该程序的总体目标是创建一个可重复的乳氨酸模型的全厚度烧伤伤口重建与过敏性皮肤移植。皮肤分为表皮和真皮两个组分。真皮下面是皮下脂肪,包括骨骼、肌腱或筋膜。
烧伤的厚度分类通常用于定义烧伤深度的程度。表面烧伤只涉及表皮,表面部分厚度烧伤涉及表皮,只涉及皮毛或上皮。深皮部分厚度烧伤涉及表皮和真皮,包括血管,毛囊,油和汗腺的后额真皮。
全厚度烧伤的特点是明显参与皮肤的整个厚度,并可能皮下组织。这种类型的伤口只能通过收缩或皮肤移植愈合。该程序的总体目标是创建一个全厚度烧伤伤口,并重建与全厚度的皮肤移植。
这是通过将圆形黄铜块预热至 80 摄氏度,并应用于口腔皮肤 20 秒, 实现的。坏死组织在烧伤24小时后被手术切除。从捐赠小鼠尾部收获的全厚皮肤移植物被放在切除的烧伤伤口上。
然后,移植物将用手术粘合剂固定。供体和接受动物都来自同一种近亲繁殖的小鼠。在研究过程中使用活检小鼠。
然而,也可以使用小鼠应变。这包括免疫能力无毛小鼠,这在伤口愈合研究中特别有用。由于脱毛和相关炎症,流浪汉做了和头发再生不干扰数字图像分析,当面积测量和其他类型的显微伤口评估。
这在感染模型中尤其如此,在感染模型中,我们的生物有机体和细菌的悬浮液被应用到此,您的伤口和生物有机体信号被测量,以指示细菌的生长速度。热烧伤装置由一个定制的圆形黄铜块组成,直径为10毫米,预热至80摄氏度。使用红外热像仪验证黄铜块的温度。
为了创建全厚度烧伤伤口,使用由数字气压计监控的恒定压力 0.15 牛顿,黄铜块应用 20 秒。多模位镇痛是侵入性动物研究过程中疼痛管理的最佳做法。镇痛的理想管理制度包括先发制人或程序前镇痛治疗。
每餐三毫克的扑热息痛被添加到饮用水中,并在手术前12小时和手术后72小时内供应。在手术前30分钟和手术后前72小时每6小时施用一次,每克0.05微克的丁丙诺啡被施用。在手术前15分钟,在每只小鼠的剂量周围以每公斤5毫克的利多卡因施用,在手术前以5%的葡萄糖注射200微升的乳酸环环剂溶液,在手术后6小时注射,以防止脱水。
小鼠是尼塞肽使用内丙酮注射的锡拉辛每公斤10毫克,氯胺酮为每公斤100毫克。麻醉深度可以通过捏到手趾。麻醉可消除眨眼反射,防止用于维持角膜水化所需的泪膜的茶点,眼睛连续暴露在空气中迅速脱水,在眼睛上涂抹润滑剂以保持角膜的水化。
每只鼠标的长毛被夹住,并应用脱毛霜一分钟来去除头发。尼瑟蒂德动物容易放置在平桌上,通过应用一个圆形黄铜块预热到80摄氏度,持续20秒,可以产生热燃烧。鼠标,被放回加热垫上,以保持其温暖,并防止体温过低,麻醉剂的频繁副作用。
一旦从麻醉中恢复过来,小鼠可以放入单独的笼子。烧伤感应后24小时。坏死组织是手术兴奋。
四种疾病皮肤移植物从安乐死捐赠鼠尾中收获。虽然另一边所以有尾巴下也可能使用鼠标模型。因此,人类的反应程度可能因捐赠者皮肤移植的起源而异。
例如,与尾皮相比,耳皮和背部皮肤已不再在销售中,并引发更健壮的人类反应,这可能导致移植物排斥。皮肤移植厚度也可以考虑,因为它可能发挥一个决定性因素,成功地移植皮肤移植采取。安全的皮肤,如从背部有更高的失败概率,由于较高的代谢要求的组织。
因此,报告的过敏性皮肤移植移植背部皮肤的成功低于报告的尾皮移植的成功。麻醉是由吸入5%异氟兰在100%氧气以每分钟4升的流速,其次是维持麻醉使用2%异氟兰在每分钟2升,在手术期间维护。在手术开始时施用丁丙诺啡,以提供术后镇痛。
烧伤的伤口用波维酮碘来准备,其次是70%的酒精。坏死烧伤用剪刀切除圆形全厚皮肤缺陷,皮下层的潘尼库鲁斯肌膜层被切除,以创造一个稳定的皮肤移植接受者床一些作者建议保留皮下层的潘尼库鲁斯肌膜层,因为它被认为是必要的再血管化移植。然而,在这种情况下,此层的流动性和由此产生的嫁接床和接受床之间的潜在剪切力可能会成为问题。
去除潘尼库鲁斯肉食层不会对嫁接程序的成功产生不利影响。全厚嫁接,都是从安乐死捐赠鼠的尾巴上收获的。尾巴纵向倾斜,使皮肤与底层软组织分离。
然后,尾皮被撒在充满无菌、正常盐水的培养皿上,然后用尺子切成圆形斑块。然后,移植物被转移到培养皿中,用无菌纱布浸泡在正常的盐水中,并保持四度,直到准备被移植。然后用手术胶将移植物固定在接受者床上。
捐赠者皮肤移植物和受助人伤口床之间的间隙轻轻按压以对齐皮肤边缘。伤口穿在惰性石蜡纱布和胶粘剂二次敷料内。在烧伤后一天、三天和七天拍摄了被移植伤口的数字照片。
在验尸时,后伤被手术切除到筋膜上,伤口被一半固定在10%缓冲的甲蛋白中,并处理成组织学和免疫组织化学。皮肤移植物为细胞迁移提供了一个支架系统。成功的移植整合取决于有效的成纤维细胞和角蛋白细胞从接受者投标迁移到供体移植物,这种移植物被缓慢降解,取而代之的是能够产生细胞外基质的细胞。
大规模伤口的组织学部分受到赤氧素和 eosin 染色。具有代表性的色氧林和 eosin 染色部分伤口的图像显示,与第三天烧伤后相比,以黄色突出显示的近表皮长度显著增加。为了估计重新表皮化的速度,用近表皮覆盖的伤口区域以整个伤口的百分比表示。
细胞外基质是皮肤的非细胞成分,为细胞组分提供支架。细胞外基质由纤维蛋白组成,如胶原蛋白和纤维素。这些分子可增强伤口的成熟度,保持皮肤半量免疫组织化学的结构完整性,用于胶原蛋白一型,而组织学染色,如梅森的三色,可用于协助从照片显微图获得细胞外基质完整性。
更复杂的方法,如第二次谐波生成显微镜已成为胶原蛋白结构定量分析的有力工具。Murine 皮肤嫁接提供了一个极好的潜在临床前模型,用于研究图形与接收方的集成。这项研究演示了一种可靠的方法,成功地执行皮肤移植在小鼠模型以及愈合伤口的组织学评估。