ثقافة Explant الذيل ثلاثي الأبعاد لدراسة تجزئة الفقاريات في حمار وحشي

3-D حمار وحشي الذيل explants دعونا استغلال الشفافية من أجنة حمار وحشي إلى أقصى حد لها خلال تطوير السوسميت وتجزئة الفقاريات. ملء خزان التزاوج فارغة مع مياه نظام السمك. تنظيف مصفاة مع نظام المياه.

رفع الحواجز بين أزواج التزاوج. نقل انتقائي زوج السمك في خزان المياه العذبة. جمع الأجنة في مصفاة من خلال نقل المياه مع خزان فارغ.

شطف الأجنة التي تم جمعها مع مياه نظام الأسماك والوجه على طبق بيتري. أدوات تشريح الإيثانول الصقيل. جعل طبقتين من الأشرطة على الشرائح.

قطع الجانبين الأفقي للغرف العميقة. تخفيضات غرفة كاملة مع الجانبين العمودي. قشر الشريط قبالة من سطح الغرفة.

صب وسائل الإعلام ثقافة الخلية في أنبوب. مزيج كلوريد الكالسيوم 2.8 ميلمولار التركيز النهائي. إضافة محلول مضاد حيوي.

Aliquot تشريح وسائل الإعلام في أنبوب منفصل. تكمل مصل الأبقار الجنين لجعل الأنسجة المتوسطة. إزالة التموج الأجنة مع الإبر.

شطف الأجنة في طبق المياه العذبة وجمعها ل explanting. استقرار الجنين مع إبرة والبدء في دي يوكينج. تقليم بقايا الأنسجة قبالة.

نقل الطائرات إلى غطاء. تسطيح الأنسجة وتمتص وسائل الإعلام الزائدة مع ماصة. وضع coverlip على متوسط النمو التي تحتوي على غرفة الشريحة.

ضع الأنسجة المضمحلة على مسح الأنسجة. تطبيق زيت الغمر إلى الهدف. جبل غرفة الشريحة على المجهر.

ضبط قنوات الليزر للحصول على الصورة. تحقق من حدود الطبقة z للعينة. إعداد التصوير الزمني وطبقات z.

يحافظ نظام explant ثلاثي الأبعاد على تكامل الخلايا إلى برعم الذيل والاطالة الزائدة سليمة مثل الأجنة الكاملة. من الممكن أيضا إيقاف الاستطالة الزائدة عن طريق تنشيط السطح كيميائيا باستخدام الكولاجين من النوع الأول. 3-D حمار وحشي الذيل explants النظام يتيح لنا لاستغلال الشفافية من أجنة حمار وحشي من خلال السماح لنا لالتقاط صور المجهر عالية الدقة وشبه موضوعية.

بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يتيح لنا فصل فائض الاستطالة من إشارات مورفوجين والتحكم أيضا في مصادر الإشارات المورفوجينية بطرق تشريح بسيطة.