המטרה הכוללת של הליך זה היא ליצור מודל מורין להתרבות של פצע כוויה בעובי מלא משוחזר עם שתל עור אלרגי. העור מחולק לשני מרכיבים האפידרמיס והדרמיס. מתחת לדרמיס יש שומן תת עורי, המכסה עצם, גיד או fascia.
סיווג העובי של פגיעה בכוויות משמש לעתים קרובות כדי להגדיר את היקף עומק כוויות. כוויות שטחיות כרוכות רק באפידרמיס, כוויות בעובי חלקי שטחי כרוכות באפידרמיס ורק ביזה או דרמיס עליון. כוויות בעובי עורי עמוק כרוכות באפידרמיס ודרמיס, הדרמיס הרשתית המכיל כלי דם, זקיקי שיער, בלוטות שמן וזיעה.
כוויות עובי מלא מאופיינים במעורבות ניכרת של כל עובי העור ואולי רקמה תת עורית. סוג זה של פצע יכול לרפא רק על ידי התכווצות או עם השתלת העור. המטרה הכוללת של הליך זה הייתה ליצור פצע כוויה בעובי מלא ומשוחזר עם שתל עור בעובי מלא.
זה הושג על ידי הצבת בלוק פליז עגול שחומם מראש ל 80 מעלות צלזיוס והוחל על עור הפה למשך 20 שניות. רקמה נקרטית הוצאה בניתוח 24 שעות לאחר פציעת הכוויה. שתלי עור בעובי מלא שנקטפו מעולם של עכבר תורם הונחו על פצעי הכוויה המסותתים.
השתלים יהיו מאובטחים לאחר מכן עם דבק כירורגי. הן בעלי חיים תורמים והן בעלי חיים מגיעים מאותו זן גזעי של עכברים. עכברי ביופסיה משמשים במהלך המחקר.
עם זאת, גם זן של עכברים עשוי לשמש גם. זה כולל עכברים חסרי שיער בעלי כשל חיסוני, אשר שימושיים במיוחד במחקרים ריפוי פצעים. כמו הסרת שיער דלקת הקשורים נווד עשה צמיחת שיער מחדש אינו מפריע ניתוח תמונה דיגיטלית, כאשר מדידות שטח וסוגים אחרים של הערכת פצע מיקרוסקופי.
זה נכון במיוחד במודלים של זיהום, שבו ההשעיה שלנו של ביואורגניזם וחיידקים מוחל על זה הפנים שלך של הפצע ואת אות ביואורגניזם נמדד כדי להצביע על קצב הצמיחה החיידקית. התקן הפציעה בכוויות תרמיות מורכב מבלוק פליז עגול בהתאמה אישית בקוטר 10 מ"מ שחומם מראש ל-80 מעלות צלזיוס. הטמפרטורה של בלוק פליז מאומת באמצעות מצלמת הדמיה תרמית אינפרא אדום.
כדי ליצור פצע כוויה בעובי מלא, בלוק פליז מוחל במשך 20 שניות באמצעות לחץ מתמיד של 0.15 ניוטון אשר מנוטר על ידי מד חום דיגיטלי. משככי כאבים רב-מודאליים היא הנוהג הטוב ביותר לניהול כאב בהליכי מחקר פולשניים בבעלי חיים. משטר הממשל האידיאלי של משככי כאבים כולל ממשל משכך כאבים מונע או פרוצדורלי מראש.
אקמול בשלושה מיליגרם לארוחה נוסף למי שתייה וסיפק 12 שעות לפני ובמשך 72 שעות לאחר ההליך. Buprenorphine ב 0.05 מיקרוגרם לגרם היה מנוהל תת עורית 30 דקות לפני ההליך וכל שש שעות במשך 72 השעות הראשונות לאחר ההליך. לידוקאין בחמישה מיליגרם לקילוגרם היה מנוהל תת עורית סביב הגב של כל עכבר 15 דקות לפני ההליך, נפח כולל של 200 microliters של פתרון צלצולים לקטה ב 5% דקסטרוז הוזרק תת עורית לפני ההליך, ושש שעות לאחר ההליך למניעת התייבשות.
עכברים היו nisertide באמצעות הזרקה תוך-אישית של Xylazine ב 10 מיליגרם לקילוגרם, ו קטמין ב 100 מיליגרם לקילוגרם. עומק הרדמה ניתן להעריך באמצעות קמצוץ בוהן. הרדמה מבטלת את רפלקס המצמוץ, ומונעת רענון של סרט הדמעות הנדרש לשמירה על הידרציה של הקרנית והעין החשופה ללא הרף לאוויר במהירות הופך מיובש, חומר סיכה הוחל על העיניים כדי לשמור על הידרציה של הקרנית.
הגב של כל עכבר נחתך וקרם depilating מוחל במשך דקה אחת כדי להסיר את השיער. החיה nisertide ממוקם נוטה על שולחן שטוח כוויה תרמית נוצרת על ידי החלת בלוק פליז עגול שחומם מראש ל 80 מעלות צלזיוס למשך 20 שניות. העכבר, ממוקם בחזרה על כרית החימום כדי לשמור אותו חם ולמנוע היפותרמיה, תופעות לוואי תכופות של סוכני ההרדמה.
לאחר שהתאושש מהרדמה, העכבר עשוי להיות ממוקם לתוך כלוב בודד. 24 שעות לאחר אינדוקציה של פציעת כוויות. רקמה נמקית מרגשת בניתוח.
ארבעה שתלי עור מחלה נקצרים מעקב עכבר תורם המתת דם. למרות שהצד השני כך שיש מתחת לזנב יכול להיות גם באמצעות מודל העכבר. אז מידת התגובה האנושית עשויה להשתנות בהתאם למקור של שתל עור תורם.
לדוגמה, עור האוזן והגב כבר לא במכירות בהשוואה לעור הזנב ומעורר תגובה אנושית חזקה יותר, אשר עלולה להוביל לדחיית השתל. עובי שתלי העור ניתן גם לקחת בחשבון כפי שהוא עשוי לשחק גורם מכריע חריטה מוצלחת של השתלת העור לקחת. עור מאובטח כגון זה מאחור יש הסתברות גבוהה יותר של כישלון בשל דרישות מטבוליות גבוהות יותר של הרקמה.
כתוצאה מכך, ההצלחה המדווחת של תחריט שתל עור אלרגני לעור הגב נמוכה מההצלחה המדווחת של השתלת עור הזנב. הרדמה נגרמה על ידי שאיפה של 5%Isoflurane ב 100% חמצן בקצב זרימה של ארבעה ליטרים לדקה, ואחריו תחזוקה של הרדמה באמצעות 2% Isoflurane בשני ליטר לדקה לתחזוקה במהלך הניתוח. Buprenorphine היה מנוהל בעת תחילת ההליך כדי לספק משכך כאבים לאחר הניתוח.
פצעי כוויות היו מוכנים עם Povidone-יוד, ואחריו 70% אלכוהול. צריבה נמקית הוא excised עם מספריים כדי להסיר את הפגם עור עובי מלא עגול, שכבת panniculus carnosus של hypodermis מוסר כדי ליצור מיטת מושתל עור יציב כמה מחברים מציעים לשמר את שכבת panniculus קרנוסוס של hypodermis כפי שהוא האמין להיות נחוץ עבור revascularization של השתל. עם זאת, במקרה זה, הניידות של שכבה זו וכוחות ההגרלה הפוטנציאליים הנובעים מכך בין מיטת השתל למיטה הנמען עלולים להפוך לבעייתיים.
הסרת שכבת קרניקולוס קרנוסוס לא השפיעה לרעה על הצלחת הליך ההשתלה. שתלי עובי מלא, נקצרים הזנה של עכבר תורם המתת דם. הזנב חרה לאורך, ומאפשר לעור להיות מופרד מן הרקמה הרכה הבסיסית.
עור הזנב מתפשט לאחר מכן על צלחת פטרי מלאה מלוחים סטריליים, נורמלי לחתוך כתמים עגולים באמצעות סרגל. השתלים מועברים לאחר מכן לצלחת פטרי עם גזה סטרילית ספוגה מלוחים רגילים ושמרו על ארבע מעלות עד מוכן להיות מושתל. השתלים מאובטחים לאחר מכן למיטת הנמען עם דבק כירורגי.
הפערים בין שתל העור התורם לבין מיטת הפצע של המטופל לוחצים בעדינות ליישר את קצות העור. הפצעים לבושים בתוך גזה פרפין אינרטית והלבשה משנית דבק. תמונות דיגיטליות, של פצעים מושתלים צולמו ביום אחד, שלושה ושבעה ימים לאחר פציעת כוויות.
לאחר המוות, פצעי הכוויה הגבית נותפו בניתוח לפאשיה, פצעים נצטלמו עם חצי אחד קבוע בפורמלין 10%, ומעובדים להייסטולוגיה ולאימונוהיסטוכימיה. שתלי עור מספקים מערכת פיגומים להגירה סלולרית. שילוב מוצלח של שתלים תלוי בפיברובלסטים יעילים והגירה של קרטינוציטים מההצעה של הנמען לתוך השתל התורם אשר מושפל באיטיות ומוחלף בתאים המסוגלים לייצר את המטריצה החוץ-תאית.
החלק ההיסטולוגי של פצעים המוניים היה נתון להמטוקסילין וכתמי אאוסין. תמונות מייצגות של המטוקסילין ואאוסין מוכתמות בחלקים של פצעים, הראו כי אורך האפידרמיס הקרוב המודגש בצהוב גדל באופן משמעותי ביום השביעי, בהשוואה ליום השלישי לאחר פציעת כוויות. כדי להעריך את קצב האפיתליזציה מחדש, אזור הפצע שהיה מכוסה באפידרמיס קרוב בא לידי ביטוי כאחוז מהפצע כולו.
המטריצה החוץ-תאית היא המרכיב הלא תאי של העור, המספק פיגומים לרכיבים התאיים. המטריצה החוץ-תאית מורכבת מחלבונים סיביים, כגון קולגן ופיברונצין. מולקולות אלה לשפר את הבשלות של פצעים ולשמור על השלמות המבנית של אימונוהיסטוכימיה חצי-תאית העור עבור קולגן סוג אחד, וכתמים היסטולוגיים כגון trichrome של מייסון עשוי לשמש כדי לסייע שלמות מטריצה חוץ תאית ממיקרוגרף צילום.
שיטות מתוחכמות יותר כגון מיקרוסקופיה הדור ההרמוני השני הופיעו ככלי רב עוצמה לניתוח כמותי של מבנה קולגן. השתלת עור מורין מספקת מודל פרה-קליני פוטנציאלי מצוין כדי לחקור את שילוב הגרפים בצד המטופל. מחקר זה מדגים שיטה אמינה לביצוע מוצלח של שתלי עור במודל העכבר, כמו גם את ההערכה ההיסטולוגית של פצעי הריפוי.
