يمكن أن تؤدي إصابات الكرة الأرضية المفتوحة إلى فقدان دائم للرؤية إذا تركت دون علاج. يسمح نموذج ثقافة الأعضاء هذا الجزء الأمامي بتقييم هذه الإصابات ضمن الحاجة إلى اختبار الحيوانات. يسمح هذا البروتوكول بتتبع إصابات الكرة الأرضية المفتوحة والعلاجات لتثبيت الإصابة لمدة ثلاثة أيام أو أكثر من خلال منصة ثقافة الأعضاء.
إثبات الإجراء سيكون ترينت بيرسون، فني أبحاث من مختبر الدكتور بويس. للبدء، وضع الستائر الجراحية والأدوات اللازمة لتشريح الإجمالي. إعداد خزانة السلامة الحيوية لتصور العيون على المجهر تشريح.
إعداد خزانة السلامة الحيوية لتجميع الطبق. إعداد مساحة عمل التعريفي إصابة الكرة الأرضية المفتوحة داخل خزانة السلامة الحيوية. ضع رذيلة التتبع المتقاطعة على مقبس المختبر، أمام منصة الثقب.
بعد إزالة الأنسجة المدارية اضافية وغسل العينين مع المضادات الحيوية المضادةmycotic PBS، ل hemisect العين وضع العين على مضاد المضادات الحيوية ANTIMYCOTIC PBS غارقة الشاش. استخدم شفرة حلاقة معقمة أو مشرط لإنشاء شق بالقرب من خط الاستواء للعين. ثم hemisect العين باستخدام مقص الجراحية المنحنية لعزل العين الأمامية.
استخدام مقص صغير كمجرفة لغرف الفكاهة الزجاجية من الجزء الأمامي وإزالة العدسة من الجزء الأمامي مع مقص صغير. قطع تدريجيا القزحية إلى جذر القزحية شعاعيا حتى شبكة trabecular مرئية. تمديد خفض 360 درجة حول القزحية، لفضح منطقة شبكة trabecular بأكملها وتنظيف أي قزحية المتبقية المتبقية التي تغطي meshwork trabecular إذا لزم الأمر.
تقليم بقايا الجسم ciliary الخلفي إلى منطقة meshwork trabecular ترك سوى شريط واحد ملليمتر رقيقة من الأنسجة. بعد وضع الجزء الأمامي في طبق بيتري. بلل مسحة قطنية في الوسائط وداب برفق في وسط القرنية لإزالة أي صبغة.
عقد العينين مع ملقط وإزالة صبغة إضافية حول الصلبة عن طريق مسح. ضع الجزء الأمامي المقلوب فوق المنطقة المرتفعة من الطبق السفلي ، مما يضمن بقاء القرنية في وسط المنطقة المرتفعة. ضع حلقة اللقط على الجزء الأمامي الموضوع حديثا، وقم بشد البراغي برفق باستخدام مفتاح L.
إرفاق كل من الموصلات السائلة مع O-حلقات إلى منافذ مترابطة في الجزء السفلي من الطبق. إلى موصل السائل الأول إرفاق 18 قياس 90 درجة عازمة محور إبرة, طول الأنابيب, محور إبرة قياس 18, مرشح حقنة النايلون, صمام ثلاثي ومحقنة 20 ملليمتر مليئة وسائل الإعلام. إلى موصل السائل الثاني إرفاق 18 قياس 90 درجة عازمة محور إبرة, طول الأنابيب, محور إبرة قياس 18, صمام ثلاثي كما هو موضح لموصل السائل الأول ومن ثم إرفاق الجزء برميل من حقنة معقمة 10 ملليلتر, والتي سوف تكون بمثابة خزان للقبض على السائل والفقاعات.
الحفاظ على الصمامات الثلاثية مفتوحة بشكل مناسب للمحاقن، ودفع بلطف وسائل الإعلام من خلال النظام، وذلك باستخدام أول منفذ موصل fluidics. لتضخيم الجزء الأمامي، قم بملء الأنابيب بالوسائط وملء الخزان في نهاية المطاف. إزالة الفقاعات عن طريق دفع بلطف وسائل الإعلام في الطبق وعكس الطبق لدفع الفقاعات.
ضع طبق ثقافة الجهاز الجزء الأمامي في حاضنة ثقافة الخلية. توجيه خطوط الأنابيب من خلال الجزء السفلي من باب الحاضنة لمنع التدخل في فتح وإغلاق الباب. وضع خطوط أنابيب مع الخزان في أداة محول الضغط.
ربط الجانب صمام ثلاثي الاتجاه إلى محول الضغط إعداد بينما يتدفق برنامج تلفزيوني من خلال الخط لتجنب فقاعات الهواء من دخول خطوط الأنابيب. داخل خزانة السلامة البيولوجية المعدة لتحريض الإصابة المفتوحة تعيين منظم الضغط على منصة ثقب إلى قوة 50 رطل لكل بوصة مربعة لتوليد قوة ثقب كافية على الكائنات التي يصل قطرها إلى 4.5 ملليمتر. ضع رذيلة التتبع المتقاطعة على مقبس المختبر أمام منصة الثقب.
تمديد ذراع المكبس إلى أقصى مسافة لها ووضع قمة القرنية داخل منطقة ملليمتر واحد من الكائن ثقب، تراجع ذراع المكبس وجعل الجزء الأمامي سنتيمتر واحد أقرب إلى الكائن ثقب. لإطلاق جهاز ثقب، قم بتشغيل الجهاز وفتح صمام سولينويد مع التبديل الثاني على الجهاز. لسحب الجهاز من العين، اضغط على المفتاح الثاني، وتحقق من تحريض الإصابة المناسب عن طريق الفحص البصري وتسرب الوسائط من موقع الإصابة.
بعد الجراحة، تم تقييم سلامة ظهارة القرنية عن طريق التصوير باستخدام التصوير المقطعي للتماسك البصري. تم تصوير أنسجة الجزء الأمامي المصاب مباشرة بعد الإصابة وبعد 72 ساعة من الإصابة. لا تظهر العينان الخاضعتان للرقابة أي اضطراب ملحوظ في القرنية بينما تم تحديد إصابات واضحة عبر القرنية بعد الإصابة.
ومن الإسقاط الأقصى للكثافة من أعلى إلى أسفل، كان من الواضح أن الإصابات كانت غير منتظمة في الشكل والحجم، ولكن حجم الإصابة انخفض على مدى 72 ساعة. لوحظ الضغط بين العينين في الأيام الثلاثة الأولى قبل الجراحة لتحديد استقرار الضغط في النطاق المقبول. في النتائج التمثيلية تقع ثلاث من أصل خمس عيون ضمن نطاق الضغط بين العينين المقبول.
يتغير الضغط بين العينين بسبب إصابة الكرة الأرضية المفتوحة والتدخل العلاجي. بعد تحريض إصابة الكرة الأرضية المفتوحة ، انخفض الضغط بشكل كبير وظل منخفضا حتى اكتملت التجربة. أدى علاج الأنسجة المصابة بمادة لاصقة من الجلد إلى زيادة الضغط بين العينين مقارنة بالأنسجة غير المعالجة ، مما يشير إلى أنه يمكن استخدام هذه الطريقة لقياس فعالية العلاجات لاستعادة الضغط داخل العين.
الإعداد الأولي للجزء في زراعة الأعضاء أمر بالغ الأهمية لاستقرار الأنسجة على المدى الطويل. أكثر من تشديد الحلبة يمكن أن يسبب الضغط على الأنسجة والحد من الامتثال.
