ラットの異形性肝移植モデルは、肝臓移植の複数の側面を研究するための強力なツールです。感染に対する免疫応答から、手順の技術的側面へ。この技術の主な利点は、合併症を減らし、来たてくる肝臓移植をよりよく表し、レシピエントの生存率を向上させることができるということです。
この改変ラットの異形性肝移植プロトコルは、ヒトの肝臓移植の側面を密接に模倣し、可変的で臨床的に関連する研究モデルとして機能する。視覚デモンストレーションを通して、視聴者がすべての詳細を学び、この技術に必要なマイクロサージャストスキルを習得するための学習曲線を短くできることを願っています。ヘパリンナトリウムの300国際単位を麻酔後12〜14週齢ラットの肝内劣性カバに注入した後、胆管二切れ下に5ミリメートルの切開を行い、胆管ステントを共通の胆管に挿入する。
切り込みから1ミリメートル上の7-0シルク合字、1つの合字、分岐の10ミリメートル下の1つの合字でステントを固定します。2つのネクタイの間に胆管を切断し、適切な肝動脈を露出.2つの7-0シルク合字の間で胃十二指腸動脈を分割し、左胃動脈、脾動脈およびセリアック幹を露出させる。
その後、左胃動脈、脾動脈、および動脈の間のセリアック幹を切断します。21.5ゲージの針を装備した20ミリリットルの注射器を使用して、ゆっくりと4度のリンガーの乳酸溶液をポータル静脈に注入します。ドナー肝臓を準備するために、セリアック幹の分岐を切り開き、脾動脈および左胃動脈より大きな動脈スリーブを形成し、カフを介してドナー共通肝動脈ステントに長さ1.5ミリメートルの長さ24ゲージ動脈ステントを挿入する。
その後、8-0でステントを確保ポリプロピレン合字とリンガーの乳酸溶液でステントを洗い流します。12〜14週齢のラットのレシピエントの門脈を露出させた後、受取人の胆管をタイル分岐の下0.5センチメートルで分割し、遠位共通胆管に胆管ステントを挿入する。左、中、右肝動脈を露出し、血管を遠位の肝動脈分岐に結び付ける。
ネクタイの上の肝臓に近い動脈を切断し、超肝的な下の大静脈の後ろにガーゼの長い薄い部分を置きます。3Dプリントされた肝内静脈のカバホルダーを肝内静脈の後ろに置き、天野非吸収性モノフィラメント縫合糸を使用して3Dプリントされたハンドルの端を縫い合わせます。肝内大静脈と門脈の間の3Dプリントホルダーの下に7-0シルクの合字をゆるやかに結び、3Dプリントカバホルダーのすぐ下の右腎静脈のすぐ上に肝内静脈をクランプします。
気熱静脈のすぐ上と3DプリントされたPVホルダーの下にポータル静脈をクランプします。27本のゲージ針を取り付けた3ミリリットルの注射器を使用して、ポータル静脈の分岐を介して摂氏37度リンガーの乳酸塩溶液の2ミリリットルを洗い流し、キッツミラークランプで肝臓の上のスーパー肝静脈をクランプします。その後、可能な限り肝臓の近くにクランプの下にカットし、レシピエント肝臓を除去するために、ポータル静脈と肝臓間静脈の両方の3Dプリントホルダーの上にカットします。
ドナーの肝臓移植のために、上石畳の吻合を作り出すことができるように、ドナーの肝臓をレシピエントの体内に慎重に向ける。ドナーからポータル静脈カフをレシピエントポータル静脈に挿入し、7-0シルクのネクタイを締めます。スーパー肝静脈から外傷性クランプを取り外し、門脈の微小血管クリップを取り外します。
肝臓に温かい血液を再浸透した後、ドナーの肝内静脈カフをレシピエント肝内静脈に挿入し、7-0シルクタイで血管を固定します。次に、ドナーの肝内静脈カバクリップを取り外してから、受信者クリップを取り外します。動脈吻合を行うために、ステントを越えて伸びるドナーからセリアック幹の部分を切り落とし、レシピエントの適切な肝動脈をクランプする。
最後にネクタイを切断し、血管を囲む余分な組織。そして、リンガーの乳酸溶液を使用して、ドナーとレシピエント容器の両方のルーメンを洗い流します。湾曲した針を使用して、ドナー肝動脈の左側面を通って10-0エチロン縫合糸を、ステントの遠位オリフィスの上に2.5ミリメートル、ステントの端を通って出る。
血管の左側から、血管の右側に、受取人の適切な肝動脈0.5ミリメートル下にトランスフィックスします。次の縫合糸は、ドナー肝動脈の右壁を通って、元のステッチと同じステントオリフィスから離れた位置に置き、10-0非吸収性モノフィラメントの両端を引き上げて、受取人の適切な肝動脈を滑り上げ、肝動脈ステントに入れる。その後、ドナー肝動脈の上に10-0非吸収性モノフィラメントをそれ自体と結びます。
受け手とドナーの胆管の両方を洗い流し、ドナー胆管ステントをレシピエント胆管に挿入します。その後、以前にレシピエント胆管の周りに置かれたネクタイを締めます。本代表的な実験では、非肝動脈吻合骨症ラットの同位所性肝移植モデルは、それぞれ21日および60日で50および37.5%の生存率を示した。
対照的に、最適化された肝動脈再接続手順は、長期生存期間を有意に増加させた。肝動脈リコネクションのない移植動物の代表的なサブセットの組織学的分析は、移植後6日目と13日目に、中枢小葉壊死による低酸素肝損傷の徴候を明らかにした。広範な肝壊死は、これらの動物におけるアラニン免疫転移およびアスパラギン酸アミノトランスファーゼの驚異的な上昇レベルに関連していた。
対照的に、肝動脈リコネクションを有する移植ラットは肝臓損傷の徴候を示さなかったし、組織化されたアキニ、小葉、動脈および胆管を有する組織学的な肝臓の接合構造を組織した組織学的分析は、正常な肝臓の気質構造を明らかにした。さらに、非肝動脈再接続モデルラットからの肝臓の組織学的分析は、低酸素肝損傷後の反応性変化を明らかにした。市場胆管増殖、ペリ門脈管線維症および炎症、および歪んだ肝臓のパレンチマを含む。
このプロトコルは、肝臓移植の多くの免疫学的および外科的側面を研究するために適応することができ、移植に関連する新しい治療介入をテストするためのモデルとして役立つことができる。
