الهدف العام من هذا الإجراء هو خلق نموذج مورين مستنسخ من كامل سمك حرق الجرح أعيد بناؤها مع الكسب غير المشروع الجلد حساسية. وينقسم الجلد إلى عنصرين البشرة والأدمة. تحت الأدمة هو تحت الجلد الدهون، والتي تغطي العظام، وتر أو اللفافة.
وغالبا ما يستخدم تصنيف سمك إصابة الحروق لتحديد مدى عمق إصابة الحروق. الحروق السطحية تنطوي على البشرة فقط، والحروق سمك جزئي سطحي تنطوي على البشرة وse فقط أو الأدمة العليا. الحروق العميقة ذات السماكة الجلدية الجزئية تشمل البشرة والأدمة ، والأدمة التي تحتوي على الأوعية الدموية ، بصيلات الشعر ، والغدد الزيتية والعرق.
تتميز الحروق الكاملة بسماكة من خلال إثبات تورط سمك الجلد بالكامل وربما الأنسجة تحت الجلد. هذا النوع من الجرح يمكن أن تلتئم فقط عن طريق الانكماش أو مع تطعيم الجلد. وكان الهدف العام من هذا الإجراء لخلق كامل سمك حرق الجرح وإعادة بنائها مع الكسب غير المشروع الجلد كامل سمك.
وقد تحقق ذلك عن طريق وضع كتلة نحاسية دائرية محمّاة إلى 80 درجة مئوية وتطبيقها على جلد الفم لمدة 20 ثانية. تم استئصال الأنسجة النخرية جراحيا بعد 24 ساعة من إصابة الحروق. وضعت الطعوم الجلد سمك كامل حصادها من ذيل الماوس المانحة على جروح حرق ختان.
ثم سيتم تأمين الطعوم مع لاصقة جراحية. كل من الحيوانات المانحة والمتلقية تأتي من نفس سلالة اغران. وتستخدم فئران الخزعة أثناء الدراسة.
ومع ذلك، يمكن أيضا سلالة من الفئران يمكن استخدامها أيضا. وهذا يشمل الفئران عديمة الشعر ذات الحساسية المناعية، والتي هي مفيدة بشكل خاص في دراسات التئام الجروح. كما إزالة الشعر والتهاب المرتبطة بها لم المتشرد وإعادة نمو الشعر لا تتداخل مع تحليل الصورة الرقمية، عندما قياسات المنطقة وأنواع أخرى من تقييم الجروح المجهرية.
هذا صحيح بشكل خاص في نماذج العدوى ، حيث يتم تطبيق تعليقنا للكائن الحيوي والبكتيريا على هذا الوجه الخاص بك من الجرح ويتم قياس إشارة الكائن الحيوي للإشارة إلى معدل النمو البكتيري. يتكون جهاز إصابة الحرق الحراري من كتلة نحاسية دائرية مصنوعة خصيصًا قياس 10 ملليمترات في القطر محمّاً إلى 80 درجة مئوية. يتم التحقق من درجة حرارة كتلة النحاس باستخدام كاميرا التصوير الحراري بالأشعة تحت الحمراء.
لإنشاء كامل سمك حرق الجرح، يتم تطبيق كتلة النحاس لمدة 20 ثانية باستخدام ضغط ثابت من 0.15 نيوتن الذي يتم رصده من قبل manometer الرقمية. المسكنات المتعددة الوسائط هي أفضل ممارسة لإدارة الألم في إجراءات البحوث الحيوانية الغازية. ويشمل نظام الإدارة المثالي للتكليس الإدارة الوقائية أو الإجرائية.
تمت إضافة الباراسيتامول في ثلاثة ملليغرام لكل وجبة إلى مياه الشرب وزودت 12 ساعة قبل و 72 ساعة بعد العملية. تم إعطاء البوبرينورفين في 0.05 ميكروغرام في غرام واحد تحت الجلد 30 دقيقة قبل الإجراء وكل ست ساعات لأول 72 ساعة بعد الإجراء. وكان تدار Lidocaine في خمسة ملليغرام لكل كيلوغرام تحت الجلد حول dorsum كل فأرة 15 دقيقة قبل الإجراء، وكان حجم إجمالي 200 ميكرولترات من الحل الرينغات Lactated في 5٪ dextrose حقن تحت الجلد قبل الإجراء، وست ساعات بعد إجراء لمنع الجفاف.
كانت الفئران nisertide باستخدام حقن داخل الصفاق من Xylazine في 10 ملليغرام للكيلوغرام الواحد، والكيتامين في 100 ملليغرام للكيلوغرام الواحد. يمكن تقييم عمق التخدير عن طريق قرصة إصبع. التخدير يلغي منعكس وميض ، ومنع المرطبات من فيلم المسيل للدموع اللازمة للحفاظ على ترطيب القرنية والعين تتعرض باستمرار للهواء بسرعة يصبح المجففة ، تم تطبيق مواد التشحيم على العينين للحفاظ على ترطيب القرنية.
يتم قص dorsum كل الماوس ويتم تطبيق كريم ازاحة لمدة دقيقة واحدة لإزالة الشعر. يتم وضع nisertide عرضة على طاولة مسطحة ويتم إنشاء حرق حراري من خلال تطبيق كتلة النحاس دائرية محمّاة إلى 80 درجة مئوية لمدة 20 ثانية. الماوس، يتم وضعها مرة أخرى على وسادة التدفئة للحفاظ على الحارة ومنع انخفاض حرارة الجسم، وهو أثر جانبي متكرر من وكلاء التخدير.
بمجرد استردادها من التخدير، يمكن وضع الماوس في قفص فردي. بعد 24 ساعة من تحريض إصابة الحروق. الأنسجة النخرية تثير جراحيا.
يتم حصاد أربعة مرض الكسب غير المشروع الجلد من القتل الرحيم المانح ذيل الماوس. على الرغم من أن الجانب الآخر لذلك هناك تحت الذيل قد يكون أيضا باستخدام نموذج الماوس. لذلك قد تختلف درجة الاستجابة البشرية بناءً على أصل الكسب غير المشروع للجلد من المتبرعين.
على سبيل المثال، الأذن والجلد الخلفي لم يعد في المبيعات بالمقارنة مع الجلد الذيل ويثير استجابة بشرية أكثر قوة، والتي قد تؤدي إلى رفض الكسب غير المشروع. ويمكن أيضا أن تؤخذ في الاعتبار سمك الطعوم الجلدية لأنها قد تلعب عاملا حاسما في نجاح engraftment من الجلد الكسب غير المشروع اتخاذ. بشرة آمنة مثل تلك من الخلف لديها احتمال أعلى من الفشل بسبب ارتفاع المطالب الأيضية للأنسجة.
وبالتالي، فإن نجاح الطعم الجلدي المسبب للحساسية للجلد الخلفي أقل من النجاح المبلغ عنه في الكسب غير المشروع لبشرة الذيل. تم التسبب في التخدير عن طريق استنشاق 5٪ Isoflurane في 100٪ من الأكسجين بمعدل تدفق أربعة لترات في الدقيقة الواحدة، تليها صيانة التخدير باستخدام 2٪ Isoflurane في اثنين لترات في الدقيقة للصيانة أثناء الجراحة. تم إعطاء Buprenorphine عند بدء الإجراء لتوفير الظلالة بعد الجراحة.
تم إعداد الجروح الحروق مع بوديوني اليود، تليها 70٪ الكحول. يتم استئصال الحرق النخري مع مقص لإزالة عيب الجلد كامل سمك دائري، تتم إزالة طبقة كارنوسوس panniculus من hypodermis لخلق سرير المتلقي الكسب غير المشروع الجلد مستقرة بعض المؤلفين تشير إلى الحفاظ على طبقة carnosus panniculus من hypodermis كما يعتقد أن تكون ضرورية لrevascularization من الكسب غير المشروع. ومع ذلك، في هذه الحالة، قد تصبح حركة هذه الطبقة وما ينتج عنها من قوى القص المحتملة بين الكسب غير المشروع وسرير المتلقي مشكلة.
إزالة طبقة كارنوس panniculus لم تؤثر سلبا على نجاح عملية التطعيم. الطعوم سمك كامل، يتم حصادها من ذيل الماوس المانحة القتل الرحيم. يتم تقش الذيل طولياً، مما يسمح بفصل الجلد عن الأنسجة الرخوة الكامنة.
ثم ينتشر جلد الذيل على طبق بيتري مملوء بالملوحة المالحة العقيمة والطبيعية ويقطع إلى بقع دائرية باستخدام مسطرة. ثم يتم نقل الطعوم إلى طبق بيتري مع شاش معقمة غارقة في المالحة العادية وأبقى أربع درجات حتى جاهزة ليتم تطعيمها. ثم يتم تأمين الطعوم إلى السرير المتلقي مع الغراء الجراحية.
الثغرات بين المتبرعين الجلد الكسب غير المشروع وسرير الجرح المتلقي هي الضغط بلطف لمحاذاة حواف الجلد. وترتدي الجروح داخل الشاش البارافين الخامل وصلصة ثانوية لاصقة. والتقطت صور رقمية لجروح مطعّنة في يوم وثلاثة وسبعة أيام بعد إصابتها بالحروق.
في ما بعد الوفاة تم استئصال الجروح الحرق الظهرية جراحيا إلى اللفافة، تم قسمة الجروح مع نصف ثابتة في 10٪ buffered formalin، ومعالجتها لعلم الأنسجة والكيمياء المناعية. الطعوم الجلدية توفر نظام سقالة للهجرة الخلوية. يعتمد تكامل الكسب غير المشروع الناجح على الخلايا الليفية الفعالة والهجرة الكيراتينوتية من محاولة المتلقي إلى الكسب غير المشروع للمتبرع الذي يتحلل ببطء ويحل محله خلايا قادرة على إنتاج المصفوفة خارج الخلية.
تعرض قسم النسيج من الجروح الجماعية إلى تلطيخ الهماتوسلين ويوسين. وأظهرت الصور التمثيلية للهماوكسيلين ويوسين أجزاء ملطخة من الجروح، أن طول البشرة القريبة التي تم تسليط الضوء عليها باللون الأصفر تزداد بشكل كبير في اليوم السابع، مقارنة باليوم الثالث بعد إصابة الحروق. لتقدير معدل إعادة الظهارة ، تم التعبير عن مساحة الجرح الذي كان مغطى بالقرب من البشرة كنسبة مئوية من الجرح بأكمله.
المصفوفة خارج الخلية هي المكون غير الخلوي للجلد، الذي يوفر سقالات للمكونات الخلوية. تتكون المصفوفة خارج الخلية من بروتينات ليفية، مثل الكولاجين والليفي. هذه الجزيئات تعزيز نضج الجروح والحفاظ على سلامة الهيكلية من الجلد شبه هوكوانيتيات الكيمياء المناعية للكولاجين نوع واحد، والبقع النسيجية مثل ثلاثية الألوان ميسون يمكن استخدامها لمساعدة سلامة مصفوفة خارج الخلية من الصورة micrograph.
وقد ظهرت أساليب أكثر تطورا مثل المجهر الجيل التوافقي الثاني كأداة قوية للتحليل الكمي لهيكل الكولاجين. المورين الجلد تطعيم يوفر نموذجا ما قبل الظهر المحتملة ممتازة للتحقيق في دمج الرسوم البيانية في الجانب المتلقي. توضح هذه الدراسة طريقة موثوقة لتنفيذ الطعوم الجلد بنجاح في نموذج الماوس، فضلا عن التقييم النسيجي للجروح التئام.
