Bu işlemin genel amacı alerjik deri grefti ile yeniden tam kalınlıkta yanık yarası tekrarlanabilir bir murine modeli oluşturmaktır. Cilt epidermis ve dermis olmak için iki bileşene ayrılır. Dermisin altında kemik, tendon veya fasya yı kapsayan deri altı yağ bulunmaktadır.
Yanık yaralanmasının kalınlık sınıflandırması genellikle yanık yaralanması derinliğinin derecesini tanımlamak için kullanılır. Yüzeysel yanıklar sadece epidermis içerir, Yüzeysel kısmi kalınlık yanıkları epidermis ve sadece pillori veya üst dermis içerir. Derin dermal kısmi kalınlık yanıkları epidermis ve dermis, kan damarları, saç folikülleri, yağ ve ter bezleri içeren retiküler dermis içerir.
Tam kalınlıktaki yanıklar, derinin ve muhtemelen deri altı dokunun tüm kalınlığının belirgin tutulumu ile karakterizedir. Bu tip yaralar sadece kasılma veya deri greftleme ile iyileşebilir. Bu işlemin genel amacı tam kalınlıkta yanık yarası oluşturmak ve tam kalınlıkta deri grefti ile yeniden inşa etmekti.
Bu 80 santigrat derece önceden ısıtılmış dairesel bir pirinç blok koyarak elde edildi ve 20 saniye boyunca ağız cilt uygulanır. Nekrotik doku yanık yaralanmasından 24 saat sonra cerrahi olarak çıkarıldı. Donör farenin kuyruğundan alınan tam kalınlıkta deri greftleri, eksise yanık yaralarının üzerine serildi.
Greftler daha sonra cerrahi bir yapıştırıcı ile güvenli olacaktır. Hem donör hem de alıcı hayvanlar farelerin aynı inbred suş geliyor. Biyopsi fareleri çalışma süresince kullanılır.
Ancak, farelerin suş da kullanılabilir. Bu immünyonsuz tüysüz fareler içerir, özellikle yara iyileşmesi çalışmalarında yararlıdır. Epilasyon ve ilişkili inflamasyon bir hobo yaptı ve saç büyüme dijital görüntü analizi ile müdahale etmez, zaman alan ölçümleri ve mikroskobik yara değerlendirmesi diğer türleri.
Bu özellikle biyo-organizma ve bakteri süspansiyonu bu yara ve biyo-organizma sinyal yüz uygulanır enfeksiyon modellerinde doğrudur bakteri büyüme oranını göstermek için ölçülür. Termal yanık yaralanma cihazı, 10 milimetre çapında 80 santigrat dereceye kadar önceden ısıtılan özel yapım dairesel pirinç bloktan oluşur. Pirinç bloğun sıcaklığı kızılötesi termal görüntüleme kamerası kullanılarak doğrulanır.
Tam kalınlıkta yanık yarası oluşturmak için pirinç blok, dijital manometre ile izlenen 0,15 Newton'luk sabit basınç kullanılarak 20 saniye uygulanır. Multimodal analjezi invaziv hayvan araştırma prosedürleri ağrı yönetimi için en iyi uygulamadır. Analjezi ideal yönetim rejimi pre-emptive veya pre-prosede analjezik uygulama içerir.
Yemek başına üç miligram parasetamol içme suyuna eklenir ve işlemden 12 saat önce ve işlemden sonra 72 saat boyunca temin edilir. Gram başına 0.05 mikrogramda buprenorfin işlemden 30 dakika önce ve işlemden sonraki ilk 72 saat boyunca her altı saatte bir deri altına verildi. Kilogram başına beş miligram lik lidokain, işlemden 15 dakika önce her farenin dorsumunun etrafına subkutan olarak uygulandı, %5 dekstrozda 200 mikrolitre Laktatlı Ringers Solüsyonu toplam hacim subkutan olarak enjekte edildi ve dehidratasyondan altı saat sonra işlemden altı saat önce.
Fareler kilogram başına 10 miligram xylazine intraperitoneal enjeksiyon u kullanılarak nisertit ve kilogram başına 100 miligram ketamin edildi. Anestezik derinlik bir parmak sıkışması ile değerlendirilebilir. Anestezi göz kırpma refleksini ortadan kaldırarak, korneanın bakımı için gerekli olan gözyaşı filminin ferahlığını önler ve sürekli olarak havaya maruz kalan gözün hızla susuz kalması, korneanın hidrasyonunu korumak için gözlere bir yağ layıcı uygulanır.
Her farenin dorsum kırpılır ve saç kaldırmak için bir dakika boyunca dökülen krem uygulanır. Nisertit hayvan düz bir masa üzerinde eğilimli konumlandırılmış ve termal yanık 20 saniye süreyle 80 santigrat derece önceden ısıtılmış dairesel bir pirinç blok uygulanarak oluşturulur. Fare, sıcak tutmak ve hipotermi önlemek için ısıtma yastığı geri yerleştirilir, anestezik ajanların sık görülen bir yan etkisi.
Anesteziden kurtarıldıktan sonra fare tek bir kafese yerleştirilebilir. Yanık yaralanmasının indüksiyonundan 24 saat sonra. Nekrotik doku cerrahi olarak heyecanlanır.
Dört hastalık deri grefti ötanazi donör fare kuyruğundan hasat edilir. Her ne kadar diğer tarafı bu yüzden kuyruk altında da fare modeli kullanıyor olabilir. Yani insan tepkisinin derecesi donör deri greftinin kökenine bağlı olarak değişebilir.
Örneğin, kulak ve sırt derisi kuyruk derisine kıyasla artık satışta değildir ve daha sağlam bir insan tepkisine yol açabilmekte ve bu da greft reddine yol açabilmektedir. Deri greftlerinin kalınlığı da göz önünde bulundurulabilir, çünkü deri greftinin başarılı bir şekilde engraftment alınmasında belirleyici bir faktör olabilir. Arkadan gelen gibi güvenli cilt, dokunun daha yüksek metabolik talepleri nedeniyle daha yüksek başarısızlık olasılığına sahiptir.
Sonuç olarak, sırt derisi için alerjenik deri greftengraftment bildirilen başarı kuyruk deri grefti için bildirilen başarı daha düşüktür. Anestezi dakikada dört litre lik bir akış hızında %100 oksijen %5 Isoflurane'nin solunması yla indüklendi, ardından ameliyat sırasında bakım için dakikada iki litre de %2 Isofluran kullanılarak anestezi nin sürdürülmesi takip edildi. Buprenorfin postoperatif analjezi sağlamak için prosedürün başlangıcında uygulandı.
Yanık yaraları Povidone-iyot ile hazırlandı ve bunu %70 alkol izledi. Nekrotik Yanık dairesel tam kalınlıkta cilt defekti kaldırmak için makas ile excised, hipodermisin panniculus karnosus tabakası istikrarlı bir deri greft alıcı yatak oluşturmak için kaldırılır bazı yazarlar greft revaskülarizasyon için gerekli olduğuna inanılan olarak hipodermisin panniculus karnosus tabakası nın korunması öneririz. Ancak, bu durumda, bu tabakanın hareketliliği ve greft ve alıcı yatak arasındaki ortaya çıkan potansiyel kesme kuvvetleri sorunlu hale gelebilir.
Pannikulus karnosus tabakasının çıkarılması aşılama işleminin başarısını olumsuz etkilemedi. Tam kalınlıkta greftler, ötenazi donör farenin kuyruğundan hasat edilir. Kuyruk uzunlamasına kesilir, cildin altta yatan yumuşak dokudan ayrılmasını sağlar.
Kuyruk derisi daha sonra steril, normal tuzlu ile dolu bir Petri kabına yayılır ve bir cetvel kullanılarak dairesel yamalar halinde kesilir. Greftler daha sonra steril bir gazlı bez normal tuzlu batırılmış ve aşılanmış hazır olana kadar dört derece tutulur bir Petri kabına aktarılır. Greftler daha sonra cerrahi tutkal ile alıcı yatağa sabitlenir.
Donör deri grefti ve alıcı yara yatağı arasındaki boşluklar cilt kenarlarını hizalamak için hafifçe bastırılır. Yaralar inert parafin gazlı bez ve yapışkan ikincil pansuman içinde giyinmiş. Dijital fotoğraflar, aşılı yaraların bir, üç ve yedi gün sonra yanık yaralanması alınmıştır.
Post-mortem dorsal yanık yaraları cerrahi fasya için excised edildi, yaralar% 10 tamponlu formalin bir yarısı sabit ile ikiye bölündü, ve histoloji ve immünohistokimya için işlendi. Deri greftleri hücresel göç için bir iskele sistemi sağlar. Başarılı greft entegrasyonu, yavaş yavaş bozulan ve hücre dışı matriks üretme yeteneğine sahip hücreler tarafından değiştirilen donör greftine alıcı dan etkili fibroblastlar ve keratinosit göçüne bağlıdır.
Kitle yaralarının histolojik bölümü hematoksilin ve eozin boyamasına maruz kaldı. Yaraların hematoksilin ve eozin lekeli bölümlerinin temsili görüntüleri, sarı ile vurgulanan yakın epidermisin uzunluğunun yedinci günde, yanık yaralanmasından sonraki üçüncü güne göre önemli ölçüde arttığını göstermiştir. Yeniden epitelizasyon oranını tahmin etmek için, yakın epidermis ile kaplı olan yaranın alanı tüm yaranın yüzdesi olarak ifade edildi.
Hücre dışı matris, hücresel bileşenler için iskele sağlayan cildin hücresel olmayan bileşenidir. Hücre dışı matriks kollajen ve Fibronektin gibi fibröz proteinlerden oluşur. Bu moleküller yaraların olgunluğunu artırmak ve kollajen tip bir için deri semikantif immünohistokimya yapısal bütünlüğünü korumak, ve Mason trikrom gibi histolojik lekeler fotoğraf mikrograf ekstrasellüler matris bütünlüğü yardımcı olmak için kullanılabilir.
İkinci harmonik nesil mikroskopi gibi daha gelişmiş yöntemler kollajen yapının kantitatif analizi için güçlü bir araç olarak ortaya çıkmıştır. Murine deri greftleme alıcı tarafına grafiklerin entegrasyonunu araştırmak için mükemmel bir potansiyel preklinik model sağlar. Bu çalışma, bir fare modelinde deri greftlerinin başarılı bir şekilde gerçekleştirilebilmek için güvenilir bir yöntem inyanıtının yanı sıra iyileştirici yaraların histolojik değerlendirmesini göstermektedir.
