור עורקים בלחץ הירך אופטימיזציה הגדילה באופן משמעותי את ההישרדות לטווח ארוך. ניתוח היסטולוגי של תת קבוצה מייצגת של בעלי חיים מושתלים ללא חיבור עורק כבד גילה סימנים של פגיעה בכבד היפוקסי עם נמק מרכזי lobular, ביום שש ושלוש עשרה לאחר ההשתלה. נמק כבד נרחב היה קשור עם רמות גבוהות מאוד של מעבירי אימונו אלנין ו transferase אמינו אספרטט בבעלי חיים אלה.
לעומת זאת, חולדות מושתלות עם חיבור עורק כבד לא הראו סימנים של פגיעה בכבד וניתוח היסטולוגי חשף מבנה פרנצ'ימה רגיל בכבד, עם acini מאורגן, אונות, עורקים ותעלות מרה. בנוסף, ניתוח היסטולוגי של הכבדים מן העורק הלא כבד חיבור מחדש מודל חולדות גילה שינויים תגובתי לאחר פגיעה בכבד היפוקסי. כולל התפשטות צינור המרה בשוק, פיברוזיס פורטל פרי ודלקת, ופרנצ'ימה כבד מעוותת.
פרוטוקול זה יכול להיות מותאם לחקר היבטים אימונולוגיים וניתוחיים רבים של השתלת כבד והוא יכול לשמש מודל לבדיקת התערבויות טיפוליות חדשניות הרלוונטיות להשתלה.
