פציעות גלובוס פתוח עלולות להוביל לאובדן ראייה קבוע אם לא יתפסו. מודל זה של תרבות איברים בחלקו החורי מאפשר הערכה של פציעות אלה במסגרת הצורך בניסויים בבעלי חיים. פרוטוקול זה מאפשר מעקב אחר פציעות כדור פתוח, וטיפולים, כדי לייצב את הפציעה במשך שלושה ימים או יותר עם פלטפורמת תרבות איברים.
שידגים את ההליך יהיה טרנט פירסון, טכנאי מחקר ממעבדת ד"ר בויס. כדי להתחיל, להניח את הוילון הכירורגי ואת המכשירים הנדרשים עבור הניתוח ברוטו. הקימו את ארון הבטיחות הביולוגי להדמיית העיניים על המיקרוסקופ הניתח.
הקימו את ארון הבטיחות הביולוגית להרכבה של כלים. הקם את סביבת העבודה של אינדוקציה לפציעות כדור פתוח בתוך ארון הבטיחות הביולוגי. מקם את סגן המעקב הצולב על שקע המעבדה, מול פלטפורמת הנקב.
לאחר הסרת רקמות מסלוליות נוספות ושטיפת העיניים עם PBS אנטי-מיקוטי אנטישמי, כדי להקיף את העין מניח את העין על גזה ספוג PBS אנטי-מיקוטית אנטי-מיקוטית. השתמש בסכין גילוח סטרילית או אזמל כדי ליצור חתך ליד קו המשווה של העין. ואז להקיף את העין באמצעות מספריים כירורגיים מעוקלים כדי לבודד את העין הנעימה.
השתמש במספריים זעירים כעל חפירה כדי לגרוף את ההומור הזגג מהקטע הזעיר ולהסיר את העדשה מהקטע החלק החלקי הזעיר עם מספריים זעירים. חותכים בהדרגה את הקשתית לשורש הקשתית רדיאלית עד שעבודת הרשת הטראבולרית נראית לעין. להאריך את החתך 360 מעלות סביב הקשתית, כדי לחשוף את כל אזור רשת trabecular ולנקות כל קשתית שיורית שנותרה המכסה את רשת trabecular במידת הצורך.
חותכים את שרידי הגוף הססילי האחורי לאזור רשת trabecular משאיר רק רצועה דקה מילימטר אחת של הרקמה. לאחר הצבת הקטע החלקי בחלקו התחתון בצלחת פטרי. רטוב צמר גפן במדיה וטבול בעדינות במרכז הקרנית כדי להסיר כל פיגמנט.
החזק את העיניים עם מלקחיים ולהסיר פיגמנט נוסף סביב sclera על ידי ניגוב. מניחים את החלק החלק העליון ההפוך מעל האזור המוגבה של המנה התחתונה, ומבטיחים כי הקרנית תישאר במרכז האזור המוגבה. מקם את טבעת ההידוק על גבי המקטע החדש של החלק העליון, והידק בעדינות את הברגים באמצעות מקש L.
חבר את שני המחברים הנוזליים עם טבעות O ליציאות משורשלות בתחתית המנה. למחבר הנוזלי הראשון לצרף 18 מד 90 מעלות רכזת מחט כפופה, אורך של צינורות, רכזת מחט 18 מד, מסנן מזרק ניילון, שסתום משולש ומזרק 20 מ"מ מלא במדיה. למחבר הנוזלי השני לצרף 18 מד 90 מעלות רכזת מחט כפופה, אורך של צינורות, רכזת מחט 18 מד, שסתום משולש כפי שהודגם עבור מחבר הנוזל הראשון ולאחר מכן לצרף את חלק החבית של מזרק סטרילי 10 מיליליטר, אשר ישמש כמאגר כדי לתפוס את הנוזל ואת הבועות.
שמירה על שסתומים משולשים פתוחים כראוי למזרקים, בעדינות לדחוף את המדיה דרך המערכת, באמצעות יציאת מחבר fluidics הראשון. כדי לנפח את המקטע החלק החלק החורי, מלאו את הצינורות במדיה ובסופו של דבר מלאו את המאגר. הסר את הבועות על ידי דוחף בעדינות את התקשורת לתוך המנה ולהפוך את המנה לדחוף את הבועות.
מניחים את מנת תרבות האיברים של המקטעים הנעורים באינקובטור תרבית התאים. כוון את קווי הצינורות החוצה דרך תחתית דלת האינקובטור כדי למנוע הפרעה עם פתיחת הדלת וסגירה. מקם את קווי הצינורות עם המאגר במכשיר מתמר הלחץ.
חבר את שסתום שלושת הכיוונים הצדדיים אל מתמר הלחץ שהוקם בזמן ש- PBS זורם דרך הקו כדי למנוע מבועות האוויר להיכנס לקווי הצינורות. בתוך ארון הבטיחות הביולוגי המוכן לאינדוקציה של פגיעה פתוחה להגדיר את וסת הלחץ על פלטפורמת ניקוב לכוח 50 פאונד לאינץ 'מרובע ליצירת כוח ניקוב נאות על האובייקטים של עד 4.5 מילימטרים בקוטר. מקם את סגן המעקב הצולב על שקע המעבדה מול פלטפורמת הנקב.
הרחיבו את זרוע הבוכנה למרחק המקסימלי שלה ומיקמו את פסגת הקרנית בתוך אזור מילימטר אחד של העצם המנקב, נסוגו מזרוע הבוכנה וקרבו את המקטע הימני סנטימטר אחד קרוב יותר לעצם המנקב. כדי להפעיל את מכשיר הדקירה, הפעל את המכשיר ופתח את שסתום הסולנואיד עם המתג השני במכשיר. כדי לסגת מהמכשיר מהעין, לחץ על המתג השני, אמת את אינדוקציה נאותה של פציעה על ידי בדיקה חזותית ודליפת מדיה מאתר הפציעה.
לאחר הניתוח, תקינות האפיתל הקרנית הוערכת באמצעות הדמיה באמצעות טומוגרפיה קוהרנטית אופטית. רקמת המקטעים הימניים הפצועה הוצגה מיד לאחר פציעה ו-72 שעות לאחר הפציעה. העיניים הנשלטות לא מראות הפרעה ניכרת בקרנית בעוד פציעות ברורות אותרו דרך הקרנית לאחר הפציעה.
מהתחזית האינטנסיבית המקסימלית מלמעלה למטה, היה ברור כי הפציעות היו חריגות בצורתן ובגודלן, אך גודל הפציעה ירד במשך 72 שעות. לחץ בין-עיני נצפה בשלושת הימים הראשונים לפני הניתוח כדי לקבוע את יציבות הלחץ בטווח המקובל. בתוצאות הייצוגיות שלוש מתוך חמש עיניים נופלות בטווח הלחץ הבין-עיני המקובל.
הלחץ הבין-עיני משתנה עקב פגיעה בכדור הארץ הפתוחה והתערבות טיפולית. לאחר גיוס הפציעות בכדור הארץ הפתוח, הלחץ ירד באופן משמעותי ונשאר נמוך עד שהניסוי הושלם. טיפול ברקמות הפגומות עם דבק dermabond הביא ללחץ בין עיני מוגבר בהשוואה לרקמה לא מטופלת, מה שמצביע על כך שניתן להשתמש בשיטה זו כדי למדוד את היעילות של הטיפולים לשחזור הלחץ התוך עיני.
ההגדרה הראשונית של הקטע בתרבות האיברים היא קריטית ליציבות ארוכת הטווח של הרקמה. הידוק יתר של הטבעת עלול לגרום ללחץ על הרקמה ולהפחית את הציות.
