大鼠正畸肝移植模型是研究肝移植多方面的有力工具。从感染的免疫反应,到程序的技术方面。该技术的主要优点是,它可以减少并发症,更好地代表肝移植,提高接受者的生存。
这种经过改良的大鼠正畸肝移植方案密切模仿人类肝移植的方方面面,将作为可变和临床相关的研究模型。我们希望通过视觉演示,观众可以学习所有的细节,缩短学习曲线,掌握这种技术所需的显微外科技能。将300个国际单位的肝素钠注射到麻醉的12至14周大大鼠的肝内劣质静脉注射后,在胆管分叉下做5毫米切口,并将胆管支架插入普通胆管。
用一个 7-0 丝连字固定支架,在切口上方 1 毫米,在分叉下方 10 毫米固定一个连体。切断两根领带之间的胆管,露出适当的肝动脉。将胃肠动脉分成两个7-0丝状连体,露出左胃动脉、腹腔动脉和腹腔躯干。
然后切断动脉之间的左胃动脉、血状动脉和腹腔躯干。使用装有 21.5 量针的 20 毫升注射器,将 20 毫升 4 摄氏度的林格乳酸溶液缓慢注射到入口静脉中。为了准备供体肝脏,切开腹腔躯干、静脉动脉和左胃动脉的分叉,形成更大的动脉袖口,通过袖口将1.5毫米长的24米动脉支架插入供体普通肝动脉。
然后用 8 - 0 固定支架聚丙烯连结,用林格的乳酸溶液冲洗支架。露出12至14周大大鼠接受者入口静脉后,将接受者胆管分在瓷砖分叉下方0.5厘米处,并将胆管支架插入到深肠普通胆管中。暴露左、中、右肝动脉,将血管与肝动脉分叉绑在一起。
切断动脉接近肝脏上方的领带,并放置一长薄纱布后,超级肝劣质静脉卡瓦。将 3D 打印的肝内静脉卡瓦架放在肝内静脉卡瓦卡后面,并使用 Tenno 不可吸收的单丝缝合线将 3D 打印手柄的末端缝在一起。松散地将 7-0 丝线字系在 3D 打印支架下方的肝内静脉和门户静脉之间,并夹紧 3D 打印卡瓦架下方右肾静脉下方的肝内静脉。
将入口静脉夹在 pyloric 静脉的上方和 3D 打印的 PV 支架下方。使用三毫升注射器与27量针连接,通过门户静脉的分叉冲洗两毫升37摄氏度林格的乳酸溶液,并夹住肝脏上方的超级肝静脉注射夹。然后切入夹下尽可能靠近肝脏,并切在3D打印持有人上方,为门户静脉和肝间静脉间静脉卡瓦切去接受者肝脏。
对于供体肝移植,在接受者体腔内小心地定位供体肝脏,以便形成上圆圆的肿瘤。将供体入口静脉袖口插入接收者入口静脉,并拧紧 7-0 丝带。从超级肝静脉中取下创伤夹,并取出入口静脉的微血管夹。
用热血重新注入肝脏后,将供体内静脉注射插入接受者肝内静脉卡瓦,用 7-0 丝带固定血管。然后取出供体内肝静脉卡瓦夹,然后再取出接收者剪辑。要进行动脉瘤,切断供体中超出支架的腹腔躯干部分,并夹紧接受者适当的肝动脉。
切断端端的领带和容器周围的任何额外组织。并使用林格的乳酸溶液冲洗供体和接受者容器末端的流明。使用弯曲的针,通过供体肝动脉的左侧放置 10-0 ethilon 缝合线,在支架的外孔上方 2.5 毫米,并通过支架的端部进行。
将接收者适当的肝动脉从血管左侧的血管孔下方 0.5 毫米的血管转换到动脉右侧。将下一个缝合线从内到外,从内到外,从支架孔与原缝合相同,在10-0不可吸收的单丝两端拉起,将接受者适当的肝动脉向上滑动,并插入肝动脉支架。然后将 10 - 0 不可吸收的单丝与自身绑在供体肝动脉上。
冲洗接受者和供体胆管,并将供体胆管插入接受者胆管。然后拧紧以前放在接受者胆管周围的领带。在这个具有代表性的实验中,非肝动脉瘤大鼠正畸肝移植模型分别显示21天和60天后,50%和37.5%的存活率。
相比之下,优化的肝动脉重新连接程序显著提高了长期存活率。对没有肝动脉重新连接的移植动物的代表性子集进行组织学分析,发现移植后第6天和第13天出现低氧肝损伤与中央球状坏死的迹象。广泛的肝坏死与这些动物中丙氨酸免疫转移和阿斯巴蒂氨基转移酶水平的极其升高有关。
相比之下,肝动脉重接移植的大鼠没有肝损伤的迹象,组织学分析显示肝膜结构正常,有组织性、肺、动脉和胆管。此外,非肝动脉重新连接模型大鼠对肝脏进行组织学分析后发现,低氧肝损伤后反应性变化。包括市场胆管增殖,围兜纤维化和炎症,和扭曲的肝硬化。
该协议可以适应研究肝移植的许多免疫学和外科方面,并可以作为一个模型,测试与移植相关的新型治疗干预措施。