跟踪开放全球伤害和治疗性能的前段器官文化平台

如果不加以治疗，开放地球损伤可能导致永久性视力丧失。这种前段器官培养模型允许在动物试验的需要范围内评估这些损伤。此协议允许跟踪开放球体损伤和治疗，通过器官培养平台将损伤稳定三天或三天以上。

展示这一程序的将是来自博伊斯博士实验室的研究技术员特伦特·皮尔逊。首先，铺设手术窗帘和大解剖所需的仪器。设置生物安全柜，可视化解剖显微镜上的眼睛。

设置菜装生物安全柜。在生物安全柜内设置开放式地球伤害感应工作空间。将交叉跟踪副位放置在实验室插孔上，放在穿刺平台前。

取出额外的轨道组织并用抗生素抗菌剂PBS清洗眼睛后，将眼睛置于抗生素抗肌质PBS浸泡纱布上。使用无菌剃须刀或手术刀在眼睛赤道附近创建切口。然后用弯曲的手术剪刀将眼睛分隔，以隔离前眼。

使用微型剪刀作为铲子，从前段铲出活泼的幽默，并用微型剪刀从前段取下镜头。逐渐将虹膜截到虹膜根部，直至可见气管网状。将切口延长至虹膜周围 360 度，以暴露整个气管网状区域，并在必要时清理覆盖气管网状物的任何剩余虹膜。

修剪后方的硅状身体残余物到十形网状区域，只留下一毫米薄的组织带。将前段放在培养皿中后。在介质中湿棉签，轻轻涂抹在角膜中央以去除任何色素。

用钳子握住眼睛，擦拭以去除囊中周围的额外色素。将倒置前段置于底盘的升高区域，确保角膜保持在高架区域的中心。将夹紧环放在新放置的前段顶部，然后用 L 键轻轻拧紧螺丝。

将带有 O 环的流体连接器连接到盘底的螺纹端口。第一个流体连接器连接 18 仪表 90 度弯曲针头，管子长度，18 度针头，尼龙注射器过滤器，三向阀和充满介质的 20 毫米注射器。到第二个流体连接器连接 18 仪表 90 度弯曲针头，管子长度，18 度针头轮毂，第一个流体连接器演示的三向阀，然后连接无菌 10 毫升注射器的桶部分，这将作为一个储液池来捕捉液体和气泡。

使用第一个流体连接器端口，保持三向阀门适当打开注射器，轻轻推动介质穿过系统。要膨胀前段，请用介质填充管子，并最终填充储层。通过轻轻地将介质推入盘中并倒置盘子以推出气泡来去除气泡。

将前段器官培养皿放入细胞培养孵化器中。将管线引导到孵化器门的底部，以防止干扰门的打开和关闭。将油管管线与储层一起放置在压力传感器仪处。

将侧三向阀连接到设置的压力传感器，而 PBS 则流过管道，以避免气泡进入管线。在为开放式伤害感应准备的生物安全柜内，将穿刺平台上的压力调节器设置为每平方英寸 50 磅力，以便对直径高达 4.5 毫米的物体产生足够的穿刺力。将交叉跟踪副位放置在穿刺平台前的实验室插孔上。

将活塞臂延伸至最大距离，将角膜顶点放置在穿刺物体的一毫米区域内，缩回活塞臂，使前段离穿刺物体近一厘米。要启动穿刺装置，打开设备，打开电磁阀，并在设备上打开第二个开关。要从眼睛中收回设备，请按第二个开关，通过目视检查和从伤害部位泄漏的介质验证适当的伤害感应。

手术后，通过光学连贯断层扫描成像评估角膜上皮的完整性。受伤的前段组织在受伤后和受伤后72小时内立即被成像。受控的眼睛显示角膜没有明显的损伤，而明显的损伤在受伤后通过角膜找到。

从自上而下的最大强度预测，很明显，伤害的形状和大小是不规则的，但伤害大小在72小时内减少。手术前三天观察到血管间压力，以确定在可接受范围内的压力稳定性。在具有代表性的结果中，五分之三的眼睛属于可接受的间层压力范围。

由于开放球损伤和治疗干预，血管间压力发生变化。开放式地球损伤感应后，压力显著降低，并保持低位，直到实验完成。与未经治疗的组织相比，使用脱皮胶粘剂治疗受伤的组织会导致血管间压力增加，这表明该方法可用于测量治疗恢复血管内压力的疗效。

器官培养部分的初始设置对组织的长期稳定性至关重要。过度拧紧环会导致组织压力和减少合规性。